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30. Unitab Congress 17. Okt. 2006, Mainz Gliederung Blauschimmel – Symptome und Infektionszyklus Grundlagen der Resistenzentwicklung - Mechanismen der Resistenzentwicklung - Pilz- und Fungizid-abhängiges Gefährdungspotential aktuelle Resistenzsituation im deutschen Tabakbau Versuchserfahrungen mit neuen Mitteln Empfehlungen - „Antiresistenzstrategie“ - speziell gegen Blauschimmel in Deutschland Dr. Hermann-Josef Krauthausen, DLR Rheinpfalz, Neustadt/Weinstr. und Prof. Dr. Otmar Spring, Inst. für Botanik, Uni Hohenheim, Stuttgart Blauschimmelresistenz gegen Metalaxyl in Deutschland Metalaxyl Resistance of Tobacco Blue Mold in Germany

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30. Unitab Congress 17. Okt. 2006, Mainz

GliederungBlauschimmel – Symptome und Infektionszyklus

Grundlagen der Resistenzentwicklung - Mechanismen der Resistenzentwicklung

- Pilz- und Fungizid-abhängiges Gefährdungspotential

aktuelle Resistenzsituation im deutschen TabakbauVersuchserfahrungen mit neuen MittelnEmpfehlungen

- „Antiresistenzstrategie“

- speziell gegen Blauschimmel in Deutschland

Dr. Hermann-Josef Krauthausen, DLR Rheinpfalz, Neustadt/Weinstr. undProf. Dr. Otmar Spring, Inst. für Botanik, Uni Hohenheim, Stuttgart

Blauschimmelresistenz gegen Metalaxyl in Deutschland

Metalaxyl Resistance of Tobacco Blue Mold in Germany

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Peronospora tabacina an Tabak

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verändert, nach Spring, Uni Hohenheim

Meist lokale, weniger systemische Infektion Oosporen beschrieben,

aber seltenst gefunden

Primäre Infektionsquelle unsicher

Infektionszyklus von Peronospora tabacinaLife cycle of Peronospora tabacina

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Erstaufreten von Metalaxyl - Resistenz (Auswahl)

History of resistance to Metalaxyl (selection)

Kultur Erreger Zeit/Ort

Golfrasen Pythium sp. 1980 / USA (Pennsylvania)

Gurken Pseudoperonospora cubensis 1980 / Israel

Kartoffeln Phytophthora infestans Anfang 80er / Irland, NL, D

Kohl Peronospora parasitica 1983 / USA (FL, GA, CA)

Salat Bremia lactucae 1984 / England, USA

Sonnenblume Plasmopara halstedii 1996 / Frankkreich

Radies Peronospora parasitica 1997 / Deutschland

Zwiebeln Peronospora destructor 1997 / Neuseeland (auch D)

Tabak Peronospora tabacina 2002 / Deutschland

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hoch Fungizidempfindlichkeit niedrighigh Sensitivity low

Disruptive Resistenzentwicklung

(single step resistance, z.B. bei Metalaxyl und Strobilurinen)

Sel

ekt

ion

Sele

ktion

Hä u

fig

kei t

i n d

er P

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ula

t io

nF

req

ue n

cy

verändert nach EpiLogic

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Selektion

verändert nach EpiLogic

Kontinuierliche Resistenzentwicklung

(multi step resistance, „shifting“, z.B. bei Azolen)

hoch Fungizidempfindlichkeit niedrighigh Sensitivity low

Häu

fig

kei t

i n d

er P

op

ula

t io

nF

req

ue n

cy

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Kombiniertes Resistenzrisiko für ausgewählte Fungizide und Krankheiten

Phenylamide

QoI‘s (Strobilurine)

Dicarboximide3 6 9

Azole (u.a. SBI‘s)

„Switch“

Dimethomorph2 4 6

Dithiocarbamate

Tolylfluanid

Fosetyl-Al, S, Cu1 2 3

Fungizid-Risiko

Erreger

-Risiko

bodenbürtige u. samenbürtige

Erreger, Roste

Septoria

Alternaria

Cercospora

E. Mehltau

F. Mehltau

Botrytis

(verändert nach FRAC)

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Durchführung eines Tests auf Metalaxyl-Resistenzbei Blauschimmel

