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Das filamentöse Virus (FV) der Bienen... ... aus der Sicht eines Elektronenmikroskopikers

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Das filamentöse Virus (FV) der Bienen...... aus der Sicht eines Elektronenmikroskopikers

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann2

❙ Literatur

❙ Material / Untersuchungen / Ergebnisse (auszugsweise)

❙ EM-Bilder (Negativkontrastierung)

❙ Zusammenfassung der eigenen EM-Untersuchungsergebnisse

Gliederung

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann3

❙ Morphologie:

Virion: Partikelgröße (100 - )170 x (400 - ) 450 nm

ellipsoid

3-schichtige Hülle

Nukleokapsid: 40 x 3150 nm

in drei 8er Windungen

❙ Nachweis/Vermehrung:

Fettkörper und Ovarien der adulten Arbeitsbienen und der Königin

Literatur (1)

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann4

❙ Vorkommen und Bedeutung:

Verbreitung weltweit, Nachweis relativ häufig

jährlicher Vermehrungszyklus

Höhepunkt in Frühlingsmitte und Tief im Spätsommer

Vermehrung nur bei gleichzeitiger Infektion mit Nosema apis

trübe, milchig weiße Hämolymphe

keine eigenständige Erkrankung, aber:

vermehrte Todesfälle im Winter bei gleichzeitiger Infektion mit FV und

Nosema apis gegenüber Monoinfektion mit Nosema apis

Literatur (2)Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann5

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

❙ Einsendungen: 1 Einsendung Anfang April

3 Einsendungen Ende Oktober bis Mitte November

❙ Vorberichte: starke Verluste

❙ Untersuchungsergebnisse:

bakteriologisch: Material: Honig, Futter- und Brutwabe, Tierkörper

Paenibacillus larvae (Amerik. Faulbrut) nicht nachgewiesen

parasitologisch: 4 x starker Befall mit Varroamilben 1 x starker Befall mit Nosema sp. (erste Einsendung)

EM: Material: Bienen, Larven (jeweils gesamte Tierkörper) 4 x FV-Nachweis

1 x zusätzlich 33 nm große Viruspartikel („Unassigned Viruses“) (erste Einsendung)

❙ Befunde: erste Einsendung: Schädigung durch Varroamilben und Nosema sp.übrige Einsendungen: Schädigung durch Varroamilben

Untersuchungen / Ergebnisse (Angaben auszugsweise)

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann6

Partikel ?

ca. 300 x 460 nm

Vgl. Lit.:

(100 - )170 x (400 - ) 450 nm

Eigene Untersuchungen – Probe 1Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann7

April 2009 - 1. Nachweis in LUA SN: FV-Nukleokapsid, ca. 40 nm Ø

vgl. zu Pivornavirales

Eigene Untersuchungen – Probe 1

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann8

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

Partikelgröße ca. 180 x 470 nm

Eigene Untersuchungen – Probe 1

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann9

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

Partikel ca. 70 x 580 nm Partikel mit defekter Hülle und

austretendem Nukleokapsid

Eigene Untersuchungen – Probe 1

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann10

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

Partikelgröße ca. 240 x 500 nm Zwei Partikel, Nukleokapsid ca. 40 nm Ø

Eigene Untersuchungen – Probe 1

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann11

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

Partikel ca. 270 x 580 nm

Nukleokapsid

mit

3-facher 8er Wicklung,

Ø ca. 40 nm

Eigene Untersuchungen – Probe 1

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann12

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

Viruspartikel

mit defekter Hülle

Nukleokapsid

mit

3-facher Wicklung

Eigene Untersuchungen – Probe 1

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann13

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

8er Wickelung des Nukleokapsids 3-fache Wicklung des austretenden

Nukleokapsids

Eigene Untersuchungen – Probe 1

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann14

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

Partikelgröße ca. 240 x 465 nm

Eigene Untersuchungen – Probe 2

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann15

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

Nukleokapsid

ca. 4000 nm lang,

mit Teilen der

Partikelhülle

Eigene Untersuchungen – Probe 2

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann16

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

Nukleokapsid

mit Teilen der

Partikelhülle

Eigene Untersuchungen – Probe 3

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann17

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

Verschiedene Viruspartikel (FV) mit intakter und defekter Hülle

Eigene Untersuchungen – Probe 3

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann18

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

Nukleokapsid, ca. 3200 nm lang

Eigene Untersuchungen –Probe 4.1

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann19

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

Partikelgröße ca. 350 x 600 nm 8er Wicklung des Nukleokapsides

Eigene Untersuchungen –Probe 4.1

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann20

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

Verschiede Viruspartikel (FV)

Eigene Untersuchungen – Probe 4.2

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann21

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

(FV: Größe der behüllten Viruspartikel: von ca. 180 x bis ca. 600 nm)

„Nicht filamentöse“ Viren / Virusformen(ikosaedrisch, sphärisch, ovoid, ellipsoid, bacilliform, geschoßförmig, pleomorph,...)

❙ Poxviridae (V,InV): ab 140 x bis 450 nm

❙ Baculoviridae (InV): Virion ab 30 x bis 300 nm bzw.ODV (Occlusion-derived virions) 300 x 500 nm mit einem oder mehreren Virionen

❙ Mimivirus (AAF): ca. 400 nm

❙ Ascoviridae (InV): 130 x bis 400 nm

❙ Rhabdoviridae (V,InV,P): 45 – 100 x 100 – 430 nm

❙ Polydnaviridae (InV): 85 x 330 nm (Ichnovirus)

❙ Nimaviridae (InV): ab 120 x bis 290 nm

❙ Roniviridae (InV): 40 – 60 x 150 – 200 nm

❙ Paramyxoviridae (V): 150 nm und mehr

Größenvergleich der nachgewiesenen FV mit ausgewählten großen Viren (1)

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann22

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

(FV: Nukleokapsid: Ø ca. 40 nm, bis ca. 4000 nm lang)

Filamentöse Viren / Virusformen bzw. „frei liegende“ Nukleokapside

❙ Lipothrixviridae (B): 24 – 38 x 410 – 2200 nm

❙ Filoviridae (V): Ø 80 nm, bis max. 1400 nm

❙ Rudiviridae (B): 23 x bis 900 nm

❙ Benyvirus (P): 20 x bis 390 nm

❙ Roniviridae (InV): Nukleokapsid 15 x 80 – 450 nm

❙ Nimaviridae (InV): Nukleokapsid ab 65 x bis 350 nm

❙ Orthomyxoviridae (V): filamentöse Formen bis mehrere Mikrometer Länge

Größenvergleich der nachgewiesenen FV mit ausgewählten großen Viren (2)

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann23

Das filamentöse Virus (FV) der Bienen

❙ Größe der behüllten Viruspartikel: ca. 180 – 370 nm x 470 – 600 nm

(Lit.: 100 - 170 x 400 - 450 nm)

❙ Größe des Nukleokapsids: Ø ca. 40 nm, bis ca. 4000 nm lang

(Lit.: 40 x 3150 nm)

❙ Nukleokapsid in 3fachen (8er-)Touren im behüllten Virion,

aus diesem bei defekter Hülle heraustretend oder freiliegend

❙ Doppelinfektion mit weiteren Bienenviren möglich

❙ Nachweis im Frühling und im Herbst

❙ Nachweis auch bei negativem Nosema apis-Befund

Zusammenfassung der eigenen EM-Untersuchungsergebnisse

| Mai 2010 | Kathrin Hoffmann24

Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit