Zbl. Bakt. Abt. II, Bd. 133, S. 180-187 (1978)

[Sektion Biowissenschaften der Karl-Marx-Universitat Leipzig, Wissenschaftsbereich Pflanzen­physiologie und Mikrobiologie]

Zur Wirkung einiger Morpholinoverbindungen auf die Vermehrungvon RNA-Viren

On the Effect of some Morpholinium Compounds on the Multiplicationof RNA Viruses

Siegfried Kluge, Gisela Menzel und Monika Moschke

Summary

In the present paper the authors report about the effect of N,N-dimethylmorpholinium chloride(DMMC), N,N-dimethyl-2-oxomorpholinium chloride (DMOMC), and N,N-diethyl-2-oxomorpholi­nium chloride (DEOMC) on the multiplication of tobacco mosaic virus (TMV), potato virus X (PVX),and cucumber mosaic virus (CMV) as well as the plaque formation by the RNA phages M 12, f 2, andQI3.

The used morpholinium compounds do not influence strikingly the multiplication of phytoviruses.The results found by serological procedure and by bio-assay are indicated concordantly by the twomethods. The plaque formation by bacteriophages is not influenced by DMMC, but enhanced signi­ficantly by DMOMC and DEOMC. These effects might be caused by the different hydrolytical be­haviour of the morpholinium compounds tested.

Zusammenfassung

In der vorliegenden Arbeit wird liber den Einflu13 von N,N-Dimethylmorpholino-chlorid (DMMC),N ,N-Dimethyl-2-oxo-morpholino.chlorid (DMOMC) und N ,N-Diathyl·2.oxo-morpholino-chlorid(DEOMC) auf die Vermehrung von Tabakmosaikvirus (TMV), Kartoffel-X-Virus (PVX) und Gurken­mosaikvirus (CMV) sowie auf die Plaquebildung durch die RNA-Phagen M 12, f2 und QI3 berichtet.

Die genannten Morpholinoverbindungen liben auf die Vermehrung der Phytoviren keinen deut­lichen Einflul3 aus. Dabei stimmen die mit den serologischen Verfahren und mit dem Biotest erhalte­nen Ergebnisse weitgehend iiberein. Die Plaquebildung durch die Bakteriophagen wird durch DMMCnicht beeinflul3t, durch DMOMC und DEOMC hingegen signifikant gefordert. Als Ursache dafUrkonnte das unterschiedliche hydrolytische Verhalten der gepriiften Morpholinoverbindungen inBetracht gezogen werden.

Aus der Gruppe der Morpholinoverbindungen sind in den letzten Jahren einigePraparate mit auffallender biologischer Wirkung bekannt geworden. So wird N­Tridecyl-2,6-dimethyl-morpholin (Tridemorph) als systemisches Fungizid insbesonderegegen Erysiphe graminis eingesetzt (FEHRMANN 1976). Dber fungizide Wirkungenweiterer Morpholinoverbindungen berichteten u. a. GORALSKI (1973a), SHEMA et al.(1973), POMMER et al. (1975) und SvrSHCHU"K et al. (1975). Gelegentlich wurden auchbakterizide oder bakteriostatische Effekte beobachtet (SHEMA et al. 1973, GORALSKI1973 b). Von N-Methyl-N-(morpholinomercapto).N'-(3,4-dichlorphenyl)-harnstoff undnahe verwandten Verbindungen ist eine herbizide Wirkung nachgewiesen worden

Zur Wirkung einiger Morpholinoverbindungen 181

(HAINAUT et al. 1976). Weitere Morpholinoverbindungen wirken als Insektizide(OKADA u. NAKANISHI 1970) oder Wachstumsregulatoren (JUNG u. SCHOLZ 1968,OKADA U. NAKANISHI 1970, HAYASHI et al. 1976). Uber eine Steigerung des Masse­ertrages bei Kulturpflanzen durch Morpholinoverbindungen und einige wachstums­retardierende Eigenschaften berichteten WITEK et al. (1973), KNYPL et al. (1976) undKNYPL (1977). Solche Erscheinungen werden u. a. durch N,N-Dimethyl-morpholino­chlorid, N,N-Dimethyl-2-oxo-morpholino-chlorid und N,N-Diathyl-2-oxo-morpho­lino-chlorid verursacht.

