Internationale Vorschriften für die Prüfung von Saatgut 2016Validierte Methoden zur Gesundheitsprüfung von Saatgut

Inklusive Änderungen und redaktionelle Korrekturen verabschiedet auf der ordentlichen Generalversammlung 2016, Tallinn, Estland

Gültig ab 1. Januar 2017

7‑004: Nachweis von Phoma lingam an Samen von Brassica spp.

Règles Internationales pour les Essais de Semences 2016Méthodes validées pour analyse sanitaire des semences

Inclus les changements de règles et corrections éditoriales adoptées lors de la réunion annuelle générale 2016, Tallinn, Estonie

Effectives au 1er janvier 2017

7‑004: Détection de Phoma lingam sur semences de Brassica spp.

International Rules for Seed Testing 2017Validated Seed Health Testing Methods

Including changes and editorial corrections adopted at the Ordinary General Meeting 2016, Tallinn, Estonia

Effective from 1 January 2017

7‑004: Detection of Phoma lingam in Brassica spp. seed

7-004-2 Gültig ab 1. Januar 2017

Internationale Vorschriften für die Prüfung von SaatgutValidierte Methoden zur Gesundheitsprüfung von Saatgut

Validierungsstudien

Siehe Literaturquellen. Kopien sind erhältlich per E-mail ista.office@ista.ch durch das ISTA-Sekretariat.

Kommentare, Empfehlungen oder Berichte zu Problemen betreffend dieser Methode sind bitte an das ISTA Seed He-alth Committee über die Adresse des ISTA-Sekretariates zu richten.

Haftungsausschluss

Obgleich die ISTA mit Sorgfalt auf die Richtigkeit der in die-ser Methodenbeschreibung angegebenen Methoden und In for mationen achtet, haftet sie nicht für jeglichen Verlust, Schaden etc., der aus der Verwendung dieser Methode resultiert.

Sicherheitsmaßnahmen

Der sichere Umgang mit Gefahren im mikrobiologischen Labor und die Berücksichtigung entsprechender Vorsichts-maßnahmen, insbesondere während der Herstellung der Kulturmedien, dem Autoklavieren und Auswiegen der Be-standteile, sind zu gewährleisten. Es wird vorausgesetzt, dass diese Arbeitsschritte in einem mikrobiologischen Labor durch Mitarbeiter durchgeführt werden, die mit den Prinzipi-en der Guten Laborpraxis, Guten Mikrobiologischen Praxis und der sterilen Arbeitstechnik vertraut sind. Alle Abfallstoffe sind auf geeignete Weise und entsprechend der vor Ort üb-lichen Gesundheits-, Sicherheits- und Umweltbestimmun-gen zu entsorgen (z. B. durch Autoklavieren, Desinfizieren).

Herausgegeben von der:Internationalen Vereinigung für Saatgutprüfung (ISTA)Zürichstr. 50, 8303 Bassersdorf, Schweiz

©2017 International Seed Testing Association (ISTA)

Online ISSN 2310-3655

Titel der englischen Originalausgabe: International Rules for Seed Testing

Alle Rechte vorbehalten. Kein Teil dieses Werkes darf in irgendwelcher Form oder durch irgendwelchem Verfahren, sei es elektronisch, mechanisch, durch Fotokopie oder Tonauf-nahme oder durch irgendein anderes Verfahren reproduziert, gespeichert oder verbreitet werden, ohne vorherige schriftliche Genehmigung der Internationalen Vereinigung für Saatgutprüfung.

Anmerkung zur Benutzung der Übersetzungen

Die elektronische Version enthält die englische, französische und deutsche Version der ISTA-Vorschriften. Bei irgendwelchen Fragen bezüglich der Interpretation der ISTA-Vor-schriften ist die englische Version die massgebliche Version.

7-004-2 Effectif 1er janvier 2017

Règles Internationales pour les Essais de SemencesMéthodes validées pour analyse sanitaire des semences

Études de validation

Voir Références. Les copies sont disponibles au secrétariat de l’ISTA par courriel ista.office@ista.ch.

Merci d’envoyer les commentaires, suggestions ou signa-lement de problèmes sur cette méthode au responsable du ISTA Seed Health Committee, c/o Secrétariat de l’ISTA.

Limitation de responsabilité

En dépit du soin pris par l’ISTA pour assurer l’exactitude des méthodes et des informations contenues dans la descrip-tion des méthodes, l’ISTA décline toute responsabilité pour toute perte ou dommage, etc., résultant de l’utilisation de la présente méthode.

Sécurité

Assurez-vous de connaître les risques et prenez les me-sures de sécurité appropriées. Il est supposé que cette méthode est pratiquée dans un laboratoire de microbiologie par des personnes familières des principes de bonnes pra-tiques de laboratoire, de bonnes pratiques de microbiologie, et des techniques d’asepsie. Tous les déchets doivent être traités d’une manière appropriée (par exemple autoclavage, désinfection) et selon des règlements locaux de sécurité.

