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Produkte und Anwendungen für die Molekulare Diagnostik und Forschung
Maxwell® Systeme
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Inhalt
Promega in Ihrem Labor 3
Service mit höchster Qualität 4
Maxwell® Geräte 6
Maxwell® RSC 8
Maxwell® RSC 48 10
MaxPrep™ 12
Hochdurchsatz-Automatisierung 14
Anwendungen 16Molekularpathologie 16
Liquid Biopsy 18
miRNA 19
Onkologie / Humangenetik 20
HLA / Immunologie 21
Virologie / Bakteriologie 22
Krankheitserreger aus Zecken 23
DNA und RNA aus Pflanzen 24
GMO in Lebensmitteln, Saatgut und Tierfutter 25
Maxwell® und RIDA®GENE 26
Übersicht Maxwell® Geräte und Kits 30
Amplifikation 32
Das Helix® System 38
Unsere Leistungen für Sie 39
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Promega in Ihrem Labor
Unsere Innovation, Ihr Fortschritt
Seit 40 Jahren steht Promega als einer der größten Hersteller weltweit für Reagenzien, Kits und Gerätesysteme. Alle Maxwell® Geräte, sowie nahezu 90 % unserer Kits und Reagenzien stellen wir selbst her. Jeden Schritt, vom Einkauf der Rohstoffe bis zur Lieferung der Produkte ins Labor, kontrolliert und dokumentiert Promega als ISO-zertifiziertes Unternehmen. Alle Promega Produkte sind von sehr hoher sowie garantiert gleichbleibender Qualität. Das Qualitätsmanagement von Promega gewährleistet eine kontinuierliche Verbesserung von Produkten und Prozessen. Promega hält über 500 Patente für die Entwicklung von Reagenzien. Das alles macht Promega zu einem wichtigen Akteur in der Molekularbiologie.
Inhalt
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Spezialist und Partner
Produkte und Service mit höchster Qualität
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Unsere Expertise für Ihren Erfolg
Promega hat langjährige Expertise bei der Entwicklung von Produkten für die Grundlagen- forschung, für die klinische Biologie, zum Wirkstoff-Screening oder für die molekulare klinische Forschung. Die Anwendung dieser Produkte führte bereits zu tausenden von wissenschaftlichen und medizinischen Publikationen.
Für molekularbiologisch-klinische Labore hat Promega vielfältige Produkte, u.a. für die CE-IVD-zertifizierte Isolierung von Nukleinsäuren oder zur Amplifikation. Die Produkte werden nach höchsten Qualitätsmaßstäben gefertigt.
• Produktionsstätte nach GMP-Richtlinien
• Zertifiziert nach ISO 13485 und ISO 9001
• IVD-zertifizierte Produkte
Professionelle Unterstützung Ihrer Laborarbeit
Promega beantwortet nicht nur Ihre Detailfragen zu speziellen Produkten, sondern berät Sie auch umfangreich zum richtigen Einsatz und deren Anwendung im Labor – gerne durch unsere Verkaufsberater direkt bei Ihnen vor Ort oder durch das Promega Team in Mannheim.
Promega veranstaltet Schulungen zu verschiedensten Themen – in Ihrem Labor, in einem der Promega Schulungszentren oder online. Schauen Sie auf der Promega Website nach Veranstaltungen!
Promega Service-Leistungen für Sie
• Promega produziert selbst! Dadurch können Sonderabfüllungen und die Fertigung von Custom-Produkten nach Ihren Wünschen realisiert werden.
• Spezialanwendungen werden möglich! Mit dem Promega Service zur Optimierung von Protokollen für spezifische Applikationen oder Proben.
• Laborautomatisierung ist einfach! Mit professioneller Beratung und Implementierung einer Applikation auf Ihrer Laborplattform durch Promega.
Rundumservice für Ihre
Promega Geräte aus einer Hand!
Wartung, Reparatur und Inspektion direkt im Service-
Center in Mannheim oder bei Ihnen im Labor durch
einem Promega Techniker.
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Maxwell® GeräteSchnelle und zuverlässige DNA- oder RNA-Isolierung
Maxwell® Geräte isolieren aus einer Vielzahl von Probenmaterialien automatisiert und effizient DNA oder RNA. Das System führt alle Schritte des Aufreinigungsprozesses selbstständig durch: Aufschluss, Lyse, Reinigung und Elution in nur circa 30 Minuten.
Die Maxwell® Geräte transportieren im Gegensatz zu anderen Systemen keine Flüssigkeiten, sondern paramagnetische Partikel. Das verhindert mögliche Kontamination durch Aerosole oder Tröpfchenbildung und vermeidet Verstopfungsprobleme von Flüssigpipettiersystemen. Außerdem wird die Verwendung von Pipettenspitzen überflüssig – das spart zusätzlich Lagerplatz und schont die Umwelt.
Genomische DNA
• Vollblut / Buffy-Coat• Gewebe frisch / gefroren• Zellen aus Zellkultur• FFPE-Gewebe• Speichel• Abstriche• Stuhl• Weitere Körperflüssigkeiten• Pflanzen• Lebensmittel
Gesamt-RNA / miRNA
• Vollblut / Buffy-Coat• Zellen aus Zellkultur• Gewebe• Pflanzen
Virale und bakterielle DNA / RNA
• Plasma / Serum• Liquor• Stuhl• Tupfer / Abstrich• Zecken
ccfDNA
• PlasmaNeue
Applikation
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Prinzip der Aufreinigung einer Probe in der Kartusche
Die Probe wird im Gerät durch schnelles Auf- und Abbewegen des Einwegstößels gemischt und aufgeschlossen.
Die aufgereinigte DNA oder RNA wird im Elutionsgefäß abgelöst.
Die paramagnetischen Partikel werden nach der Magnetisierung des Stößels festgehalten.
Die durch den Aufschluss freigesetzte Nukleinsäure wird durch die paramagnetischen Partikel gebunden.
Die DNA oder RNA wird durch wiederholtes Binden und Ablösen der Partikel in mehreren Waschschritten gereinigt.
Das Probenmaterial wird in die Kartusche mit vorgefüllten Reagenzien zugegeben.
1 2 3
4 5 6
Stößel
Probe
Magnet
Amplifikate von Blutproben weiblicher (F) und männlicher (M) Probanden. Die Proben wurden mit dem Maxwell® 16 System aufgereinigt. Im ersten und zweiten Lauf wechselten sich M- und F-Proben jeweils so ab, dass am selben Platz nacheinander eine M- und eine F-Probe extrahiert wurden. Das Gelbild zeigt das Ergebnis nach PCR-Amplifikation mit spezifischen Banden für das Y-Chromosom ausschließlich für M-Proben. Eine Kreuzkontamination ist weder innerhalb eines Laufs noch zwischen aufeinanderfolgenden Proben- durchläufen zu beobachten. C = Kontrollmaterial, L = Längenmarker
Keine Kreuzkontamination
Durch die besondere Technologie des Aufreinigungsverfahrens und die optimierte Auto- matisierung kann jegliche Kreuzkontamination ausgeschlossen werden. Der Anwender erhält robuste und reproduzierbare Ergebnisse.
• Keine Kontamination zwischen den Proben innerhalb eines Laufes
• Keine Kontamination zwischen aufeinanderfolgenden Probendurchläufen
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Isolierung und Aufreinigung von DNA und RNA aus verschiedensten Proben
Maxwell® RSC
Ihre Vorteile
Schnell: 1 – 16 Proben in ca. 30 Minuten
Sicher: Keine Kreuzkontamination, hohe Reproduzierbarkeit, integrierte UV-Lampe zur Dekontamination
Benutzerfreundlich: Vorgefüllte Einmal- kartuschen, einfache Bedienung mit vor- installierten Protokollen und Tablet-PC
Probennachverfolgung: Barcode-System und Barcode-Scanner zur sicheren Probennachverfolgung, Datenübertragung auf den PC oder Integration in LIMS
Inklusive Quantifizierung: Schnelle und einfache Probenquantifizierung mit dem integrierten QuantusTM Fluorometer
Spart Platz: Kleines Tischgerät – Platzbedarf eines Laptops
Video zum Gerät:
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Schnell, sicher und benutzerfreundlich – für reproduzierbare Ergebnisse und hohe Ausbeuten
EU 2017/746
Für CE-IVD-zertifizierte Prozesse in der Molekulardiagnostik
Maxwell® CSC
Das CSC-IVD-Gerät entspricht der CE-Zertifizierung für In-vitro-Diagnostika und ist unter GMP-Richtlinien produziert. Das Gerät extrahiert Nukleinsäuren in hoher Qualität mit reproduzierbaren Ergebnissen und hohen Ausbeuten.