Auf Grund der unterschiedlichen und vielseitigen biologischen Aktivitat war esvon besonderem Interesse zu priifen, inwieweit derartige Verbindungen bestimmtePhytoviren beeinflussen konnen, da deren Vermehrung in starkem MaGe von Wachs­tumsregulatoren abhangig sein kann (z. B. CHEO 1971, SCHUSTER 1971, SETH U.

RAYCHAUDHURI 1975). Um einige weiterfiihrende Hinweise zur Wirkung dieser Sub­stanzen und eventuell einige Anhaltspunkte fur deren Wirkungsmechanismus zu er­halten, wurden in die Untersuchungen auch RNA-Bakteriophagen einbezogen.

Material und Methoden

Viren und ihre WirteDie in den Untersuchungen verwendeten Viren und ihre Wirte sind in der Tabelle I aufgefUhrt.

Tabelle 1. Ubersicht uber die verwendeten Viren und deren Wirte

Virus Stammbe- Herkunftzeichnung

Wirt

Systemischer Wirt Lokallasionswirt

Tabakmosaikvirus(TMV)

Kartoffel-X-Virus(PVX)

Gurkenmosaikvirus(CMV)

Bakteriophage M 12

Bakteriophage f2

Bakteriophage QE

Grunstamm Sektion Biowissen- Nicotiana tabacum Nicotiana glutinosaschaften,' KMU, L. "Samsun" L.Leipzig

H 19 Biologische Bundes- N icotiana tabacum Gomphrena globosaanstalt, Braun- L. "Samsun" L.schweig

GM-FrJSU lnstitut Phyto- Nicotiana glutinosa Chenopodium ama-pathologie, L. ranticolor Coste etAschersleben Reyn.

Zentralinstitut fUr Escherichia coli W 1665 F+Mikrobiol. u. exper.Therapie der AdWder DDR, Jena

Dr. REGOS, Basel Escherichia coli K 1046

Max-Planck-lnst. Escherichia coli AB 301fUr Biochemie,Munchen

Fur die Uberlassung der genannten Stamme sprechen die Autoren ihren verbindlichen Dank aus.

Testsubstanzen

Folgende Morpholinoverbindungen wurden von uns auf ihren EinfluE auf die VirusvermehrunggeprUft: N ,N-Dimethyl-morpholino-chlorid (DMMC), N ,N-Dimethyl-2-oxo-morpholino-chlorid(DMOMC) und N,N-Diathyl-2-oxo-morpholino.chlorid (DEOMC)l).

I) Fur das Uberlassen der Substanzproben danken wir Dr. J. S. KNYPL, lnstytut Fizjologiii Cytologii Universytetu Lodzkiego, Pracownia Regulatorow, Wzrostu Roslin.

182 S. KLUGE, G. MENZEL und M. MOSCHKE

Substanztestung mit Phytoviren

Den EinfluJ3 del' drei Morpholinoverbindungen auf die Vermehrung von Phytoviren priiften wirim Ganzpflanzentest. Als Wirte fiir diese Viren wurden die in del' Tabelle 1 genannten Pflanzen kul­tiviert. Die Kulturbedingungen wurden bereits friiher beschrieben (KLUGE 1976). Beim Ganzpflan­zen test erfolgte eine dreimalige Behandlung mit verschieden konzentrierten Losungen (10-2 M, 10-3

M, 10-4 M, 10-5 M) del' Morpholinoverbindungen jeweils 2 Tage VOl' und 2 Tage nach del' Inokulationmit virushaltigem Pref3saft. Die Versuchspflanzen wurden jeweils bis zur Tropfnasse bespriiht. Ino­kuliert wurden stets das erste und zweite noch vollig intakte Blatt von unten. Fiir die Untersuchungenwurde das obere del' beiden inokulierten Blatter und von den sekundar infizierten Blattern das zweiteauf das obere primal' infizierte Blatt folgende ausgewahlt. Die inokulierten Blatter del' TMV-infizier­ten Pflanzen entnahmen wir 7 Tage, die del' PVX- und CMV-infizierten Tabakplanzen 5 Tage nachdel' Inokulation. Die sekundar infizierten Blatter TMV-kranker Pflanzen wurden 17-19 Tage, diePVX-kranker Pflanzen 13-14 Tage und die CMV-kranker Pflanzen 8- 9 Tage nach del' Inokulationgeerntet.