Éditées par :L’Association Internationale d’Essais de Semences (ISTA)Zürichstr. 50, 8303 Bassersdorf, Suisse

©2017 par l’Association Internationale d’Essais de Semences (ISTA)

Online ISSN 2310-3655

Titre de l’édition originale anglaise : International Rules for Seed Testing

Tous droits réservés. Aucune partie de cette publication ne peut être reproduite, stoc-kée dans le système de récupération ou être transmise sous aucune forme ou par aucun moyen, électronique, mécanique, photocopiant, enregistrant ou autrement, sans permis-sion antérieure par écrit de l’ISTA.

Remarque sur l’utilisation des traductions

La version électronique des règles inclue les versions en anglais, en français et en alle-mand. Pour toute question d’interprétation des règles, seule la version anglaise fait foi.

Chapter 7: Validated Seed Health Testing Methods International Rules for Seed Testing

Effective 1 January 20177-004-2

Validation reports

See References. Copies are available by e-mail from the ISTA Secretariat at ista.office@ista.ch.

Please send comments, suggestions or reports of problems relating to this method to the ISTA Seed Health Committee, c/o ISTA Secretariat.

Disclaimer

Whilst ISTA has taken care to ensure the accuracy of the methods and information described in this method descrip-tion, ISTA shall not be liable for any loss or damage, etc. resulting from the use of this method.

Safety precautions

Ensure you are familiar with hazard data and take appro-priate safety precautions, especially during weighing out of ingredients. It is assumed that persons carrying out this test are in a laboratory suitable for carrying out microbiological procedures and familiar with the principles of Good Labo-ratory Practice, Good Microbiological Practice, and aseptic techniques. Dispose of all waste materials in an appropriate way (e.g. autoclaving, disinfection) and in accordance with local health, environmental and safety regulations.

Note on the use of the translations

The electronic version of the International Rules for Seed Testing includes the English, French and German versions. If there are any questions on interpretation of the ISTA Rules, the English version is the definitive version.

Published byThe International Seed Testing Association (ISTA)Zürichstr. 50, CH-8303 Bassersdorf, Switzerland

©2017 International Seed Testing Association (ISTA)

Online ISSN 2310-3655

All rights reserved. No part of this publication may be reproduced, stored in any retrieval system or transmitted in any form or by any means, electronic, mechanical, photocopying, recording or otherwise, without prior permission in writing from ISTA.

Gültig ab 1. Januar 2017

Internationale Vorschriften für die Prüfung von Saatgut Validierte Methoden zur Gesundheitsprüfung von Saatgut

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7‑004: Nachweis von Phoma lingam an Samen von Brassica spp.

Wirtspflanze: BrassicaceaeKrankheitserreger: Phoma lingam (Tode ex Fr.) Desm.,

syn. Plenodomus lingam (Tode ex Fr.) Hohn (Haupt-fruchtform Leptosphaeria maculans (Tode ex Fr.) Ces. & de Not.). Nebenfruchtform Phoma lingam

Erstellt durch: ISTA-PDC Method Validation Sub-committee

Autoren: ISTA-PDC Method Validation Sub-committee

Revisionsstand

Version 1.0, 2001-11-192001-11-19: Revision J. Sheppard, V. CockerellNeuauflage 2003Version 1.1, 2008-01-01: „Behandeltes Saatgut“ überar-

beitet; „Berichterstattung der Ergebnisse“ überarbeitetVersion 1.2, 2014-01-01: Positivkontrolle hinzugefügtVersion 1.3, 2016-01-01: Neue FarbabbildungenVersion 1.4, 2017-01-01: „Berichterstattung der Ergebnis-

se“ überarbeitet

HintergrundDie Methode ist im Original zunächst veröffentlicht worden im ISTA Handbook of Seed Health Testing im November 1964 als S. 3 Nr. 31. Sie wurde 2002 in den überarbeiteten Anhang zum Kapitel 7 der Ausgabe 1999 der ISTA-Vor-schriften übernommen. Die Methode wurde im Jahr 2006 durch das ISTA-Seed Health Committee überprüft (Cocke-rell & Koenraadt, 2007) und für weitere 5 Jahre anerkannt.

Behandeltes (gebeiztes) SaatgutDiese Methode ist nicht validiert für die Bestimmung von Phoma lingam an behandeltem (gebeiztem) Saatgut. Saat-gutbehandlungen können die Aussagekraft dieser Methode beeinflussen (Definition Behandlung: Jegliches Verfahren, physikalischer, biologischer oder chemischer Natur, dem eine Saatgutpartie unterzogen wird, einschließlich Saatgu-tumhüllungen. Siehe dazu 7.2.3).