Merkmale
• Anwenderidentifizierung und Anwenderautorisierung am Gerät
• Datenintegrität und -Sicherheit durch elektronische Signatur
Video zum Gerät:
Gerätespezifikationen
Maxwell® RSC Maxwell® CSC (CE-IVD)
Dauer eines Laufs28 – 80 Minuten (je nach Probentyp und Methode)
28 – 80 Minuten (je nach Probentyp und Methode)
Proben (Kits) siehe Seite 6DNA Blut, RNA Blut,
DNA FFPE, RNA FFPE (weitere folgen)
Proben pro Lauf 1 –16 Proben 1 –16 Proben
Elutionsvolumen 50 – 100 µl 50 – 100 µl
UV-Lampe zur Dekontamination
ja ja
Barcode-Scanner optional ja
Integrierte Quantifizierung mit Fluorometer
ja nein
Gewicht 11 kg 11 kg
Größe33,0 x 34,5 x 29,9 cm
(B x L x H)33,0 x 34,5 x 29,9 cm
(B x L x H)
Stromanschluss100 – 240 V AC, 50/60 Hz, 2,5 A
100 – 240 V AC, 50/60 Hz, 2,5 A
IVD-zertifiziert nein ja
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Maxwell® RSC 48 Erhöhter Probendurchsatz mit bewährter Extraktionstechnologie
Das Maxwell® RSC 48 Gerät isoliert und reinigt Nukleinsäuren aus bis zu 48 Proben in einem Lauf. Dabei nutzt es die Extraktionstechnologie der bewährten Maxwell® Modelle für 16 Proben. Auch das Prinzip mit vorgefüllten Einmalkartuschen und die einfache Bedienung über ein Touchscreen-Tablet haben sich als sehr anwenderfreundlich erwiesen und wurden beibehalten. Trotz der Kapazität für 48 Proben ist das Gerät klein und braucht nur wenig Platz auf der Laborbank. Für den Auf- oder Abbau sind nur wenige Handgriffe erforderlich.
Ihre Vorteile
Verlässlich: Bewährtes Extraktionsprinzip mit vorgefüllten Probenkartuschen für reproduzier- bare Ergebnisse, automatische Selbstkontrolle für korrektes Beladen des Gerätes
Flexibel: Bis zu 48 Proben, für eine Vielzahl von Probentypen und Kits
Anwenderfreundlich: Intuitive Bedienung, schnelle Betriebsbereitschaft, wenig bis keine Probenvorbereitung
Kompatibel und per Software integrierbar: Mit MaxPrepTM Liquid Handling Station zur Probenvorbereitung und zum Pipettieren für nachfolgende Anwendungen
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Maxwell® RSC 48 Gerätespezifikationen
Dauer eines Laufs 22 – 68 Minuten (je nach Probentyp und Methode)
Proben pro Lauf 1 – 48 Proben
Elutionsvolumen 50 – 100 µl
UV-Lampe zur Dekontamination ja
Barcode-Scanner ja
Integrierte Quantifizierung mit Fluorometer optional
Gewicht 31 kg
Größe 53,0 x 50,8 x 21,7 cm (B x L x H)
Stromanschluss 100 – 240 V AC, 50 / 60 Hz, 4 A
Maxwell® Kit Ø Zeit / Lauf
Maxwell® RSC Whole Blood DNA Kit 37 Minuten
Maxwell® RSC Blood DNA Kit 36 Minuten
Maxwell® RSC Simply RNA Blood Kit 51 Minuten
Maxwell® RSC Simply RNA Cells Kit 53 Minuten
Maxwell® RSC Simply RNA Tissue Kit 52 Minuten
Maxwell® RSC DNA FFPE Kit 34 Minuten
Maxwell® RSC RNA FFPE Kit 34 Minuten
Maxwell® RSC ccfDNA Plasma Kit 68 Minuten
Maxwell® RSC miRNA Tissue Kit 64 Minuten
Maxwell® RSC Viral Total Nucleic Acid Purification Kit 30 Minuten
Maxwell® FSC DNA IQ™ Case Work Kit 22 Minuten
Beispiel-Laufzeiten für die Aufreinigung von 1 bis 48 Proben
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MaxPrep™ Liquid Handling Workstation
Die MaxPrep™ Liquid Handling Workstation ist die ideale Ergänzung zu Ihrem Maxwell® System. Der Benchtop-Pipettierroboter übernimmt zum einen die Schritte der Probenbearbeitung, bevor die Proben im Maxwell® Gerät prozessiert werden: Vorbereitung der Proben und Transfer in die Kartuschen, Einsetzen der Einmalstößel in die Kartuschen und Zugabe des Elutionspuffers. Die manuellen Schritte entfallen – das vorbereitete Rack muss nur noch im Maxwell® Gerät platziert werden. Zum anderen kann Ihnen der Liquid Handler alle Handgriffe zur Bearbeitung des Eluats nach der Isolierung abnehmen – zum Beispiel das PCR-Setup oder die Probenvorbereitung zur Quantifizierung.
Die Bedienung ist flexibel und besonders auf einfache Anwendung (Plug-and-Play-Software) ausgelegt. Eine aufwändige Programmierung ist nicht notwendig.
Das Besondere: Durch Übertragung von Daten zwischen den Geräten erlaubt die mitgelieferte Portal-Software eine lückenlose Probenverfolgung beim Transfer zwischen Maxwell® RSC und MaxPrep™ Geräten. Somit bilden Probenvorbereitung, Extraktion und Vorbereitung zur Downstream-Applikation einen integrierten Prozess.
Flexible Probenverarbeitung für den mittleren Durchsatz
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Modulare Nukleinsäureaufreinigung
Ihre Proben werden beim Transfer von einem zum nächsten Modul durch die Portal-Software nachverfolgt, die Proben-ID wird übertragen und die Software gibt das passende Protokoll für die nächsten Schritte vor.
Video zum Gerät:
Probenvorbereitung mit dem MaxPrepTM Liquid Handler
für die Isolierung mit dem Maxwell® Gerät
• Zugabe von Reagenzien wie Puffern oder Proteinase K
• Inkubation• Platzierung der Stößel• Transfer der Proben in die Kartuschen
Maxwell® RSC (1–16 Proben) Maxwell® RSC 48 (1–48 Proben)
Probenverarbeitung für Down- stream-Applikation mit dem MaxPrepTM Liquid Handler
• Transfer der Eluate in 96-Well-Platten• Vorbereitung zur Quantifizierung mit Quantifluor®
• Proben-Normalisierung• qPCR- und RT-PCR-Vorbereitung mit
GoTaq® oder Plexor®
• Setup für weitere PCR-Anwendungen
Nukleinsäureaufreinigung mit einem Maxwell® RSC Gerät
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Hochdurchsatz-AufreinigungMaxwell® Kits auf Ihrer Automations-Plattform
Ob Aufreinigung über Säulen oder mit magnetischen Beads, 96-Well- oder 384-Well-Format: Promega Kits für den Hochdurchsatz sind mit allen marktüblichen Automationsplattformen kompatibel. Nutzen Sie daher die Promega DNA- und RNA-Extraktions-Kits für die Automatisierung in Ihrem Labor – wir unterstützen Sie dabei.
Bewährtes Prinzip mit Maxwell® HT-Kits
Die Maxwell® Hochdurchsatz-(HT-)Kits erweitern den Erfolg des Maxwell® 16 Systems, das für den mittleren Probendurchsatz vor über 10 Jahren von Promega auf den Markt gebracht wurde. Es basiert auf einer zuverlässigen Chemie zur Isolierung und Reinigung von Nukleinsäuren für ein breites Probenspektrum. Im Kartuschenformat sind diese Kits bereits bei zahlreichen Kunden im Einsatz und können jetzt im Hochdurchsatzformat genutzt werden. Die Technologie ist robust, liefert reproduzierbare Ergebnisse und erfüllt alle Anforderungen an die heutigen Ansprüche der DNA- und RNA-Aufreinigung. So erhalten Sie Material von gleichbleibend hoher Qualität für verlässliche Daten bei Ihren Downstream-Analysen.