Del' Virusgehalt wurde bei allen verwendeten Viren sowohl auf serologischem Wege als auch mit­tels des Biotestes bestimmt. Zur Bestimmung des Gehaltes an TMV und PYX bedienten wir uns desserologischen Tropfentestes (Prazipitationstest). Sowohl TMV- als auch PVX-haltiger Pref3saft wurde10 Min. bei 4100x g (~6000 U/min) in einer Zentrifuge yom Typ '1'23 zentrifugiert. Nach del' Zentri­fugation wurden yom Pref3saft Verdiinnungsreihen in geometrischer Folge hergestellt. Del' Pref3saftwurde mit 1/15 M Phosphatpuffer (pH 7,0) verdiinnt. Von den verschiedenen Stufen des verdiinntenPref3saftes wurde je 1 Tropfen von 20,u1 auf eine Glasplatte gebracht und mit 20,u1 Antiserum gegendas jeweilige Virus vermischt. Durch mikroskopische Betrachtung im Dunkelfeld wurde die Vel'­diinnungsstufe ermittelt, bei del' gerade noch ein Prazipitat sichtbar war (Endverdiinnung). ZurKontrolle auf unspezifische Reaktionen, d. h. Reaktionen mit natiirlichem pflanzlichen Protein,wurde del' Tropfentest mit Normalserum wiederholt. Proben mit unspezifischen Reaktionen wurdenausgesondert. Del' Gehalt an CMV wurde mittels des Radialimmundiffusionstestes (RIDT) in Anleh­nung an das von RICHTER et al. (1975) ausgearbeitete Verfahren bestimmt.

Auf3er dem serologischen Virusnachweis, del' auf del' Reaktion des Antiserums mit dem Virus­protein beruht, wurden Bioteste zur Kennzeichnung des Gehaltes an aktiven Viruspartikelndurchgefiihrt. Die fur die verschiedenen Viren verwendeten Lokallasionswirte sind aus del' Tabelle 1ersichtlich. Del' virushaltige Pref3saft muf3te in Abhangigkeit Yom zu testenden Virusstamm und denspezifischen Versuchsbedingungen in unterschiedlichem Maf3e verdiinnt werden, um zu garantieren,daf3 Virusgehalt und LokalUisionenanzahl im Proportionalitatsbereich lagen. In del' Regel envies sichfiir TMV eine Verdiinnung auf 10-3 , fUr PYX und CMV auf 10-2 als giinstig. Del' virushaltige Pref3·saft wurde im Faile del' TMV- und PVX-Testung mit 1/15 1\1 Phosphatpuffer (pH 7,0) und im Falledel' CMV-Testung mit dem zur Serologie verwendeten Standardpuffer verdiinnt. Fiir den Biotestwurden gut ausgebildete, nicht zu alte Blatter (1 Blatt bis 3 Blatter an jeder Pflanze) ausgewahlt,mit Karborundpuder (Korngrol3e 500, VEB Stickstoffwerk Piesteritz) bestaubt und auf ihnen del'virushaltige, verdiinnte Prel3saft abgerieben. Urn einen Einfluf3 des Blattalters auf die Ausbildungvon Lasionen weitgehend auszuschlief3en, wurde auf der einen Blatthalfte verdiinnter Pref3saft del'Kontrolle, auf del' anderen verdiinnter Prel3saft einer iibrigen Versuchsvariante abgerieben. 1m Falledel' C1\1V-Bestimmung wurde del' Pref3saft einer jeden Probe auf die gesamte Blattflache aufgetragen.Wir verwendeten dabei nahezu gleich inserierte Blatter. Die Lasionen wurden nach 3-5 Tagen aus­gezahlt.

Substanztestung mit Bakteriophagen

Die Morpholinoverbindungen wurden im Agrardiffusionslochtest und im Gul3plattentest auf ihreWirksamkeit in den in del' Tabelle 1 genannten Virus/Wirt-Kombinationen gepriift.

