FasL/CD95L

Apoptosesignalling

Hepatozyten APOPTOSE

AlkoholHepatitis B virus

Hepatektomie

LEBERSCHÄDIGUNG

Zytokine(EGF,TGF,IL-1,IL-6,IL-15)

Anti-apoptoticFLIP, Bcl-xL, IAPs

LEBERREGENERATION

Hepatozyten PROLIFERATION

Mitogenic signalingFas/CD95Rezeptor

MAPK

MEKP

MEKKP

RafP

P

TRAF1,2,3

RIPKinase

DD

Fas/CD95

FasL/CD95Loder Anti-Fas Antikörper

Fas Signalwege

DD= Death Domain

FADD

Casp-8

Pro-Casp-3

FLIP

X

NFkB

Ras

HGF-R(Met)

Bcl-xL

JAK

P

STATs

STATs

PI-3K

P AKT

PIP3

PDKs

P BAD

Bcl-xL

Bcl-xL

MyD88IRAK

EGF/TGF, HGF IL-6, IL-15InsulinIL-1

BID

Apaf-1 Casp-9

AP-1myc

Cyt c

JNK

MEKK P

P

ProliferationSurvival

IAP

IAP

IAPCasp-3

IkBP

NFkB

NIK, IKK/NEMO

Arbeitsplan1. Etablieren der Bedingungen, unter denen kultivierte Hepatozyten unter Zugabe von Fas Ak oder FasL proliferieren und nicht sterben (Cytokine cocktail)

2. Messen von Komponenten des apoptotischen Fas Signalweges (Proteinquantifizierung über ECL-Western, DISC-IP, ELISA und Caspase-Assays

3. Messen von Fas Apoptoseweg INHIBITOREN (FLIPs, Bcl-xL/Bcl-2, IAPs) (wie unter #2)

4. Messen von Komponenten des MITOGENEN Fas Signalweges (MAPK, JNK, NFkB-Wege) (Proteinquantifizierung über ECL-Western, DISC-IP, Kinase Assays, EMSA(NFkB), Cytosol/Kern Lokalisierung) (Kollaboration H. Pahl)

5. Messen von Komponenten der MITOGENEN Cytokine Signalwege (MAPK, NFkB, PI-3K/AKT, JAK-STAT) (Proteinquantifizierung über ECL-Western, Kinase Assays, EMSA(NFkB), Cytosol/Kern Lokalisierung) (Kollaboration U. Klingmüller)

6. Nutzen der gesammelten Daten zur bioinformatischen Analyse A) Analyse der beteiligten Proteindomänen, Proteinsequenzen einschliesslich komparativer Genomik (Dandekar) B) Aufstellen von Differentialgleichungen um ein mathematisches Modell der Fas-induzierten Leber Regeneration zu entwickeln (Timmer). A) + B) Qualitative und quantitative Vorhersagen gewinnen und testen , dann verfeinern des mathematischen Modelles durch Hinzufügen (Protein X), Wegstreichen, Modifizieren von Komponenten und Interaktionswegen