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Funktionen Das RAMOS® ermöglicht eine 8-fach parallele Online-Messung der Atmungsaktivitäten und Prozesskontrolle unter sterilen Bedingungen in 250 mL und 500 mL Kolben. » Temperaturregelung (+30 °C bis 50 °C, mit Kühlungssystem 5 °C unter RT bis +50 °C) » Bestimmung OTR, CTR, RQ und μ max » k L a-Bestimmung » Fed-Batch mit Feeding-System » Kontrolle Gasphase (O 2 , CO 2 ) in Kombination mit Gasmischstation Gmix™ » Phototrophe Kultivierung in Kombination mit Belichtungsmodul CultiLux™ Einsatzgebiete » Prozessentwicklung und -optimierung (frühzeitige Erkennung von Sauerstoff- und Substratlimitation oder Produktinhibierung) » Medienoptimierung (Untersuchung Substrataffinität) » Stamm-Screening und -optimierung (z. B. Enzymproduktion für Biofuels) » Fermentationsvalidierung » Stabilitätstest und Qualitätskontrolle (z. B. Stabilität von Säugerzelllinien) » Toxizitätsuntersuchung und Abbaustudien (z. B. Abwasserbehandlung) » Prozessbilanzierung und -quantifizierung (z. B. Kohlenstoffbilanzierung) » Bestimmung wachstumskinetischer und Prozessparameter (μ max , K s , k L a) Referenzen [1] R. Krüger, "Praktikumsversuch RAMOS®", HiTec Zang GmbH, 2005 [2] J. Pfannebecker, C. Schiffer-Hetz, J. Fröhlich, B. Becker, "Culture medium optimization for osmoto- lerant yeasts by use of a parallel fermenter system and rapid microbiological testing", Journal of Microbiological Methods, vol. 130, pp. 14-22, 2016 [3] M.L. Socher, F. Lenk, K. Geipel, C. Schott, J. Püschel, C. Haas, C. Grasse, T. Bley, J. Steingroewer, "Phototrophic growth of Arthrospira platensis in a respiration activity monitoring system for shake flasks (RAMOS®)", Engineering in Life Sciences, vol. 00, pp. 1-9, 2014 [4] K. Geipel, M.L. Socher, C. Haas, T. Bley, J. Steingroewer, "Growth kinetics of a Helianthus annuus and a Salvia fruticosa suspension cell line: Shake flask cultivations with online monitoring system", Engineering in Life Sciences, vol. 13, pp. 593-602, 2013 HiTec Zang GmbH Ebertstraße 28-32 52134 Herzogenrath Tel: +49 (0)2407 / 910 100 Fax: +49 (0)2407 / 910 1099 [email protected] www.hitec-zang.de

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Funktionen

Das RAMOS® ermöglicht eine 8-fach parallele Online-Messung der Atmungsaktivitäten und Prozesskontrolle unter sterilen Bedingungen in 250 mL und 500 mL Kolben.

» Temperaturregelung (+30 °C bis 50 °C, mit Kühlungssystem 5 °C unter RT bis +50 °C)

» Bestimmung OTR, CTR, RQ und µmax

» kLa-Bestimmung

» Fed-Batch mit Feeding-System

» Kontrolle Gasphase (O2, CO2) in Kombination mit Gasmischstation Gmix™

» Phototrophe Kultivierung in Kombination mit Belichtungsmodul CultiLux™

Einsatzgebiete

» Prozessentwicklung und -optimierung (frühzeitige Erkennung vonSauersto� - und Substratlimitation oder Produktinhibierung)

» Medienoptimierung (Untersuchung Substrata� nität)

» Stamm-Screening und -optimierung (z. B. Enzymproduktion für Biofuels)

» Fermentationsvalidierung

» Stabilitätstest und Qualitätskontrolle (z. B. Stabilität von Säugerzelllinien)

» Toxizitätsuntersuchung und Abbaustudien (z. B. Abwasserbehandlung)

» Prozessbilanzierung und -quanti� zierung (z. B. Kohlensto� bilanzierung)

» Bestimmung wachstumskinetischer und Prozessparameter (µmax, Ks, kLa)