Beispiele für Maxwell® Hochdurchsatz-Kits
Protokolle getestet für:
Hamilton® Microlab
STAR
Thermo Scientific™
KingFisher™ Flex
Beckman Biomek®
4000/FX/NX
Eppendorf epMotion®
Serie
Tecan Freedom
EVO®
Maxwell® HT ccfDNA KitZur automatisierten Isolierung zellfreier DNA in einem Probenformat von bis zu 96 Proben. Es können 1–8 ml Plasma eingesetzt werden.
P P
Maxwell® HT Viral TNA KitFür die automatisierte Isolierung viraler Gesamt-DNA und -RNA. Geeignet für Serum, Plasma und andere Probenarten.
P P P P P
Maxwell® HT simplyRNA KitZur automatisierten Isolierung von RNA aus verschiedenen Proben wie Blut, Zellen oder Gewebe (frisch oder gefroren).
P P P P P
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Promega unterstützt Sie bei der Automatisierung in Ihrem Labor
Kontaktieren Sie uns, wenn Sie
• einen Promega Hochdurchsatz-Kit auf einer bestehenden Liquid-Handling-Plattform in Ihrem Labor aufsetzen wollen.
• ein für Sie spezifisches Protokoll auf einem High-Throughput-System aufsetzen wollen.• Hilfe bei der Auswahl einer geeigneten Automationsplattform für den Einsatz der Promega
Kits benötigen.
Für die Implementierung unserer Kits auf Ihrer Plattform
• modifizieren wir das Promega Kitprotokoll so, dass es zu Ihren Anforderungen passt.• generiert Promega Daten für das „Proof of Principle“.• können wir unsere Reagenzien, angepasst an Ihre Automationsbedürfnisse, abfüllen
und verpacken.
Wir helfen Ihnen, die Promega Technologien mit Ihrer Laborausstattung effizient zu kombinieren. Automationsexperten von Promega unterstützen Sie bei der Implementierung unserer Protokolle auf Ihrer Plattform.
1.Beratung durchAutomations-spezialisten
2.Aufsetzen
eines „Statementof Work“
3.Vor-Ort-
Implementierung
Unser Automationsspezialist wird ein „Statement of Work“ aufsetzen, um Ihre Anforderungen festzuhalten.
Wir planen im nächsten Schritt einen Termin zur Implementierung vor Ort bei Ihnen im Labor.
Damit wir Ihre Anforderungen an ein System genau
verstehen, sprechen Sie mit einem unserer Berater.
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Molekularpathologie Aufreinigung von DNA und / oder RNA aus FFPE-Schnitten
Formalin-fixiertes Paraffin-eingebettetes (FFPE) Gewebe ist eine wichtige Probenquelle für die Diagnostik. Allerdings ist die Isolation und Reinigung von Nukleinsäuren aus FFPE-Gewebe nicht trivial. Oft stehen nur kleine Mengen des Materials zur Verfügung, außerdem liegen die Nukleinsäuren in FFPE-Schnitten aufgrund des speziellen Fixierungsverfahrens häufig quervernetzt und chemisch verändert vor. Für die spätere PCR-Analyse ist es notwendig, aus diesen komplexen Proben eine möglichst hohe Ausbeute an qualitativ hochwertiger DNA oder RNA zu gewinnen. Das Maxwell® System bietet eine zeitgemäße Alternative zu den herkömmlichen Verfahren: Das System extrahiert Nukleinsäuren mithilfe paramagnetischer Partikel. Zudem verzichtet es vollständig auf gesundheitsschädliche Lösungsmittel wie Toluol oder Xylol.
Einfache Isolierung von DNA und / oder RNA aus FFPE-Schnitten mit dem Maxwell® System ohne gesundheitsschädliche Lösungsmittel
Kartusche vorbereiten
• Probe in Kartusche pipettieren• Elutionspuffer zugeben: variables
Volumen 50–100 µl• Kartusche in Gerät platzieren
Maxwell® Aufreinigung
1 2 3
Probe vorbereiten
• Programm starten• Ergebnis: hohe Ausbeute, sehr
reine DNA / RNA
Maxwell® Anwendung
• Paraffinschnitte + Puffer + Proteinase K
• Inkubation 8 Std. bei 70°C• Kein Toluol, kein Xylol, kein EtOH
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Maxwell® Anwendung
Bestimmung des MSI-Status von Tumorzellen als prädiktiver Biomarker für zielgerichtete Immuntherapien
Anwendungen
In der prädiktiven Diagnostik werden wie bei allen zielgerichteten Therapien geeignete Biomarker benötigt, die das Therapieansprechen eines Patienten voraussagen können. Die Mikrosatelliten-Instabilitätsanalyse (MSI) stellt solch einen prädiktiven Biomarker dar und wird z. B. vor Verschreibung von Immun-Checkpoint-Inhibitoren getestet. Ein derartiges Vor-Screening hilft dem Mediziner bei der Einschätzung der Funktionalität der konstitutionellen “Mismatch repair (MMR)-Gene”. Es kann einen frühen Hinweis auf das Vorliegen einer Mutation liefern und damit eine entsprechende Behandlung des Patienten ermöglichen.
Vorteile des MSI-Analyse-System-Kits
• Sie erhalten eine verlässliche Aussage über den MSI-Phänotyp. Bei der Genotypisierung des MSI-H-Status amplifiziert eine einzige Multiplex-PCR fünf unterschiedliche Marker.
• Probenverfolgung: Die Co-Amplifikation zweier Pentanukleotide polymorpher hoch-repetitiver Sequenzen ermöglicht die eindeutige Zuordnung der Proben und detektiert mögliche Kontaminationen mit anderer Patienten-DNA.
• Das MSI-Analyse-System erfüllt die Empfehlungen des 2003 NCI Workshop, Bethesda.
Mikrosatelliten-Instabilität – nachgewiesen mit dem MSI-Analyse- System-Kit (Elektropherogramm). Obere Grafik: gesundes Gewebe Untere Grafik: potenzielles Tumorgewebe
Mononukleotid-Marker für den MSI-Status
Pentanukleotid-Referenz
BAT-25 Penta C
BAT-26 Penta D
MONO-27
NR-21
NR-24
Produkt Größe
MSI Analysis System, Version 1.2
100 Reaktionen (50 Reaktionspaare)
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Liquid Biopsy Automatisierte ccfDNA-Aufreinigung aus Plasma – in nur drei Schritten
Patientenschonende Liquid Biopsies in der Onkologie und Pränataldiagnostik
Neueste wissenschaftliche Erkenntnisse und die daraus entwickelten, immer sensitiveren diagnostischen Verfahren machen es möglich: Die für Patienten belastende und risikoreiche Entnahme von Tumorbiopsien oder eine Fruchtwasserpunktion bei Schwangeren kann durch einfache Blutentnahmen (Liquid Biopsies) ersetzt werden. Dabei wird die von Tumor oder Fötus in den Blutkreislauf entlassene zirkulierende zellfreie DNA (ccfDNA, circulating cell free DNA) aus dem Plasma isoliert. Spezifische Marker werden durch Real-Time PCR oder Next-Generation Sequencing (NGS) nachgewiesen.
Mit dem Maxwell® RSC ccfDNA Plasma Kit bietet Promega eine zuverlässige Methode, in einem einfachen Drei-Schritt-Protokoll amplifizierbare ccfDNA aus 0,2 – 1 ml Plasma ohne manuelle Probenvorbehandlung aufzureinigen. Für größere Probenvolumina (bis 4 ml) ist eine Custom-Version des Kits für das Maxwell® RSC Gerät erhältlich. Für die automatisierte Isolierung im 96-Well-Format ist ein Hochdurchsatz-Kit verfügbar. Damit kann ccfDNA aus 1 – 8 ml Plasma isoliert und gereinigt werden.
Maxwell® Anwendung
Hohe Ausbeute an ccfDNA quantifiziert mittels unterschiedlicher Methoden. Die Isolierung von ccfDNA mit dem Maxwell® RSC ccfDNA Plasma Kit von Promega liefert eine sehr gute Ausbeute an amplifizierbarer DNA. Bei der Quantifizierung mittels Fluoreszenzfarbstoffen (z. B. Quantifluor) tragen nicht-amplifizierbare DNA und in Mitbewerber-Kits verwendete Carrier-RNA zum Messergebnis bei. Dadurch wird im Gegensatz zur Quantifizierung mittels qPCR die Ausbeute an tatsächlich amplifizierbarer DNA überschätzt.
DN
A-A
usbe
ute
(ng)
Quantifluor qPCR
anderer Hersteller
Maxwell®
35
30
25
20
15
10
5
0
19
miRNAGenexpression und Biomarker – erfolgreiche Extraktion von miRNA
Automatisierte RNA-Extraktion inklusive miRNA-Fraktion
Die Bedeutung von Mikro-RNA (miRNA) in der Regulation der Genexpression wurde in den letzten Jahren in einer Vielzahl von Studien bestätigt. Inzwischen gibt es zunehmend Belege dafür, dass eine veränderte miRNA-Expression mit unterschiedlichen Entwicklungsstörungen und Krankheiten wie Krebs, Diabetes, aber auch viralen Infektionen assoziiert ist. Daher werden verschiedene miRNA-Spezies auch als Biomarker diskutiert.
Mit dem Maxwell® RSC miRNA Tissue Kit bietet Promega eine Lösung zur automatisierten Extraktion reinster RNA inklusive miRNA-Fraktion aus Säugetiergewebe. Dies funktioniert ohne die Verwendung organischer Lösungsmittel.
Maxwell® Anwendung
RNA-Ausbeute
1600
1400
1200
1000
800
600
400
200
0
Ges
amt-
RN
A-K
onze
ntra
tion
(ng/
µl)
Leber Niere Pankreas
(a)
2,3
2,2
2,1
2,0
1,9
1,8
1,7
1,6
1,5
RNA-Reinheit
Leber Niere Pankreas
(b)
Typische Ausbeuten für verschiedene Gewebe aus der Maus sowie hohe Reinheit der RNA nach Extraktion mit dem Maxwell® RSC miRNA Tissue Kit.
Abs
orpt
ions
verh
ältn
is
A260/A280
A260/A230
20
Onkologie / Humangenetik Zuverlässige Extraktion für genetische Analysen
Das Maxwell® System zur Untersuchung genetischer Anomalien oder Krebs
Im Zusammenhang mit Krebs oder anderen Erkrankungen genetischen Ursprungs werden häufig Mutationsanalysen durchgeführt. Zahlreiche genetische Kliniklabore verlassen sich hierbei auf Maxwell®. Das System erlaubt, DNA mit hoher Qualität und Ausbeute aufzureinigen – DNA, die frei von PCR-inhibierenden Substanzen ist, und das selbst bei besonders empfindlichen Ausgangsmaterialien wie FFPE-Schnitten (mit Formalin fixiertes und in Paraffin eingebettetes Gewebe).
Maxwell® Anwendung
300
250
200
150
100
50
0
Kon
zent
ratio
n (n
g/µl
)
1 2 3
Blutproben verschiedener Spender (n = 3, 300 µl Vollblut, Elution in 50 µl)
16
14
12
10
8
6
4
2
0
Aus
beut
e (µ
g)
Der Maxwell® 16 LEV Blood DNA Kit liefert DNA mit hohen Ausbeuten bei Aufreinigungen aus Gesamtblut. Die in der Grafik gezeigten Proben wurden aus je 300 µl Vollblut von drei verschiedenen Spendern (1 – 3) gewonnen. Pro Person wurden drei Replikate angefertigt. Im Diagramm dargestellt sind die relativen und absoluten DNA-Erträge nach Aufreinigung mit dem Maxwell® 16 LEV Blood DNA Kit.
Konzentration (ng/µl)Ausbeute (µg)
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HLA / ImmunologieSchnelle Ergebnisse bei der HLA-Typisierung
Das Maxwell® System ist die ideale Lösung für HLA-Labore
Die Zahl der Organ- und Knochenmark-Transplantationen steigt ständig. HLA-Labore sind darauf angewiesen, schnell zu handeln, um auf der Suche nach geeigneten Spendern nicht unnötig Zeit zu verlieren. Eine automatisierte Möglichkeit zur DNA-Extraktion, die herkömmliche Säulenverfahren zur Aufreinigung überflüssig macht, spart Zeit. Für HLA- Labore bedeutet Maxwell® einen erheblichen Zeitgewinn bei der Typisierung mit repro- duzierbaren Ergebnissen und hohen Ausbeuten. Gleichzeitig ist die Fehleranfälligkeit bei der Handhabung gering. Die mit dem Maxwell® System extrahierte DNA kann für alle gängigen Nachweissysteme wie SSO, SSP oder SBT eingesetzt werden.
Maxwell® Anwendung
Maxwell® ist für uns die ideale Ergänzung zu unserem Großgerät, mit dem wir im Hochdurchsatz DNA und RNA isolieren. Wegen seines geringen Platzbedarfs und der schnellen Abarbeitungszeit erlaubt uns das Maxwell® System, auch bei geringerem Probendurchsatz automatisiert zu arbeiten.
Prof. Dr. Tobias LeglerAbt. Transfusionsmedizin
Universitätsmedizin Göttingen
50
40
30
20
10
0
Aus
beut
e (µ
g)
1 3 4 5Proben
2
BlutBuffy-Coat
Vergleich der DNA-Ausbeuten nach Extraktion mit dem Maxwell® 16 Blood DNA Aufreinigungs-Kit. Die Proben (Vollblut: 400 µl und Buffy-Coat: 250 µl aus 2,5 ml Blut) wurden von fünf unabhängigen Spendern gewonnen. Die Isolierung von gDNA wurde neben EDTA-Blut auch für Heparin- und Citrat-Blut sowie für Nabelschnurblut und Blut- karten erfolgreich getestet.
„
“
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Virologie / Bakteriologie Sichere Extraktion für die Infektionsdiagnostik
Das Maxwell® System garantiert, selbst wenn es schnell gehen muss oder nur einzelne Proben dringend zu verarbeiten sind, DNA- und RNA-Isolierungen von höchster Qualität. Das Gerät wird erfolgreich für die Nukleinsäure-Extraktion aus verschiedenen Krankheitserregern eingesetzt (siehe Tabelle). Mit großer Zuverlässigkeit erzeugt es reproduzierbare Ergebnisse. Durch die integrierte UV-Lampe und die spezielle Aufreinigungstechnik über paramagnetische Partikel können Kreuzkontaminationen ausgeschlossen und die Sicherheit des Anwenders gewährleistet werden.
Maxwell® Anwendung
Nukleinsäure-Extraktion mit dem Maxwell® System aus diesen Erregern:
Der ausschlaggebende Grund für die vier Maxwell® Geräte im Labor war deren Flexibilität beim Einsatz in der Virus-Diagnostik. Die Proben treffen schubweise Tag und Nacht als Eilproben aus den Krankenhäusern ein. Eine schnelle Bearbeitung muss also selbst bei wenigen Proben möglich sein.
Marion Steinmetz Laborleiterin im Diagnostiklabor der Dres. med. Wisplinghoff, Köln
Krankheitserreger Nukleinsäure Probentyp
HCV RNA Plasma / Serum
Influenza (z. B. H1N1) RNA Tupfer
Norovirus, Rotavirus RNA Stuhl
CMV DNA Plasma / Serum
Adenovirus DNA Stuhl
EHEC DNA Stuhl
HPV DNA Tupfer
Herpesviren DNA Liquor
EBV DNA Blut
MRSA DNA Blut / Abstrich
„ “
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Krankheitserreger aus ZeckenEffizientes Extrahieren von Erreger-Nukleinsäuren aus Ixodida
Zecken sind als Überträger bakterieller und viraler Infektionen zunehmend von Bedeutung. Die Labordiagnostik dieser Pathogene aus Zecken erfolgt im Allgemeinen mittels PCR. Hierbei ist die Probenvorbereitung zur Isolierung des genetischen Materials aus der Zecke ein kritischer und aufwändiger Schritt. Die automatisierte DNA-Isolierung mit dem Maxwell® System ist eine schnelle, flexible und günstige Möglichkeit, den Extraktionsprozess effizienter zu gestalten.