Fiir den Lochtest wurden Doppelschichtplatten (Durchmesser = 15 em) mit Nahragar verwen­det. Die Grundschicht bestand aus

PeptonWalfleischextrakt1/15 M Phosphatpuffernac h SORENSE.·Agar

1 %0,1%

25 %

1,5%

Zur Wirkung einiger Morpholinoverbindungen 183

in Aqua dest. End-pH = 7,2;die Deeksehieht war zusammengesetzt ausBaeto Tryptone (Difeo) 0,8 %NaCl 0,5%Agar 0,6%in Aqua dest. End-pH = 7,0-7,2.

Bakterien einer 16-Std.-Kultur wurden mit physiologiseher NaCl-Losung von Sehragagar abge­sehwemmt, mit Phagen in einem geeigneten Verhaltnis gemiseht und dem noch fliissigen Decksehieht­agar zugegeben. Nach dem Erstarren des Agars }Vurden Locher von 1 em Durchmesser gestanzt undin diese 0,1 M Losungen der Morpholinoverbindungen eingefiillt, so daB sich im Agar ein Diffusions­gradient ausbilden konnte. AuBerdem wurden Lochtestplatten ohne Phagen angesetzt. Die Inkuba­tion samtlicher Platten erfolgte 20 Std. bei 37°C. Auswertekriterien waren die Beeinflussung derPlaquebildung und die Veranderung der'Bakteriendiehte urn die jeweiligen Stanzlocher.

Zur quantitativen Erfassung einer Wirkung auf die Plaquebildung wurde der GuBplattentestverwendet. Hierbei wurden dem fliissigen Deeksehiehtagar Bakterien, Phagen und die Losung derTestsubstanz zugefiigt. Die Auswertung erfolgte naeh 20stiindiger Bebriitung dureh Auszahlen derPlaques.

Ergebnisse und Diskussion

Die Ergebnisse iiber die Wirkung der gepriiften Morpholinoverbindungen sind inden Tabellen 2, 3 und 4 aufgefiihrt. Sowohl die bei der serologischen Testung als auchdie im Biotest erhaltenen Befunde zeigen iibereinstimmend, daB die Verbindungenauf die Vermehrung von TMV, PYX und CMV kaum einen EinfluB haben. Mituntertreten schwache F6rderungen oder Hemmungen der Virusvermehrung auf. So fiihrtz. B. DMMC in einer Konzentration von 10-2 M in inokulierten BliLttern zu einer

Tabelle 2_ EinfluB von DMMC auf die Vermehrung von pflanzenviren

Virus Konzentrationder Substanz

Virusgehalt

Durehschnittliehe Endver·diinnung (Tropfentest)

Anzahl LokallasionenlBlatthalfte bzw. Blatt!)

pro info Blatter sek. info Blatter pro info Blatter sek. inf. Blatter

TMV (K) 4,0 4,1 15 ± 4 25 ± 210-2 M 4,5 3,5 14 ± 5 25 ± 210-3 M 4,0 3,6 18 ± 4 24 ± 21O-~ M 3,8 3,4 25 ± 4 26 ± 210-5 M 4,0 3,8 16 ± 2 24 ± 1

PYX (K) 2,7 3,9 23 ± 3 26 ± 210-2 M 2,6 3,9 23 ± 3 20 ± 210-3 M 2,6 4,1 19 ± 2 22 ± 41O-~ M 2,0 3,9 19 ± 4 21 ± 210-5 M 2,1 4,0 22 ± 4 21 ± 2

Triibungsring (mm)

CMV (K) keine mit dem 1,0 ± 0,0 14 ± 3 18 ± 310-2 M RIDT naeh- 1,0 ± 0,2 12 ± 2 23 ± 21O-3 M weisbare 0,7 ± 0,1 8±5 16 ± 310-,1 M Viruskonz. 0,8 ± 0,1 6 ± 1 23 ± 410-5 M 1,0 ± 0,1 12 ± 1 23 ± 2

1) Vgl. Methode; pro info Blatter = primar infizierte Blatter, sek. inf. Blatter = sekundar infi·zierte Blatter, K = unbehandelte Kontrolle, RIDT = Radialimmundiffusionstest.

184 S. KLUGE, G. MENZEL und M. MOSCHKE

Tabelle 3. EinfluB von DMOMC auf die Vermehrung von Pflanzenviren

Virus Konzentration Virusgehaltder Substanz

Durchschnittliche Endver- Anzahl Lokallasionenjdiinnung (Tropfentest) BlatthiUfte bzw. Blattl)

pro info Blatter sek. in£. Blatter pr. info Blatter sek. in£. Blatter

TMV (K) 4,0 3,1 16 ± 1 11 ± 210-2 M 4,7 3,7 16 ± 1 15 ± 110-3 M 4,1 3,2 . 17 ± 1 10 ± 310-4 M 3,9 2,3 12 ± 1 5 ± 110-5 M 3,4 3,5 12 ± 1 7 ± 2

PYX (K) 2,5 3,4 24 ± 3 25 ± 410-2 M 2,4 3,5 26 ± 3 29 ± 310-3 M 2,7 3,3 27 ± 5 25 ± 410-4 M 3,0 3,3 23 ± 3 23 ± 410-5 M 2,5 2,8 18 ± 3 22 ± 2

Triibungsring (mm)

CMV (K) keine mit dem 0,9 ± 0,1 19 ± 3 12 ± 210-2 M RIDT nach- 1,0 ± 0,1 18 ± 2 22 ± 610-3 M weisbare 1,0 ± 0,1 14 ± 2 13 ± 410-4 M Viruskonz. 0,7 ± 0,1 20 ± 2 17 ± 210-5 M 1,0 ± 0,1 12 ± 1 19 ± 4

1) Anmerkungen S. Tabelle 2.

Tabelle 4. EinfluB von DEOMC auf die Vermehrung von Pflanzenviren

Virus Konzentration Virusgehaltder Substanz

Durchschnittliche Endver- Anzahl Lokallii.sionenjdiinnung (Tropfentest) BlatthiUfte bzw. Blattl )

pro info Blatter sek. info Blatter pro info Blatter sek. in£. Blatter

TMV (K) 3,7 3,7 20 ± 1 15 ± 210-2 M 3,7 3,6 15 ± 1 14 ± 210-3 M 4,1 3,9 16 ± 1 15 ± 210-4 M 3,4 4,1 23 ± 1 15 ± 210-5 M 3,6 3,3 17 ± 1 5 ± 1

PYX (K) 2,3 2,6 24 ± 3 22 ± 210-2 M 2,9 2,8 25 ± 3 31 ± 310-3 M 2,9 2,6 19 ± 4 27 ± 210-4 M 2,9 2,4 18 ± 3 23 ± 310-5 M 3,3 2,6 19 ± 1 17 ± 3

Triibungsring (mm)

CMV (K) 0,7 ± 0,1 0,8 ± 0,1 9±2 26 ± 410-2 M 0,3 ± 0,1 0,8 ± 0,1 12 ± 3 21 ± 310-3 M 0,5 ± 0,1 1,2 ± 0,1 14 ± 3 20 ± 310-4 M 0,5 ± 0,1 0,8 ± 0,1 15 ± 2 25 ± 210-5 M 0,6 ± 0,1 0,7 ± 0,1 14 ± 1 32 ± 4

1) Anmerkungen S. Tabelle 2.

Zur Wirkung einiger Morpholinoverbindungen 185

geringen Erhohung des serologisch nachweisbaren TMV-Gehaltes. Niedrige Konzen­trationen der gleichen Substanz verursachen eine Verminderung des Gehaltes an PYX.Auf Grund der vereinzelten und dann nur schwachen Wirkungen der drei chemisch engverwandten Morpholinoverbindungen auf die Vermehrung der verschiedenen Phyto­viren kann man den diesbezuglichen Wirkungsgrad der Substanzen als relativ geringeinschatzen.

Die mit RNA-Bakteriophagen durchgeftihrten Untersuchungen erbrachten folgendeErgebnisse:

Von den Morpholinoverbindungen zeigten DMOMC und DEOMC einen deutlichenEinfluB auf die Plaquebildung durch Bakteriophagen. DMMC hatte im Lochtest wederauf die Phagen M 12 und f 2 noch auf den Phagen QB einen EinfluB. Auf die E. coli­Stamme, die als Phagenwirte verwendet wurden, konnte keine substanzbedingteWirkungfestgestellt werden (Tabelle 5).