(verändert nach Eileen King-Watson, 1988)

Pflanzenmaterial:Verwendung von 7-9 Wochen alten Pflanzen (2-3 voll ausgebildete echte Blätter)

Fungizidbehandlung:Je Metalaxyl-Konzentration (0, 0.01, 0.1, 1, 10, 100 µg/ml)jeweils 5 Pflanzen tropfnass einsprühen

Inokulation:24 Std. später behandelte Pflanzen mit Blauschimmel der zu untersuchenden Proben inokulieren(5x104 Sporen/ml)

Inkubation im Klimaschrank:inokulierte Pflanzen bei hoher Luftfeuchte aufstellen:- 1.Tag dunkel bei 17°C- 2.-6. Tag: 12 Std. Licht bei 23°C, danach dunkel bei 17°C - 7. Tag dunkel bei 17°C

Auswertung:Ab 8. Tag Befallssymptome und Sporulation bewerten

Wahlweise können statt ganzer Pflanzen ab Schritt 3 auch abgeschnittene Blätter verwendet werden.

Testreihe Metalaxyl 2002

020406080

100120

1 3 5 7 9

11

Tage nach Inokulation

% In

fekt

ion

Kontrolle

1 ppm

5 ppm

10 ppm

50 ppm

100 ppm

Isolat A (Sporulation nach 8 Tagen)Pflanze 1 2 3 4 50 ppm + + + + +0,1 ppm + + + + +1 ppm + + + + +10 ppm + + + + +100 ppm + + + + +200 ppm + - - + +VM1 - - - - -

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Blauschimmelresistenz gegen Metalaxyl in Deutschland

Metalaxyl Resistance of Tobacco Blue Mold in Germany

Rhl-Pf. Bad-Wbg. Bayern andere Jahr s r s r s r s r

2002 0 2 0 3 0 1

2003 0 4 0 9 0 1

2004 0 4 0 2

2005 0 1 2 1 0 1

2006 4 Isolate im Test

Getestete Isolate (s = sensitiv, r = resistent)

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Infektiosität von Blauschimmel-Sporangien nach Überwinterung / Lagerung

LPP Mainz 2004

Wasserkontrolle

in Schuppen, draußen trocken überwintert

Sporangien in Löß-Staub eingefroren

Sporangien in Talkum eingefroren

luftgetrocknet und eingefroren

0 20 40 60 80 100 120

8 dpi 14 dpi

Sporangien an Tabakblättern, getrocknet

Sporangien an Tabakblättern,

Inokuation mit 50.000 Sporen/ml bzw. 0,5 ml Löß-Staub oder 2,5 ml Talkum in 10 ml A.dest am 19.5.03 in D2-4

Infektiosität von Blauschimmel-Sporangien nach Überwinterung/Lagerung

Infectivity of Blue Mold Sporangia after overwintering / storage

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Präparate nur in ausreichender Dosierung einsetzen;

Bei Mehrfach-Behandlungen möglichst Präparate aus unterschiedlichen Wirkstoffgruppen abwechselnd einsetzen;

Bei resistenzgefährdeten Wirkstoffen die Anzahl der Behandlungen mit Soloprodukten auf ein Mindestmaß reduzieren, besser Kombinations-präparate einsetzen;

Bei Tankmischungen sollte der Anteil eines effektiven, nicht resistenz-gefährdeten Wirkstoffes ausreichend hoch sein;

Resistenzgefährdete Wirkstoffe möglichst zu Epidemiebeginn einsetzen, aber nicht mehr bei fortgeschrittenem Befall;

Generelle Empfehlungen zur Verhinderung des Auftretens von Fungizidresistenz

Resistance Management Strategies for Using Fungicides

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Behandlung am 7.1.03 in D2-D4, Inokulation am 8.1.03, Bonitur am 10.2.03jeweils 4 x 10 Pflanzen; Inokulation mit 50.000 Sporangien/ml (Isolat Pfalz1-02)

Neue Fungizide gegen Blauschimmel (Gewächshaus)New fungicides against Blue Mold (greenhouse-test)

0

10

20

30

40

50

60Blatt 1 Blatt 2 Blatt 3 Blatt 4 Blatt 5 Blatt 6 Blatt 7

% sporulierende Blattfläche

LPP Mainz 2003

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Behandlung am 07.01.2004 in D2-D4 (2 x 8 Pfl.), jeweils 2 x 8 Pflanzen; Inokulation mit 50.000 Sporangien/ml (Isolat Y-1) am 08.01.2004, Bonitur am 21.01.2004

Neue Fungizide gegen Blauschimmel (Gewächshaus)New fungicides against Blue Mold (greenhouse-test)

0

10

20

30

40

50

60

70Blatt1 Blatt2 Blatt3 Blatt4 Blatt5

% sporulierende Blattfläche

DLR Rheinpfalz 2004

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Fungizidzusatz in Vgl. 2-7 ab Auflauf des Tabaks am 16.09.2003, in Vgl. 8 Spritzung am 07.10.2003 in D2,jeweils 3 x 30 Pflanzen; Inokulation mit 50.000 Sporangien/ml (Isolat Pfalz1-02) am 08.10.2003, Bonitur am 30.10.2003

0,0

10,0

20,0

30,0

40,0

50,0

60,0% bef. Pflanzen % Befallsstärke

Schwimmende Anzucht: Blauschimmel-Fungizide im WasserSwimming transplants: Fungicides against Blue Mold in Water

%

LPP Mainz 2003

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Fungizidzusatz in Vgl. 2-9 ab Auflauf des Tabaks am 11.12.2003, jeweils 3 x 30 Pflanzen; Inokulation mit 50.000 Sporangien/ml (Isolat Y-1) am 20.01.2004, Bonitur am 30.01.2004

Schwimmende Anzucht: Blauschimmel-Fungizide im WasserSwimming transplants: Fungicides against Blue Mold in Water

0

20

40

60

80

100

Kontro

lle

Fongan

il G

old, 2

,1 g

/100

l

Forum

, 10

g/10

0 l

Forum

, 33

g/10

0 l

Forum

+Cerco

bin, 1

0+2

g

Mel

ody M

ulti, 6

g/1

00 l

Mel

ody M

ulti, 1

6,7

g/100

l

Prüfm

ittel

(KIF

), 1,

7 g/1

00 l

Prüfm

ittel

(KIF

), 17

g/1

00 l

% bef. Blätter

%

DLR Rheinpfalz 2004

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Fungizidzusatz in Vgl. 2-10 ab Auflauf des Tabaks am 11.01.2005, jeweils 3 x 30 Pflanzen; Inokulation mit 50.000 Sporangien/ml (Isolat Y-1) am 10.02.und 14.02.2005, Bonitur am 21.02.2005

Schwimmende Anzucht: Blauschimmel-Fungizide im WasserSwimming transplants: Fungicides against Blue Mold in Water

0

20

40

60

80

100

Kontro

lle

Fongan

il G

old, 2

,1 g

/100

l

Forum

, 10

g/10

0 l

Forum

, 33

g/10

0 l

Forum

+Cerco

bin, 1

0+2

g

Mel

ody M

ulti, 6

g/1

00 l

Mel

ody M

ulti, 1

6,7

g/100

l

Prüfm

ittel

(KIF

), 1,

7 g/1

00 l

Prüfm

ittel

(KIF

), 17

g/1

00 l

Forum

+Previc

urN+C

antu

s

% bef. Pflanzen % bef. Blätter

%

DLR Rheinpfalz 2005

* = Einseitiger Einstichproben-Gauß-Test (verschieden von 0 auf 95%-Niveau (p = 0,05))

Nein*Ja*

Nein* Nein*

Ja*

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Wo setzen mögliche Bekämpfungsmaßnahmen im Infektionszyklus von Blauschimmel an ?

Resistenzzüchtung

Phytosanitäre Maßnahmen

Kontaktfungizide

Systemische Fungizide

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Vorbeugende Maßnahmen gegen Blauschimmel

Blue-Mold-Management (preventive measures)

Jungpflanzenanzucht

- Hygiene vor der Jungpflanzenanzucht (Überdauerung verhindern: Myzel in infizierten Stängeln, Konidien an trockenen Blättern, in Nachbarschaft Ziertabak oder Tabak in Gewächshäusern mit Nützlingseinsatz!)