Maxwell® Anwendung
DNA und RNA für den Nachweis von Borrelien und FSME schnell und einfach extrahieren
• Die unbehandelte Zecke kann direkt als Probenmaterial eingesetzt werden: Die Larve, Nymphe oder Zecke wird einfach in die Kammer gegeben und das Aufreinigungsprotokoll wird gestartet. Dank der Kombination eines äußerst effektiven Lysepuffers mit der speziellen Mechanik des Maxwell® Geräts können auch schwierige Proben wie kleine Zecken oder Larven optimal homogenisiert und aufgeschlossen werden.
• Außerdem haben Sie die Möglichkeit, die Nukleinsäuren der Erreger für den Nachweis oder Ausschluss einer Neuroborreliose direkt aus Liquorproben zu isolieren.
Wir konnten mit dem Maxwell® System sogar einen sehr geringen Infektionsgrad (102 Borrelia burgdorferi-Zellen) nachweisen. Deshalb können wir das System zur Routineaufreinigung von Ixodes-Zecken bei der Diagnose von Borrelia burgdorferi nur empfehlen.
Dr. Rainer OehmeBaden-Württembergisches Landesgesundheitsamt, Stuttgart„ “
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DNA und RNA aus Pflanzen Automatisierte Extraktion ohne PCR-Inhibitoren
PCR-Nachweise bei pflanzlichen Proben sind oft eine Herausforderung. In Pflanzen häufig vorkommende Substanzen wie z. B. Polyphenole können bei der DNA- oder RNA-Extraktion oft nur unzureichend abgetrennt werden. Diese wirken als Inhibitoren in der nachfolgenden PCR. Die von Promega entwickelten Maxwell® Kits zur Nukleinsäure-Extraktion speziell aus Pflanzen beugen diesem unerwünschten Effekt vor. Bei der automatisierten Extraktion werden die inhi- bierenden Substanzen je nach Probe weitgehend bis vollständig abgetrennt. Das Ergebnis ist sehr reine DNA oder RNA. Das erspart eine aufwändige Nachreinigung und verhindert die Wiederholung der PCR oder anderer nachfolgender Anwendungen. Die Maxwell® DNA- und RNA-Pflanzen-Kits sind für eine Vielzahl von Pflanzenarten und Pflanzenteilen getestet.
Beispiele mit ausführlichen Informationen im Promega Protocol Selector: Plant and Food DNA/RNA Purification auf www.promega.de: https://goo.gl/Qkoz8X
Maxwell® Anwendung
(a) DNA
4,0
3,5
3,0
2,5
2,0
1,5
1,0
0,5
0,0ΔC
q zw
isch
en 1
0-fa
ch V
erdü
nnun
g
(b) RNA
DNA (a) und RNA (b) wurden aus 20 bzw. 40 mg Pflanzenmaterial mit dem Maxwell® RSC Plant DNA bzw. RNA Kit extrahiert. Die RNA wurde in cDNA umgeschrieben. DNA (unverdünnt 10 µl) bzw. cDNA (Volumen probenspezifisch) wurden in verschiedenen Verdünnungen (unverdünnt vs. 1:10 und 1:100 verdünnt) in der qPCR eingesetzt. Dargestellt ist die Differenz der Cq-Werte aufeinanderfolgender Zehnerverdünnungen derselben Probe, für die ohne Inhibition der PCR idealerweise ein Wert von ΔCq = 3,3 zu erwarten ist.
Arabidopsis Mais Sojabohne
Minimale Hemmung von Downstream-Anwendungen
unverdünnt vs. 1:10-Verdünnung1:10- vs. 1:100-Verdünnung
4,0
3,5
3,0
2,5
2,0
1,5
1,0
0,5
0,0ΔC
q zw
isch
en 1
0-fa
ch V
erdü
nnun
g
Arabidopsisunverdünnt
5 µl
Maisunverdünnt
2,5 µl
Sojabohneunverdünnt
2,0 µl
unverdünnt vs. 1:10-Verdünnung1:10- vs. 1:100-Verdünnung
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GMO in Lebensmitteln, Saatgut und TierfutterEinfachste Extraktion zum GMO-Nachweis aus einer Vielzahl an Probentypen
Für die DNA-Gewinnung konnten prozessierte Lebensmittelproben bisher nur sehr aufwändig manuell bearbeitet werden. Promega bietet mit dem „Maxwell® RSC PureFood GMO and Authentication Kit“ eine automatisierte Lösung. Zur Extraktion von DNA sind Saatgut, Tierfutter und wenig bis hochprozessierte Lebensmittel geeignet, für welche bei der manuellen DNA-Extraktion die CTAB-Methode verwendet wird. Zu den Probentypen gehören u. a. Rapssamen, Sojabohnen, Maiskörner, Reis, Schokoladenriegel, Milchpulver, Fisch-, Fleisch- und Wurst- waren (roh und gekocht, z. B. Pökelwaren, Konserven, Teilfertiggerichte, Hamburger, Döner). Für alle Materialien sind deutsche Kurzprotokolle erhältlich.
Durch die Kombination aus bewährter Aufreinigungschemie und der automatisierten Technik wird mit dem Promega Kit die DNA in gleichbleibend hoher Qualität isoliert.
Maxwell® Anwendung
2,4
2,0
1,6
1,2
0,8
0,4
0,0
Abs
orpt
ions
verh
ältn
is
Soja Mais Raps Dorsch Schwein Rind
Typische Reinheit der DNA aus verschiedenen Proben. DNA wurde aus 200 mg gemahlenen Soja-, Mais- und Rapsproben extrahiert und aus Dorsch, Schwein und Rind aus 50 mg rohen, zerkleinerten Proben gewonnen. Der Reinheitsgrad wurde mittels Spektroskopie bestimmt.
A260/A280
A260/A230
Gewinnung hochreiner DNA zur direkten Anwendung in nachfolgenden Assays
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Maxwell® und RIDA®GENEEin unschlagbares Team aus Extraktionssystem und Multiplex Real-Time PCR-Kits
Kombination aus automatisierter Aufreinigung von DNA / RNA und optimiertem Multiplex RT-PCR-Errergernachweis
Beim Nachweis von Pathogenen bilden das Maxwell® RSC System von Promega und die RIDA®GENE Kits von R-Biopharm für die Multiplex Real-Time PCR ein perfekt aufeinander abgestimmtes Team. Die Automatisierung der Extraktion mithilfe des Maxwell® RSC Systems erspart dem Anwender zeitaufwändige und unangenehme Arbeitsschritte. Das Probenhandling ist unkompliziert und Zentrifugationsschritte während der Aufreinigung sind überflüssig. Die Kombination des Maxwell® RSC Systems mit der hochsensitiven und spezifischen Multiplex Real-Time PCR-Methode liefert schnell und einfach zuverlässige Ergebnisse bei der Diagnostik.
• In nur 3 Schritten von der Probe zum Resultat
• Gesamte Versuchsdauer weniger als 90 Minuten
• Eindeutige, zuverlässige Ergebnisse durch Ausschluss von PCR-Inhibition
Maxwell® Anwendungen mit Partner-Produkten
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Schnelle und einfache Diagnostik pathogener Erreger
RIDA®GENE Kits von der R-Biopharm AG sind Multiplex Real-Time PCR-Kits für den qualitativen Nachweis viraler bzw. bakterieller Pathogene und Parasiten für gastrointestinale, nosokomiale, respiratorische und andere Infektionen. Die Kits enthalten alle erforderlichen PCR-Komponenten für den spezifischen Erregernachweis und können auf gängigen Real-Time PCR-Instrumenten eingesetzt werden.
So einfach kommen Sie zu Ihrem Ergebnis:
Isolierung und Aufreinigung der Nukleinsäuren durch Maxwell® Systeme
Erregernachweis mit RIDA®GENE Kit
1
2
3
Vorbereitung der Proben
• Probe in Kartusche geben
• Elutionspuffer vorlegen
• Kartusche(n) in Gerät platzieren
• Programm starten
• Ergebnis: reine und hochwertige DNA / RNA
• Bereitstellung aller Komponenten für die PCR
• Hohe Sensitivität und Spezifität
• Verwendung auf den gängigen Real-Time PCR-Instrumenten
• Extraktions- und Inhibitionskontrolle
• CE-Zertifizierung und Ringversuchteilnahme
Maxwell® Anwendung mit Partner-Produkten
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RIDA®GENE Real-Time PCR KitsFür den Nachweis gastrointestinaler, nosokomialer, respiratorischer und anderer Infektionen
Produkt Probentyp Art.-Nr.
Gastrointestinale Infektionen
Viren
RIDA®GENE Viral Stool Panel I Stuhl PG1315
RIDA®GENE Viral Stool Panel II Stuhl PG1325
RIDA®GENE Norovirus Stuhl PG1405
RIDA®GENE Norovirus I & II Stuhl PG1415
RIDA®GENE Sapovirus Stuhl PG1605
RIDA®GENE Enterovirus Stuhl / Liquor PG4705
Bakterien
RIDA®GENE Bacterial Stool Panel Stuhl PG2405
RIDA®GENE Bacterial Stool Panel I Stuhl PG2415
RIDA®GENE EHEC/EPEC Stuhl / Kultur PG2205
RIDA®GENE EAEC Stuhl / Kultur PG2215
RIDA®GENE ETEC/EIEC Stuhl / Kultur PG2225
RIDA®GENE STEC Stuhl / Kultur PG2255
RIDA®GENE E. coli Stool Panel I Stuhl / Kultur PG2285
RIDA®GENE Helicobacter pylori Biopsie PG2305
Parasiten
RIDA®GENE Parasitic Stool Panel Stuhl PG1705
RIDA®GENE Parasitic Stool Panel I Stuhl PG1715
RIDA®GENE Parasitic Stool Panel II Stuhl PG1725
RIDA®GENE Dientamoeba fragilis Stuhl PG1745
RIDA®GENE Entamoeba histolytica Stuhl / Leberabszesspunktat PG1735
Nosokomiale Infektionen
Viren & Bakterien
RIDA®GENE Hospital Stool Panel Stuhl PG0705
RIDA®GENE CD Toxin A/B Stuhl / Kultur PG0825
RIDA®GENE Clostridium difficile Stuhl / Kultur PG0835
RIDA®GENE MRSA Nasen- / Rachenabstrich, Kulturproben, Wund- / Leistenabstrich, Achsel- / Perianalabstrich
PG0605
RIDA®GENE MRSA LC2.0 Nasen- / Rachenabstrich, Kulturproben, Wund- / Leistenabstrich, Achsel- / Perianalabstrich
PG0625
Alle Kits enthalten PCR-Komponenten ausreichend für 100 Reaktionen. Für Extraktionsprotokolle der Maxwell® Systeme in Kombination mit RIDA®GENE Kits kontaktieren Sie bitte [email protected].
Maxwell® Anwendungen mit Partner-Produkten
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RIDA®GENE Real-Time PCR Kits Produkt Probentyp Art.-Nr.
Respiratorische Infektionen
Viren
RIDA®GENE Adenovirus Nasen- / Rachenabstrich / Nasopharyngeal-Abstrich / Rachenspülwasser / BAL
PG1005
RIDA®GENE Flu Nasen- / Rachenabstrich PG0505
RIDA®GENE Flu LC2.0 Nasen- / Rachenabstrich PG0525
RIDA®GENE Flu & RSV Nasen- / Rachenabstrich / BAL PG0545
RIDA®GENE Parainfluenza Nasen- / Rachenabstrich / Nasopharyngeal-Abstrich PG5805
RIDA®GENE RSV & hMPV Nasen- / Rachenabstrich / Nasopharyngeal-Abstrich/ Rachenspülwasser / BAL
PG5905
RIDA®GENE Coronavirus Nasen / Rachenabstrich / Rachenspülwasser PG6805
Bakterien
RIDA®GENE Bordetella Nasopharyngeal-Abstrich / Nasopharyngeal-Aspirat PG2505
RIDA®GENE Mycoplasma pneumoniae Rachenabstrich / BAL / Trachealsekret PG4305
RIDA®GENE Legionella Rachenabstrich / BAL / Trachealsekret PG8005
Pilze
RIDA®GENE Pneumocystis jirovecii BAL PG1905
Sexuell übertragbare Infektionen
Parasiten
RIDA®GENE Trichomonas vaginalis Abstrich / Urin PG4975
RIDA®GENE STI Mycoplasma Panel Abstrich / Urin PG4905
Haut- und Weichteilinfektionen
Bakterien
RIDA®GENE PVL Abstrich (Nase, Wunde) und Kultur PG0645
Bakterielle Imbalance
Bakterien
RIDA®GENE Gut Balance Stuhl PG0105
RIDA®GENE Akkermansia muciniphila Stuhl PG0145
RIDA®GENE Faecalibacterium prausnitzii Stuhl PG0155
Maxwell® Anwendung mit Partner-Produkten
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Maxwell® Geräte
Bestellnummer AS4500 AS6000 AS4060 AS8500
Modell Maxwell® RSC Instrument (Rapid Sample Concentrator)
Maxwell® 16 CSC (CE-IVD)
Maxwell® FSC Instrument (Forensic Sample Concentrator)
Maxwell® RSC 48 Instrument (Rapid Sample Concentrator)
Beschreibung Extraktionsgerät für bis zu 16 Proben für alle Anwendungen
CE-IVD-zertifiziertes Exktraktionsgerät für die Anwendung von CE-IVD Maxwell® Kits
Extraktionsgerät speziell für die Forensik für bis zu 16 Proben
Extraktionsgerät für bis zu 48 Proben für alle Anwendungen
Quantus™ Fluorometer zur Quantifizierung
inklusive – optional optional
Barcode-Scanner optional inklusive inklusive inklusive
Barcode-Tracking-System
inklusive inklusive inklusive inklusive
Bedienung Tablet-PC Tablet-PC Tablet-PC Tablet-PC
UV-Lampe zur Dekontamination
inklusive inklusive inklusive inklusive
Optimiertes Kartuschen- und Gerätedesign gegenüber Vorgängermodellen
ja ja ja ja
Zusatzfunktionen Kompatibel mit MaxPrep™ Liquid Handler*
– – Visuelles Prüfsystem verhindert manuelle Setup-Fehler, kompatibel mit MaxPrep™ Liquid Handler*
* Ergänzend unterstützt der MaxPrep® Liquid Handler (AS9201) als Bench-Top-Pipettierroboter bei der Probenvor- und -nachbereitung (weitere Infos dazu auf Seite 12).
Maxwell® Produktübersicht
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Maxwell® Kits
Weitere Kits für Maxwell® FSC (für Forensik) und Maxwell® HT (High Throughput) erhältlich. Alle Kits unter www.promega.com.
Maxwell® Produktübersicht
Best.Nr. Maxwell® RSC und CSC Kits (jeweils 48 Präparationen)
AS1520 Maxwell® RSC Whole Blood DNA Kit
AS1400 Maxwell® RSC Blood DNA Kit
AS1540 Maxwell® RSC Buffy Coat DNA Kit
AS1380 Maxwell® RSC SimplyRNA Blood Kit
AS1480 Maxwell® RSC Circulating Cell Free Plasma Kit
AX1115 Maxwell® RSC LV (large volume) Circulating Cell Free Plasma Kit
AS1630 Maxwell® RSC Stabilized Saliva DNA Kit
AS1640 Maxwell® RSC Buccal Swab DNA Kit
AS1620 Maxwell® RSC Cultured Cells DNA Kit
AS1370 Maxwell® RSC Cell DNA Kit
AS1390 Maxwell® RSC SimplyRNA Cells Kit
AS1610 Maxwell® RSC Tissue DNA Kit
AS1340 Maxwell® RSC SimplyRNA Tissue Kit
AS1460 Maxwell® RSC miRNA Tissue Kit
AS1450 Maxwell® RSC DNA FFPE Kit
AS1440 Maxwell® RSC RNA FFPE Kit
AS1490 Maxwell® RSC Plant DNA Kit
AS1500 Maxwell® RSC Plant RNA Kit
AS1600 Maxwell® RSC Pure Food GMO and Authentication Kit
AS1660 Maxwell® RSC Pure Food Pathogen Kit
AS1330 Maxwell® RSC Viral TNA Kit
Maxwell® IVD-Kits (nur für die Anwendung mit dem Maxwell® CSC Gerät)
AS1350 Maxwell® CSC DNA FFPE Kit (CE-IVD-zertifiziert)
AS1360 Maxwell® CSC RNA FFPE Kit (CE-IVD-zertifiziert)
AS1321 Maxwell® CSC DNA Blood Kit (CE-IVD-zertifiziert)
AS1410 Maxwell® CSC RNA Blood Kit (CE-IVD-zertifiziert)
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PCR-Reagenzien von Promega arbeiten zuverlässig und sichern optimale Amplifikations- ergebnisse. Sie sind erhältlich in vielen Formulierungen: einfache Taq- und Hot-Start-Taq-Polymerasen, Master-Mixe für Endpunkt- und Real-Time PCR und dNTPs für die Forschung (RUO = Research Use Only).
