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Papain-Lösung: Die pflanzliche Alternative zu Trypsin
Papain führt zur proteolytischen spaltung (hydro-lyse) von Proteinen und Peptiden, vorzugsweise an basischen Aminosäuren. das Papain für die herstellung dieser gebrauchsfertigen Papainlö-sung (61,25 mg/l) in Pbs ohne ca2+/mg2+ wird aus Papaya (Carica papaya) gewonnen.
die lösung zeigt im Vergleich zur trypsinlösung bei +2 – +8 °c nur eine kurze haltbarkeit. eine noch nicht angebrochene originalverpackung sollte daher nach dem Auftauen portioniert und wieder eingefroren werden. die haltbarkeit einer aufgetauten und bei +2 – +8 °c gelagerten lösung ist auf 36 h begrenzt.
Produkt Kat. Nr. Einheit
Papain-Lösung (61,25 mg/l)ohne ca2+/mg2+
lagertemperatur: –20 °c
l 2223 100 ml
Anwendungshinweis Papain-Lösung:
• Zum Passagieren der Zellen Zellkultur-Überstand dekantieren• Zellen einmal mit 5 ml Pbs (ohne ca2+/mg2+; kat. nr. l 1825/0) waschen• Überstand dekantieren• kulturgefäß (je nach Größe) mit 1,0 – 2,5 ml Papainlösung versetzen• einwirkzeit des Papains 5 – 7 min (bei +15 – +25 °c) unter entsprechender bewegung des kulturgefäßes und mikros-
kopischer kontolle der Zellablösung• Zellen in ein steriles Zentrifugenröhrchen überführen, bei 300 g für 10 min zentrifugieren• Überstand dekantieren und Pellet mit 15 ml kulturmedium aufnehmen• nach erneuter Zentrifugation Pellet in kulturmedium aufnehmen und in ein kulturgefäß aussäen
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