Referenzen

[1] R. Krüger, "Praktikumsversuch RAMOS®", HiTec Zang GmbH, 2005

[2] J. Pfannebecker, C. Schi� er-Hetz, J. Fröhlich, B. Becker, "Culture medium optimization for osmoto-lerant yeasts by use of a parallel fermenter system and rapid microbiological testing", Journal of Microbiological Methods, vol. 130, pp. 14-22, 2016

[3] M.L. Socher, F. Lenk, K. Geipel, C. Schott, J. Püschel, C. Haas, C. Grasse, T. Bley, J. Steingroewer, "Phototrophic growth of Arthrospira platensis in a respiration activity monitoring system for shake � asks (RAMOS®)", Engineering in Life Sciences, vol. 00, pp. 1-9, 2014

[4] K. Geipel, M.L. Socher, C. Haas, T. Bley, J. Steingroewer, "Growth kinetics of a Helianthus annuus and a Salvia fruticosa suspension cell line: Shake � ask cultivations with online monitoring system", Engineering in Life Sciences, vol. 13, pp. 593-602, 2013

HiTec Zang GmbHEbertstraße 28-3252134 Herzogenrath

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R MOSRespiration Activity MOnitoring System

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Bioprozessoptimierung in Schüttelkolben

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Inhalt links

Universales Messsystem

RAMOS® (Respiration Activity MOnitoring System) hat sich weltweit als Standard zur Online-Bestimmung der Atmungsaktivität von pro- und eukaryotischen Kulturen in Schüttelkolben etabliert.

In zahlreichen bisher untersuchten Prozessen hat RAMOS® zu Schlüsseler-kenntnissen verholfen und teilweise langjährigen Entwicklungsarbeiten den entscheidenden Impuls gegeben. RAMOS® liefert die wirklich aussagekräfti-gen Sto� wechselparameter O2- (OTR) und CO2-Transferrate (CTR), sowie die daraus abgeleiteten Parameter Respirationsquotient (RQ) und die maximale spezi� sche Wachstumsrate (μmax).

Zellphysiologie

Anhand der Messkurven können somit schon während der Prozessent-wicklung im Schüttelkolben biologische Grundphänomene sicher erkannt werden, wie zum Beispiel Substrat-/ Sauersto� imitierung, Substrat- und Produktinhibierung, Polyauxie, Gärung, Over� ow-Metabolismus etc. [1].

Medienoptimierung

Eine typische Screening-Anwendung mit einer entsprechend hohen Anzahl an Versuchen ist die Medienoptimierung. In der Arbeit von Pfannebecker et al. [2] wurde das RAMOS® bspw. für die Entwicklung eines Nährbodens für den qualitativen Nachweis osmotoleranter Hefen genutzt. Über die Online-Auswertung des CTR konnte be-stimmt werden, welche Medienbestandteile signi� kant die CO2-Pro-duktion erhöhen, um somit die Nachweiszeit zu reduzieren.

Phototrophe Kultivierung

Phototrophe Organismen (PO) bilden ein enormes Produktions-potential in zum Beispiel der Kosmetik und der Pharmazeutik. Ins-besondere bei den Biofuels spielen PO eine besondere Rolle. Für die Optimierung der Kultivierung spielt das Belichtungsregime sowie der Gastransfer eine wichtige Rolle. In der Arbeit von Socher et al. [3] konnte mit Hilfe des RAMOS® am Beispiel von Arthrospira platensis messtechnisch quanti� ziert werden, wie die O2-Produktionsrate von der Lichtexposition abhängt.

Zellkulturen

Ebenso mit P� anzenzellen, allerdings mit in-vitro -Kulturen von Sonnenblume und Salbei, beschäftigt sich der Artikel von Geipel et al. [4]. Hierbei wurde das RAMOS® als Screening-System verwendet. Sowohl ein erfolgreicher Transfer einer Sonnenblumensuspensionskultur in das RAMOS® Schüttelkolbensystem konnte gezeigt werden, als auch dass sich die Messung der Atmungsaktivität als quali� ziertes Werkzeug zum Screening von P� anzen-in-vitro-Kulturen eignet.

2. Medienoptimierung

3. Phototrophe Kultivierung

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1. Zellphysiologische Phänomene

4. P� anzenkulturen4. P� anzenkulturen

2. Medienoptimierung

3. Phototrophe Kultivierung