Tabelle 5. EinfluB einiger Morpholinoverbindungen auf die Plaquebildung durch Bakteriophagenund auf die Vermehrung von E. coli (Lochtest)

Bakteriophagen E. coli

Substanz

DMMC

DMOMC

DEOMC

M12 f2 Q13 W1665 F+ KI046 AB301

t = Erhohung der Plaqueanzahl, - = ohne Einflu13.

Tabelle 6. EinfluB einiger Morpholinoverbindungen (10-2 M) auf die Plaqueanzahl im System M12JE. coli W 1665 F+ (Gu13plattentest)

Substanz Plaqueanzahl in % Statistische Siche­rung der Differenzzur Kontrolle

DMMCDMOMCDEOMCKontrolle

108,7 ± 11,8147,5 ± 9,3173,4 ± 7,6100,0 ± 5,2

+++++

Irrtumswahrscheinlichkeit: +++ ~ 0,1%; ++ ~ 1,0%; + ~ 5,0%;· > 5,0%.

Um den EinfluB der Morpholinoverbindungen auch quantitativ zu erfassen, wurdeder GuBplattentest mit der VirusjWirt-Kombination M 12jE. coli W 1665 F+ einge­setzt. Die Ergebnisse, die unter Verwendung einer Konzentration von 10-2 M erhaltenwurden, sind in Tabelle 6 dargestellt. Durch DMOMC und DEOMC ist die Anzahlder Plaques signifikant erhoht, womit einerseits eine gute Ubereinstimmung mit denErgebnissen des Lochtestes und andererseits eine graduelle Abstufung in der Wirkungder Substanzen nachgewiesen wird. Wahrend diese fur einen Wirkstoff ziemlich hoheKonzentration deutliche Effekte zeigt, verursachen geringere Substanzkonzentratio­nen keine Veranderung der Plaqueanzahl.

186 S. KLUGE, G. MENZEL und M. MaSCHKE

Obwohl sich DMMC und DMOMC nur durch den Austausch der CH2-Gruppe inPosition 2 am Morpholinoring gegen eine Carbonylgruppe unterscheiden, tritt durchDMOMC bei allen gepriiften Phagen eine Erhohung der Plaqueanzahl auf. In gleicherWeise wie DMOMC wirkt auch DEOMC, womit gezeigt wird, daB die Struktur derAlkylreste (Methyl oder Athyl) hinsichtlich der Plaquebildung relativ unbedeutendist.

Ursachen flir die unterschiedliche Wirkung von DMMC auf der einen Seite undDMOMC sowie DEOMC auf der anderen Seite liegen moglicherweise darin, daB sichder heterozyklische Ring der letztgenannten Verbindungen in Wasser Offnet undsich somit entsprechende Betain-Derivate bilden (KNYPL u. JANAS 1977). DMMC hin­gegen ist in Wasser stabil. Demzufolge konnten die Betain-Derivate die eigentlichenwirksamen Verbindungen bei der Erhohung der Plaqueanzahl sein.

Literatur

CHEO, P. C.: Effect of plant hormones on virus-replicating capacity of cotton infected with tobaccomosaic virus. Phytopathology 61 (1971), 869-872.

FEHRMANN, H.: Systemische Fungizide - ein Uberblick. I. Zur Wirkungsweise praxistiblicher Sub­stanzen. Phytopath. Z. 86 (1976),67-89.

GORALSKI, C. T.: Morpholine derivatives of 3,4,5-trichloro-2,6-pyridinedicarbonitrile. U.S. Patent3,896,122, Ser. No. 375,415 Int. Cl. C07d87/40 (1973a).

- Amides of dibromo- and tribromomethanesulfonic acids. U.S. Patent 3,892,743, Ser. No. 326,609Int. Cl. C07d27/04 (1973b).

HAINAUT, D., DEMOUTE, J. P., und TECHE, A.: Harnstoffe, Verfahren zu ihrer Herstellung und herbi·cide Zusammensetzungen. Auslegeschrift 2,256,275 Int. Cl. C07c147/00 (1976).