Für die Diagnostik bieten wir Ihnen die bewährten PCR-Reagenzien produziert unter GMP-Bedingungen und für GPR (General Purpose Reagents)-Einsatz an.
Amplifikation Hochqualitative PCR-Reagenzien für sorgenfreie Amplifikation
Weiterführende Produkte
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Sie benötigen einen PCR-Master-Mix für diagnostische Anwendungen oder die Herstellung eines diagnostischen Assays, aber die auf dem Markt erhältlichen fertigen Master-Mixe sind für Ihre Anwendung nicht optimal? Promega hat die Lösung für Sie:
Made-To-Order 2x PCR-Master-MixDer Made-To-Order 2x PCR-Master-Mix ist ein von Promega unter GMP-Bedingungen herge- stellter Master-Mix, dessen Formulierung Sie mithilfe des PCR Optimization Kits bestimmen und festlegen.
PCR Optimization KitDas PCR Optimization Kit enthält eine Auswahl von acht vorformulierten Puffern (A–H) höchster Qualität, welche zusammen ein breites Spektrum geeigneter Bedingungen für Endpunkt-, Multiplex- und Real-Time PCR sowie die Amplifikation GC-reicher Sequenzen oder in der Anwesenheit von Inhibitoren abdecken und bereits dNTPs enthalten. Das Kit enthält außerdem GoTaq® MDx Hot Start Polymerase sowie Magnesiumchlorid.
Finden Sie mit diesem System durch wenige einfache Experimente den maßgeschneiderten Amplifikations-Mix für Ihre Anwendung.
Legen Sie Ihre optimalen Reaktionsbedingungen fest
Ihr PCR-Master-Mix wird von Promega produziert
1 2 3
Bestimmen Sie Ihren Puffer
A B C D
E F G H -6°C -4°C -2°C +2°C +4°C +6°Cberechnete Tm
- Konzentration an MgCl2 [0,5–5 mM] - Enzymmenge [1–7,5 Units]
Made-to-Order2x PCR-Master-Mix
In drei Schritten zum optimalen PCR-Master-Mix
Konstante Qualität und Performance jeder Zeit wiederSobald Sie Ihre optimale PCR-Formulierung bestimmt haben, ist es ganz einfach. Teilen Sie uns hierzu Ihre Formulierung (Puffer-Sorte, sowie die Konzentration von MgCl2 und GoTaq® MDx Hot Start Polymerase) mit und wir produzieren Ihren persönlichen 2x PCR-Master-Mix nach Ihren Vorgaben unter GMP-Bedingungen. Die Abfüllung erfolgt in 1-ml-Röhrchen oder 25-ml-Flaschen, die Lieferzeit beträgt 3–4 Wochen nach Bestelleingang. Ihr Master-Mix kann in identischer Zusammensetzung immer wieder nachbestellt werden und ist für den GPR-Einsatz geeignet.
Weitere Informationen auf www.promega.com/pcroptimize
Weiterführende Produkte
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GoTaq® MDx DNA-PolymerasenDie GoTaq® MDx DNA Polymerasen enthalten full-length Taq-DNA-Polymerase mit 5’ -> 3’ Exonuklease-Aktivität. Die MgCl2-Konzentration kann flexibel angepasst werden. Die Produkte enthalten sowohl 5x Green GoTaq® Flexi Buffer für direktes Auftragen auf das Agarosegel als auch 5x Colorless GoTaq® Flexi Buffer für alle Anwendungen, die Absorptions- oder Fluoreszenzmessungen von PCR-Fragmenten im nächsten Schritt erfordern. Die GoTaq® MDx Hot Start Polymerase ist an einen patentierten Antikörper gebunden, welcher die Polymerase-Aktivität bei Raumtemperatur blockiert. Diese wird beim ersten Denaturierungsschritt wieder hergestellt. Die Glycerol-freien Produktformulierungen sind hochrein und damit für nachfolgende Produktionsschritte und zur Lyophilisierung geeignet. Alle GoTaq® MDx DNA Polymerasen sind auf Bakterien-, Pilz- und Säugetier-DNA getestet.
Produkt Größe Best.-Nr.
GoTaq® MDx DNA Polymerase (≥ 5 U/µl) 100 U D4001
500 U D4005
2.500 U D4006
GoTaq® MDx Glycerol-Free DNA Polymerase (≥ 5 U/µl) 500 U D4101
GoTaq® MDx Hot Start Polymerase (≥ 5 U/µl) 100 U D6001
500 U D6005
2.500 U D6006
10.000 U D6008
GoTaq® MDx High Concentration Hot Start Polymerase (≥ 50 U/µl) 1.000 U D6101
GoTaq® MDx Glycerol-Free Hot Start Polymerase (≥ 5 U/µl) 500 U D6201
PCR-Reagenzien für die Diagnostik und den Einsatz in diagnostischen Assays
• Zusätzliche QC-Tests
• Analysezertifikate mit chargenspezifischen QC-Daten
• Produziert unter GMP-Bedingungen mit validierten Prozessen, Methoden und Aus- stattung, um konstante Produkt-Performance von Charge zu Charge zu gewährleisten
• Sonderabfüllungen und -formulierungen möglich
• GPR (General Purpose Reagents)-Einsatz
dNTPsZuverlässiger, in der PCR getesteter, gebrauchsfertiger Mix* aus dATP, dCTP, dGTP und dTTP in Wasser mit einem pH-Wert von 7,5. Der dNTP-Mix überzeugt besonders durch seinen hohen Reinheitsgrad: ≥ 99 % Triphosphate (HPLC), ≤ 0,9 % Di-/Monophosphate (HPLC), nicht-nachweisbare Nuklease-Kontamination. Das Produkt ist für 36 Monate stabil.
Produkt Größe Best.-Nr.
PCR Nucleotide Mix je 10 mM / 200 µl C1141
je 10 mM / 1.000 µl C1145
je 25 mM / 200 µl U1431
je 25 mM / 1.000 µl U1432
* Die Einzelnukleotide dATP, dCTP, dGTP und dTTP, produziert unter GMP-Bedingungen, sind als Sonderabfüllungen erhältlich.
Weiterführende Produkte
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5x PCR-PufferGeschützte 5-fach-konzentrierte PCR-Puffer-Formulierungen, die dNTPs (A, G, C, T) enthalten. Im Lieferumfang enthalten sind außerdem 500 U GoTaq® MDx Hot Start Polymerase (≥ 5 U/µl) und 1,2 ml 25 mM MgCl2.
Produkt Größe Best.-Nr.
5x PCR Buffer A 1 ml D2301
5x PCR Buffer B 1 ml D2311
5x PCR Buffer C 1 ml D2321
5x PCR Buffer D 1 ml D2331
5x PCR Buffer E 1 ml D2341
5x PCR Buffer F 1 ml D2351
5x PCR Buffer G 1 ml D2361
5x PCR Buffer H 1 ml D2371
Weiterführende Produkte
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dNTPsGebrauchsfertige Mixe aus dATP, dCTP, dGTP und dTTP. Hoher Reinheitsgrad (> 99 % Triphosphate) und pH-Wert von 7,5 in Wasser.
Produkt Größe Best.-Nr.
dNTP Mix 10 mM / 200 µl U1511
10 mM / 1.000 µl U1515
PCR-Reagenzien für die Forschung
• Optimale Ergebnisse bei einer großen Bandbreite von Applikationen
• Kauf ohne Risiko mit der PCR Satisfaction Guarantee
• RUO (Research Use Only)-Einsatz
GoTaq® G2 DNA-Polymerasen und Master-MixeDie GoTaq® G2 DNA Polymerasen enthalten full-length Taq DNA Polymerase mit 5’ -> 3’ Exonuklease-Aktivität. Die Produkte enthalten einen 5x Green GoTaq® Puffer für direktes Auftragen auf das Agarosegel und / oder einen 5x Colorless GoTaq® Puffer für alle Anwendungen, die Absorptions- oder Fluoreszenzmessungen von PCR-Fragmenten vor der Aufreinigung erfordern. Die GoTaq® G2 Hot Start Polymerase ist an einen patentierten Antikörper gebunden, welcher die Polymerase-Aktivität bei Raumtemperatur blockiert. Diese wird beim ersten Denaturierungs-Schritt innerhalb von nur 2 Minuten wieder hergestellt.
ProduktMgCl2-Konz. dNTPs
Hot Start Polymerase
5x Green GoTaq® Puffer
5x Colorless GoTaq® Puffer Größe Best.-Nr.
GoTaq® G2 DNA Polymerase
1,5 mM ü ü 100 U M7841
500 U M7845
2.500 U M7848
GoTaq® G2 Flexi DNA Polymerase
separat (variabel)
ü ü 100 U M7801
500 U M7805
2.500 U M7806
10.000 U M7808
GoTaq® G2 Hot Start Polymerase
separat (variabel)
ü ü ü 100 U M7401
500 U M7405
2.500 U M7406
10.000 U M7408
GoTaq® G2 Green Master Mix
1,5 mM im Mix im Mix 100 Reak. M7822
1.000 Reak. M7823
GoTaq® G2 Colorless Master Mix
1,5 mM im Mix im Mix 100 Reak. M7832
1.000 Reak. M7833
GoTaq® G2 Hot Start Green Master Mix
2 mM im Mix im Mix im Mix 100 Reak. M7422
1.000 Reak. M7423
GoTaq® G2 Hot Start Colorless Master Mix
2 mM im Mix im Mix im Mix 100 Reak. M7432
1.000 Reak. M7433
Weiterführende Produkte
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Farbstoffbasierte Real-Time PCRProdukt Größe Best.-Nr.
GoTaq® qPCR Master MixDer Farbstoff BRYT Green® zeigt eine höhere dsDNA-abhängige Fluoreszenzzunahme und weniger PCR-Inhibierung als SYBR® Green I. 2x GoTaq® qPCR Master Mix mit GoTaq® G2 Hot Start Polymerase, BRYT Green®, MgCl2, dNTPs und Puffer. Kompatibel mit allen gängigen Thermocyclern. CXR-Referenzfarbstoff ist bereits im Mix enthalten. Für Thermocycler, die eine größere Menge CXR-Referenzfarbstoff benötigen (High ROX-Geräte), liegt ein Extra-Röhrchen CXR der Verpackung bei.
5 x 1 ml A6001
25 x 1 ml A6002
GoTaq® 2-Step RT-qPCR System2-Step RT-qPCR-System zur Quantifizierung von RNA. cDNA-Synthese mit dem GoScript™ Reverse Transcription System und Quantifizierung mit dem GoTaq® qPCR Master Mix. Alle Reagenzien in einem Kit: 2x GoTaq® qPCR Master Mix, GoScript™ Reverse Transcriptase, 5x GoScript™ Reaktionspuffer, PCR Nucleotide Mix, Oligo(dT)15 Primer, Random Primers, Recombinant RNasin® Ribonuclease Inhibitor, CXR Reference Dye, MgCl2 und nukleasefreies Wasser.
50 RT-Reaktionen + 5 ml qPCR Master Mix
A6010
GoTaq® 1-Step RT-qPCR SystemSystem zur Analyse von RNA durch quantitative 1-Step Reverse Transcription PCR.
200 Reaktionen à 50 µl A6020
Sondenbasierte Real-Time PCRProdukt Größe Best.-Nr.
GoTaq® Probe qPCR Master Mix2x GoTaq® Probe qPCR Master Mix mit GoTaq® G2 Hot Start Polymerase, MgCl2, dNTPs und Puffer. Kompatibel mit allen gängigen Thermocyclern. CXR-Referenzfarbstoff liegt separat bei.
2 x 1 ml A6101
10 x 1 ml A6102
GoTaq® Probe 2-Step RT-qPCR System2-Step RT-qPCR System zur Quantifizierung von RNA. cDNA-Synthese mit dem GoScript™ Reverse Transcription System und Quantifizierung mit dem GoTaq® Probe qPCR Master Mix. Alle Reagenzien in einem Kit: 2x GoTaq® Probe qPCR Master Mix, GoScript™ Reverse Transcriptase, 5x GoScript™ Reaktionspuffer, PCR Nucleotide Mix, Oligo(dT)15 Primer, Random Primers, Recombinant RNasin® Ribonuclease Inhibitor, CXR Reference Dye, MgCl2 und nukleasefreies Wasser.
50 RT-Reaktionen+ 2 ml qPCR Master Mix
A6110
GoTaq® Probe 1-Step RT-qPCR SystemSystem zur quantitativen Analyse von RNA durch quantitative 1-Step Reverse Transcription PCR (RT-qPCR). Formulierung mit dUTP, Verschleppung von DNA-Kontamination kontrollierbar durch Uracil-DNA-Glycosylase (UNG).
200 Reaktionen à 20 µl A6120
GoTaq® qPCR-Produkte für jede Forschungsanwendung
Nutzen Sie bei der farbstoffbasierten Real-Time PCR die Kombination aus robuster Amplifikation und hoher Sensitivität durch den besonders hellen Farbstoff BRYT Green® beim GoTaq® qPCR Master Mix. Der GoTaq® Probe qPCR Master Mix für die sondenbasierte qPCR zeichnet sich durch seine besondere Resistenz gebenüber PCR-Inhibitoren aus und ist damit ein hocheffizientes Produkt in der Expressionsanalyse.
Weiterführende Produkte
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• 24/7 Verfügbarkeit und Zugang zu Promega Produkten
• Intelligente Bevorratungs- und Abrechnungstechnologie übernimmt Bestellungen von regelmäßig benötigten Produkten
• Ständige Überprüfung des Lagerbestandes und der Temperatur – zur Dokumentation bei Bedarf abrufbar
• Für zugelassene Kunden mit der Helix® App auch von außerhalb Einsicht in den aktuellen Lagerbestand sowie die Möglich- keit, technische Manuals einzusehen und zu versenden
Weitere Informationen unter www.promega.com/helix
Das Helix® SystemPromega Produkte zu jeder Zeit
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Hilfreiche Information auf www.promega.com
• BioMath Calculators für schnelle molekularbiologische Berechnungen
• „DNA and RNA Purification Product Selector“ zur Auswahl des für Ihre Probe und Applikation geeigneten Kits
• Promega-App zum automatischen Kolonien-Zählen auf einer Platte
• Promega-App zur Arbeit mit Restriktionsenzymen
• Webinare und deren Aufzeichnungen zu aktuellen Themen
• Produktzitierungen, Zertifikate und Anwenderartikel
Flexibel für Sie erreichbarDie Promega GmbH in Mannheim
Wir sind per Telefon, E-Mail oder Fax werktags von 8 – 18 Uhr für Sie da.
Kundenservice/Bestellung
Bei Bestellungen, Fragen zu Preisen, bestehenden Angeboten, Lieferterminen, oder Rechnungen.
Tel.: +49 621 8501-291 Fax: +49 621 8501-222 E-Mail: [email protected]
Bei Bestellung von Raumtemperatur-Ware bis 15:00 Uhr erfolgt der Versand in der Regel noch am selben Tag.
Vereinfachen Sie Ihre interne Rechnungs- abwicklung: e-Procurement und elektro- nische Rechnungsstellung möglich!
Technische Beratung
Bei wissenschaftlich-technischen Fragen, zum Beispiel bei der Auswahl des richtigen Produkts, dessen Anwendung oder Fragen zum Protokoll.
Tel.: +49 621 8501-290 E-Mail: [email protected]
Chatten Sie mit uns:www.promega.de/support/customer-and-technical-support
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Telefon +49 621 8501-291Fax +49 621 [email protected]
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Telefon +49 621 8501-290Fax +49 621 [email protected]