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104 BESTELLUNGEN, RÜCKFRAGEN, KUNDENDIENST UNTER TEL.: 030 77 99 06-92 ODER PER E-MAIL: [email protected] SEREN MEDIEN ADHÄSIONS- FAKTOREN ZELLKULTUR- PLASTIK INDUSTRIELLE ZELLKULTUR MYKOPLASMEN- REAGENZIEN WACHSTUMS- FAKTOREN ZELLKULTUR- DIAGNOSTIKA ZELLKULTUR- REAGENZIEN ANTIBIOTIKA TRENNLÖSUNGEN UND LEKTINE REINSTWASSER PUFFER Enzyme ENZYME Trypsin - aus porcinem Pankreas, Trypsin/EDTA-Lösungen Trypsin/EDTA-Lösungen (0,05 oder 0,02 % in PBS, ohne Ca 2+ /Mg 2+ ) werden für das Passagieren von Monolayer-Kulturen eingesetzt. Trypsin schädigt die Zellmembran und zelluläre sowie auch interzel- luläre Mucoproteine. Trypsin kann durch den Ein- satz von Serum gehemmt werden. (siehe Tabelle „Vergleich von Collagenase und Trypsin“). Die für die Herstellung der verschiedenen Trypsin- Lösungen eingesetzte Trypsin-Trockensubstanz wird auf Mykoplasmen und Parvoviren geprüft. Nur wenn beide Testergebnisse negativ sind, er- folgt die Freigabe der Lösungen. Produkt Kat. Nr. Einheit EDTA (Versen), 1 % in PBS ohne Ca 2+ /Mg 2+ Lagertemperatur: +2 – +8 °C L 2113 100 ml Trypsin (1:250), 0,25 % in PBS ohne Ca 2+ /Mg 2+ Lagertemperatur: –20 °C L 2123 100 ml Trypsin (1:250), 2,5 % in PBS ohne Ca 2+ /Mg 2+ Lagertemperatur: –20 °C L 2133 100 ml Trypsin (1:250) /EDTA (0,05/0,02 %) in PBS ohne Ca 2+ /Mg 2+ Lagertemperatur: –20 °C L 2143 100 ml (10 x) Trypsin (1:250) /EDTA (0,5/0,2 %) in (10 x) PBS ohne Ca 2+ /Mg 2+ Lagertemperatur –20 °C L 2153 100 ml Trypsin (1:250) /EDTA (0,25 %/0,02 %) in PBS ohne Ca 2+ /Mg 2+ Lagertemperatur: –20 °C L 2163 100 ml Trypsin-Trockensubstanz Die Trypsin-Aktivität ist mind. 1250 USP Einheiten/mg. Die Aktivität der Trypsin-Trockensubstanz entspricht etwa der fünffachen Aktivität des Trypsins (1:250).* Lagertemperatur: +2 – +8 °C L 2103-20G 20 g Spezifikation der eingesetzten Rohsubstanz Trypsin (1:250): • wasserlöslich bei 2 % (w/v) • Gewichtseinbuße durch Trocknung < 5 %; pH Wert 3,0 – 4,0. • Spezifische Aktivität: 275 USP U/mg (+/–25) Definitionen USP: • 1 USP Einheit ist die Enzymmenge, die die Hydrolyse von BAEE (Benzoylargininethylester) bewirkt, die zu einem Anstieg der Lichtabsorption von 0,003 Extinktionseinheiten pro Minute führt. • 1 USP Einheit = 1 NF Einheit (National Formulary XIII S. 646/7) * Um die Aktivität dieser Trypsin-Trockensubstanz auf die Aktivität von Trypsin 1:250 einzustellen, werden nur 20 %, d.h. 1/5, der Trypsin-Trockensubstanz mit der Aktivität von mindestens 1250 USP Einheiten/mg eingesetzt.
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104 bestellunGen, rÜckFrAGen, kundendienst unter tel.: 030 77 99 06-92 oder Per e-mAil: [email protected]
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Trypsin - aus porcinem Pankreas, Trypsin/EDTA-Lösungen
trypsin/edtA-lösungen (0,05 oder 0,02 % in Pbs, ohne ca2+/mg2+) werden für das Passagieren von monolayer-kulturen eingesetzt. trypsin schädigt die Zellmembran und zelluläre sowie auch interzel-luläre mucoproteine. trypsin kann durch den ein-satz von serum gehemmt werden. (siehe tabelle „Vergleich von collagenase und trypsin“).
die für die herstellung der verschiedenen trypsin-lösungen eingesetzte trypsin-trockensubstanz wird auf mykoplasmen und Parvoviren geprüft. nur wenn beide testergebnisse negativ sind, er-folgt die Freigabe der lösungen.
Produkt Kat. Nr. Einheit
EDTA (Versen), 1 %in Pbs ohne ca2+/mg2+
lagertemperatur: +2 – +8 °c
l 2113 100 ml
Trypsin (1:250), 0,25 %in Pbs ohne ca2+/mg2+
lagertemperatur: –20 °c
l 2123 100 ml
Trypsin (1:250), 2,5 %in Pbs ohne ca2+/mg2+
lagertemperatur: –20 °c
l 2133 100 ml
Trypsin (1:250) /EDTA (0,05/0,02 %)in Pbs ohne ca2+/mg2+
lagertemperatur: –20 °c
l 2143 100 ml
(10 x) Trypsin (1:250) /EDTA (0,5/0,2 %)in (10 x) Pbs ohne ca2+/mg2+
lagertemperatur –20 °c
l 2153 100 ml
Trypsin (1:250) /EDTA (0,25 %/0,02 %) in Pbs ohne ca2+/mg2+
lagertemperatur: –20 °c
l 2163 100 ml
Trypsin-Trockensubstanz die trypsin-Aktivität ist mind. 1250 usP einheiten/mg. die Aktivität der trypsin-trockensubstanz entspricht etwa der fünffachen Aktivität des trypsins (1:250).*lagertemperatur: +2 – +8 °c
l 2103-20G 20 g
Spezifikation der eingesetzten Rohsubstanz Trypsin (1:250):
• wasserlöslich bei 2 % (w/v)• Gewichtseinbuße durch trocknung < 5 %; ph wert 3,0 – 4,0.• spezifische Aktivität: 275 usP u/mg (+/–25)
definitionen usP:• 1 usP einheit ist die enzymmenge, die die hydrolyse von bAee (benzoylargininethylester) bewirkt, die zu einem Anstieg
der lichtabsorption von 0,003 extinktionseinheiten pro minute führt. • 1 usP einheit = 1 nF einheit (national Formulary Xiii s. 646/7)
* um die Aktivität dieser trypsin-trockensubstanz auf die Aktivität von trypsin 1:250 einzustellen, werden nur 20 %, d.h. 1/5, der trypsin-trockensubstanz mit der Aktivität von mindestens 1250 usP einheiten/mg eingesetzt.
BIOCHROM KAT 10 Druckfassung.indd 104 01.12.2009 11:39:42 Uhr
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SubstanzEDTA (Versen)
(in mg/l)Kat. Nr. L 2113
Trypsin (0,25 %)(in mg/l)
Kat. Nr. L 2123
Trypsin (2,5 %)(in mg/l)
Kat. Nr. L 2133
Trypsin/EDTA- (0,05/0,02 %)
(in mg/l)Kat. Nr. L 2153
(10 x) Trypsin/EDTA
(in mg/l)Kat. Nr. L 2153
naci 8000 8000 8000 8000 80000
kci 200 200 200 200 2000
na2hPo4 1150 1150 1150 1150 11500
kh2Po4 200 200 200 200 2000
edtA-na2 10000 – – 200 2000
trypsin – 2500 25000 500 5000
Tab. 43: Zusammensetzung der Trypsin/EDTA-Präparationen
Anwendungshinweis für Trypsin (1:250)/EDTA-Lösungen:
trypsin (1:250) /edtA-lösung (0,05/0,02 % in Pbs ohne ca2+/mg2+) werden für das Passagieren von monolayer-kulturen eingesetzt:1. Zellkultur (monolayer) mit physiologischer nacl-lösung oder Pbs-lösung (kat. nr. 1825/0) ohne ca2+/mg2+ waschen.2. eine kleine menge trypsin (1:250) /edtA-lösung auf die Zellkultur pipettieren; ein dünner Flüssigkeitsfilm genügt. 3. Zellkultur bei +37 °c für ca. 5 min inkubieren.4. Zellsuspension abzentrifugieren oder direkt in serumhaltiges kulturmedium überführen.
Für höhere trypsinkonzentrationen wird alternativ empfohlen, die trypsinierung bei +2 – +8 °c vorzunehmen; dies schont die abzulösenden Zellen.
Tab. 44: Vergleich der Eigenschaften von Collagenase und Trypsin
Eigenschaft Collagenase Trypsin
Angriffspunkt collagen, retikulin undandere interzellularsubstanzen
zelluläre und interzelluläremucoproteine
ph-optimum 6,5 – 7,8 7,8 – 8,7
optimale Aktivität mit ca2+ und mg2+ ohne ca2+ und mg2+
einfluss auf die Zellen keine schädigung der Zellmembran schädigung der Zellmembran
einfluss von serum collagenase kann durch serum inhibiert (gehemmt) werden und variiert je nach charge des serums und charge der collagenase; hemmung jedoch offensichtlich schwächer als bei trypsin.
starke Aktivitätseinbuße, hemmung
BIOCHROM KAT 10 Druckfassung.indd 105 01.12.2009 11:39:42 Uhr
![[DE] Infografik: Mobile Ranking-Faktoren 2015](https://static.fdokument.com/doc/165x107/5887e42e1a28abfb678b6e09/de-infografik-mobile-ranking-faktoren-2015.jpg)