HAYASHI, M., ARIMITSA, T., and NISHIZAWA, M.: Plant axillary bud control by N-tridecyl-2,6-dime.thylmorpholine. Japan Patent 7,609,725; zit.: Chern. Abstr. 84 (1976), No. 175173v.

JUNG, J., und SCHOLTZ, H.: Mittel zur Hemmung des Pflanzenwachstums und zur Anderung desPflanzenhabitus. DDR Patent Nr. 64618, Kl. 451, 5/00 Int. Cl. AOln (1968).

KLUGE, S.: Proteingehalt in hell- und dunkelgriinen Blattbezirken mosaikkranker Tabakpflanzen.Biochem. Physiol. Pflanzen 170 (1976), 91-95.

KNYPL, J. S.: Gibberellin and auxin reverse the retarding effect of N,N-dimethylmorpholinium chlo­ride on the growth of cucumber hypocotyl. Z. Pflanzenphysiol. 82 (1977), 283-291.and JANAS, K. M.: The mechanism of action of N-dialkylmorpholinium growth retardants: inter­actions with phytohormones in the control of growth of cucumber, onion and Spirodela oligorrhiza.Abstracts of the International Conference on Regulation of Development Processes in PlantsHalle (1977), No. 196, S. 222.WITEK, S., and OSWIECIMSKA, M.: Growth retarding effect of N,N-dimethylmorpholinium chlorideand CCC in Spirodela oligorrhiza. Z. Pflanzenphysiol. 79 (1976), 53-61.

OKADA, K., and NAKANISHI, K.: N-(N-Phenylcarbamyloxy)morpholine. Japan Patent 6,926,295;zit.: Chern. Abstr. 72 (1970), No. 21726t.

POMMER, E., POLSTER, R., LOECHER, F., und HAMPEL, M.: Fungizide Mischung. Ger. Offen 2,365,177Int. Cl. AOIN 9-02 (1975).

RICHTER, J., POLA,K, J., und PROLL, E.: Ausarbeitung von Verfahren zum serologischen Schnell·nachweis des Gurkenmosaik-Virus in natiirlich infizierten krautigen Pflanzen. Arch. Phytopath.Pflanzenschutz 11 (1975), 307-318.

SCHUSTER, G.: Untersuchungen tiber die Beeinflussung der Virusvermehrung in Nicotiana tabacum"Samsun" durch einige Wuchsstoffe undWuchsstoffherbizide. Arch. Pflanzenschutz 7 (1971),171­187.

SETH, M. L., and RAYCHAUDHURI, S. P.: Effect of some growth regulators on the infectivity and multi­plication of cucumber mosaic virus. Z. Pflanzenkrankh. 82 (1975), 593-603.

SHEMA, B. F., BRINK jr., R. H., and SWERED, P.: N-2-Nitrobutylmorpholine and 2,2-dibromo-3­nitrilo-propionamide as a slime control composition. U.S. Patent 3,897,554, Ser. No. 365,386 Int.Cl. AOIN 9/22 (1973).

Zur Wirkung einiger Morpholinoverbindungen 187

SVISHCHUK, A. A., IKITENKO, V. G., CHEREPENKO, T. J., LOPATIN, V. M., RUDENKO, L. P., andLAVRENT'EVA, A. ~r.: Synthesis and physiological properties of morpholine amide of l-chloro­substituted cyclohexanecarboxylic acids. Fiziol. Akt. Veshchestva 7 (1975), 131-135. Zit.: Chern.Abstr. 83 (1975), No. 189144C.

WITEK, S., KRAWIEC, S., OSWIECIMSKA, M., BAKUNIAK, E., FULDE, S., OSTROWSKI, J., und WALCERZ,L.: Praparat zur VergroJ3erung der Pflanzenmasse, insbesondere bei Hlilsenfruchtlern. DDRPatent 101093, Kl. 451, 5/00 Int. Cl. AOln (1973).

Anschrift der Verfasser:

Dr. SIEGFRIED KLUGE und Dr. GISELA MENZEL, Karl-Marx-Universitat Leipzig, Sektion Biowissen.schaften Wissenschaftsbereich Pflanzenphysiologie und Mikrobiologie, 701 Leipzig, Talstra13e 33.