Überdauerung und Nachweis von Viren in Lebensmitteln€¦ · Enterovirus - Poliomyelitis,...
Transcript of Überdauerung und Nachweis von Viren in Lebensmitteln€¦ · Enterovirus - Poliomyelitis,...
1
Schrader et al., 2003
Überdauerung und Nachweis von Viren in Lebensmitteln
Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
2
Viren sind Parasiten und benötigen lebende Zellen zur
Vermehrung – keine Vermehrung im Lebensmittel!
Viren sind keine Lebewesen!
Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
3
Foodborne Viruses Virus Spezies Hülle
Norovirus -
Sapovirus -
Hepatitis A-Virus -
Hepatitis E-Virus -
Rotavirus -
Astrovirus -
Enterovirus -
Adenovirus -
Frühsommer-Meningo-Enzephalitis-Virus
+
unbehüllte Viren sind
umweltstabiler als
behüllte!
Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
4
Gemeldete Viruserkrankungen in Deutschland 2009 – 2011 (Robert Koch Institut, Berlin)
Virus Erkrankungen „foodborne“
2009 2010 2011
Norovirus 172.300 140.500 115.668 16 – 20 % (Europa)
Hepatitis A-Virus 916 773 827 5 %
Hepatitis E-Virus 108 220 229 ?
2012: 112.364 Norovirus Erkrankungen 2013:(41. KW) 68.000 Norovirus Erkrankungen
Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
5
„Foodborne Viruses“ = Lebensmittel übertragbare Viren Virus Spezies Hülle Erkrankung Zellkultur
Norovirus - Gastroenteritis -! Sapovirus - Gastroenteritis - Hepatitis A-Virus - Hepatitis +a
Hepatitis E-Virus - Hepatitis - Rotavirus - Gastroenteritis + Astrovirus - Gastroenteritis +a
Enterovirus - Poliomyelitis, Meningitis
+a
Adenovirus - Gastroenteritis +a
Frühsommer-Meningo-Enzephalitis-Virus
+ Meningo-enzephalitis
+a a nicht alle Isolate sind kultivierbar; Wildstämme sind oftmals schwer zu kultivieren (Greening G.E., 2006)
Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
6
Amtliche Sammlung von Untersuchungsverfahren nach § 64 LFGB 00.00 111 Dez. 2007
Untersuchung von Lebensmitteln
Qualitativer Nachweis von Noroviren der Genogruppe I und II auf glatten, festen Oberflächen von Lebensmitteln durch real-time RT-PCR
Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
7
http://www.crlcefas.org/softprotocol.asp
seit November 2012 frei verfügbares Protokoll CEN/ISO TS 15216-2
Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
8 Barbara Becker, 2. Fresenius Praktikertagung Analytik & QS, 2012
Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
9
Forschungsprojekt 2007-2009
Einfluss technologischer Prozesse auf die Inaktivierung und Tenazität
von Norovirus in Lebensmitteln
Das Forschungsvorhaben (AiF-FEI 15215 N) wurde im Programm zur Förderung der „Industriellen Gemeinschaftsforschung (IGF)” vom Bundesministerium für Wirtschaft und Technologie (via AiF) über den Forschungskreis der Ernährungsindustrie e.V. (FEI) gefördert.
Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
10
Viren aus Lebensmitteln extrahieren
Aufkonzentrierung durch Ultrafiltration (Vivaspin)
Verdau freier RNA/RNase Inhibition
RNA-Extraktion MS2 Extraktionskontrolle
real-time RT-PCR
Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
11
Food product Process, treatment Process conduct/parameters
NV reduction [log10] ±SEM
NV reduction (nominal)
Frozen pizza Heating Baking in table oven, 12 min at 200 °C > -4 ±0.36 +
Frozen pizza Freezing Storage in freezer, 14 days at -18 °C -1.1 ±0.92 ▬
Mincemeat Heating Cooking in boiling liquid, 30 min at 100 °C > -7 ±0.29 +
Mincemeat Freezing Storage in freezer, 8 days at -18 °C 0.0 ±3.06 ▬
Mincemeat Cooling Storage in refrigerator, 2 days at +6 °C 0.0 ±0.61 ▬
Apple Cooling Storage in refrigerator, 7 days at +11 °C -0.2 ±0.76 ▬
Iceberg lettuce Cooling Storage in refrigerator, 5 days at +11 °C 0.1 ±0.15 ▬
Reduction of human norovirus in selected food matrices during different processes and storage conditions
Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
12 Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
13
Übertragungswege Lebensmittel-assoziierter Viren primäre Kontamination von Lebensmitteln (z.B. Früchte, Muscheln)
sekundäre Kontamination bei Produktion, Verarbeitung und Zubereitung
− Arbeitsflächen
− Verpackungen
− Maschinen
− Transportbänder
− Transportkisten
− Latexhandschuhe
− usw.
Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
14
Forschungsprojekt 2011 - 2013
Tenazität und Inaktivierung von humanem Norovirus auf unterschiedlichen Werkstoffen von Bedarfsgegenständen in der Lebensmittelproduktion und -verarbeitung
Das Forschungsvorhaben (AiF 16970 N) wird im Programm zur Förderung der „Industriellen Gemeinschaftsforschung (IGF)” vom Bundesministerium für Wirtschaft und Technologie (via AiF) über den Forschungskreis der Ernährungsindustrie e.V. (FEI) gefördert.
Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
15
Tenazität von hNV auf Werkstoffen real-time RT-PCR
hNV
kein Unterschied der Virusstabilität auf getesteten Materialen (Edelstahl, Plastik)
Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
16
Wirkstoffgruppe/-basis (Aktive) Substanz Wirkstoffkonz. [V-%]
Alkoholpräparate
Ethanol 30 %, 62 %, 70 %, ≥90 % 1-Propanol (n-
Propanol) 30 %, 62 %, 70 %, ≥90 %
2-Propanol (Isopropanol)
30 %, 62 %, 70 %, ≥90 %
Aldehyd Glutaraldehyd 0,1 %, 0,5 % 2,5 %
Aktiv-Chlor-/ Halogenverbindungen
Natriumhypochlorit 0,01 %, 0,1 %, 1 % Elektrolyse-Wasser
(Chlorverbindungen) 5 %, 10 %
Organische Säure Peressigsäure 0,1 %, 0,5 %, 2 %
Wirkstoffprüfung mit Desinfektionsmittelkomponenten
Einwirkzeiten Umgebungstemperatur
0,5, 5 und 60 Min +/- 10 s 21 °C und 7 °C +/- 1 °C
Humanes Norovirus (NV), Felines Calicivirus (FCV), Murines Norovirus (MNV)
Prof. Dr. Barbara Becker Mikrobiologie 27. Nov. 2013
Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit!
Prof. Dr. Barbara Becker, Dr. Sascha Mormann Institut für Lebensmitteltechnologie-NRW (ILT-NRW) FB4 – Life Science Technologies
Telefon +49 5261 702 -5909 Telefax +49 5261 702 -404 [email protected] www.hs-owl.de/fb4
Das Forschungsvorhaben (AiF 16970 N) wurde im Programm zur Förderung der „Industriellen Gemeinschaftsforschung (IGF)” vom Bundesministerium für Wirtschaft und Technologie (via AiF) über den Forschungskreis der Ernährungsindustrie e.V. (FEI) gefördert.