- Hygiene und sorgfältiges Arbeiten bei der Jungpflanzenanzucht

- Sorgfältige Befallskontrollen vor dem Auspflanzen

- (zur Resistenzvermeidung: Verzicht auf Metalaxyl-haltige Fungizide)

Im Feld

- Sorgfältige Befallskontrollen

- schnelle Entfernung befallenen Pflanzenmaterials

- Rechtzeitige Beseitigung von Ernteresten

- Nutzung von Sortenunterschieden?

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Fungizide gegen Blauschimmel in Deutschland

Blue-Mold fungicides, registered/permitted in Germany

Jungpflanzenanzucht

- Maneb-Mittel (Maneb, 800g/kg), 0,05 %ig, max. 6 x

Freiland

- Forum (DMM, 150 g/l), 0,75 – 1,5 l/ha, max 3x, WZ 7 Tage (genehmigt nach §18a PSG)

- Ortiva u.a. (Azoxystrobin, 250 g/l), 1 l/ha, max 2x, WZ 14 Tage (genehmigt nach §18a PSG)

- Ridomil Gold MZ (Metalaxyl+Mancozeb, 40+640 g/l), 2 kg/ha, max 3x, WZ 7 Tage (genehmigt nach §18a PSG)

- Maneb-Mittel (Maneb, 800 g/kg), 0,1 – 0,2 %ig, max 12 x, WZ 7 Tage

- Mancozeb-Mittel (Mancozeb, 800 g/kg), 0,05 – 0,1 %ig, max 4 x, WZ 7 Tage

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Jungpflanzenanzucht

In Erde: Acrobat Plus (DMM+Mancozeb, 90+600 g/kg), 0,3 g/m², 3 x, (§ 18b PSG)

1. Beh.: erste Laubblätter 1 cm groß2. Beh.: ca. 2 Wochen später3. Beh.: kurz vor Auspflanzen

Schwimmende Anzucht: Melody Combi (Folpet+Iprovalicarb, 563+90g/kg), (§ 18b PSG)

3,3 g/m² je 100 l Wasser/m² (ggf. + Spritz-Beh. mit Acrobat Plus vor Auspflanzen)

Freiland4 – 6 Wochen nach Auspflanzung:

Acrobat-Plus (DMM+Mancozeb, 90+600 g/kg), 2 kg/ha, (in Rhl-Pf. §18b PSG) bzw:Forum (DMM, 150 g/l), 0,75 – 1,5 l/ha, WZ 7 Tage (genehmigt nach §18a PSG)

Je nach Befallsdruck ca. 2 Wochen später:

Ortiva (Azoxystrobin, 250 g/l), 1 l/ha, WZ 14 Tage (genehmigt nach §18a PSG)

Fungizid - Empfehlung gegen Blauschimmel in Deutschland

Recommended Blue Mold fungicides in Germany

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Zusammenfassung:

30. Unitab Congress 17. Okt. 2006, Mainz

Blauschimmelresistenz gegen Metalaxyl in Deutschland

Metalaxyl Resistance of Tobacco Blue Mold in Germany

Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit!

Im Jahr 2002 ist in Deutschland erstmals Metalaxyl-Resistenz bei Blauschimmel aufgetreten. Bis einschl. 2004 waren alle untersuchten Isolate resistent.

Molekulargenetische Untersuchungen zeigten hohe Übereinstimmung der „genetischen Fingerabdrücke“ aller Isolate (2002- 2004).

Dies ließ den Schluss zu, dass es sich bei den untersuchten Proben um einen einzigen Stamm des Pathogens handeln könnte. Es muss angenommen werden, dass das Pathogen eine Möglichkeit zur Überwinterung in Deutschland gefunden hat. Begleitende Infektionsversuche mit monatelang gelagerten Sporangien unterstützen diese Vermutung.

Eine Resistenz gegen andere Oomyceten-Wirkstoffe wurde bisher nicht beobachtet.

Im Jahre 2005 tauchten neben resistenten Isolaten erstmals auch wieder Metalaxyl-sensitive auf. Infektionen mit einem dieser Isolate waren nur auf der Sorte ITB 697, nicht aber auf Jupiter möglich.

Angepasste Bekämfungsstrategien wurden vorgestellt.