MaterialReferenzmaterial: Referenzkulturen oder andere geeig-

nete MaterialienSubstrat: Filterpapier, Durchmesser 90 mm (z. B. What-

man No. 1 oder Vergleichbares).2,4-Dichlorphenoxyacetat (2,4-D): Natrium-Salz in 0,2-

prozentiger LösungPetrischalen: Falls eine bestimmte Anzahl an Körnern

pro Petrischale vorgegeben ist, sollten solche mit einem Durchmesser von 90 mm benutzt werden.

Inkubator: Temperaturbereich 20 ±2 °C. Um die Sporu-lation zu fördern, wird ein Wechsel zwischen 12 h Dun-kelheit und 12 h UV-Licht während der Kultivierung empfohlen. Es sollte eine Schwarzlichtlampe (360 nm) verwendet werden, aber auch Tageslicht-Fluores-zenz-Röhren sind ausreichend.

ProbenvorbereitungDie Untersuchung wird mit einem Probenumfang von 1000 reinen Körnern durchgeführt, wie es im Kapitel 7.4.1 der ISTA-Vorschriften beschrieben ist.

Methode1. Vorbehandlung: keine2. Ausplattieren1.1 In Petrischale jeweils 3 Filterpapierscheiben (Whatman

Nr. 1 oder Vergleichbares) legen und mit 5 mL einer 0,2-prozentigen Natrium-2,4-Dichlorphenoxyace-tat-Lösung (2,4-D) befeuchten, um die Samenkeimung zu verhindern. Überschüssiges 2,4-D abgießen, die Sa-men mit sterilem Wasser spülen und 50 Stück pro Platte auslegen.

1.2 Positivkontrollen (Referenzmaterial): Unter sterilen Be-dingungen die Samen in einer entsprechenden Anzahl von Petrischalen verteilen, um eine Referenzkultur zu erhalten oder eine Referenzkultur auf dem Substrat aus-legen. Die Anzahl der erforderlichen Petrischalen wird von der Stärke der Kontamination der Positivkontroll-partie abhängen.

3. Inkubation: 11 Tage bei 20 °C mit einem Rhythmus von 12 h Dunkelheit und 12 h Licht inkubieren.

Effectif 1er janvier 2017

Règles Internationales pour les Essais de Semences Méthodes validées pour analyse sanitaire des semences

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7‑004 : Détection de Phoma lingam sur semences de Brassica spp.

Hôte : BrassicaceaePathogène(s) : Phoma lingam (Tode ex Fr.) Desm., syn.

Plenodomus lingam (Tode ex Fr.) Hohn (Stade parfait Leptosphaeria maculans (Tode ex Fr.) Ces. & de Not.). Stade imparfait Phoma lingam

Préparé par : Sous-Comité de Validation des Méthodes de l’ISTA-PDC

Auteurs : Sous-Comité de Validation des Méthodes de l’ISTA-PDC

Historique de la révision

Version 1.0, 2001-11-192001-11-19 : Révision J. Sheppard, V. CockerellRéimpression 2003Version 1.1, 2008-01-01 : « Traitement des semences »

révisé ; « Indication des résultats » réviséVersion 1.2, 2014-01-01 :Ajout de contrôle positifVersion 1.3, 2016-01-01 : Nouvelles figures en couleurVersion 1.4, 2017-01-01 : « Indications des résultats »

révisé

HistoriqueCette méthode a été à l’origine éditée dans le ISTA Hand ­book on Seed Health Testing, novembre 1964, S.3. No. 31. La méthode a été incorporée à l’annexe révisée du Chapitre 7 en 2002 à partir de l’édition 1999 des Règles ISTA. La méthode a été révisée par le Comité d’Analyse Sanitaire des Semences d’ISTA en 2006 (Cockerell & Koenraadt, 2007) avec la recommandation de l’accepter pour les cinq années à venir.

Semences traitéesCette méthode n’a pas été validée pour la détermination du Phoma lingam sur semences traitées. Les traitements peuvent affecter la performance de la méthode. (Définition de traitement : Tout de processus, physique, biologique ou chimique, auquel un lot de semences est soumis, y compris l’enrobage. Voir 7.2.3).

MatérielMatériel de référence : cultures de référence ou autre

matériel appropriéSubstrat : buvards (papier filtre), p. ex. Whatman no 1 ou

équivalent2,4-Dichlorophenoxyacétate (2,4-D) : solution à 0,2 %Boîtes de Pétri : la densité de l’ensemencement est don-

née par un nombre de semences par boîte de Pétri, pour un diamètre de 90 mm.

Étuve : fonctionnant à 20 ±2 °C. Pour favoriser la spo-rulation, l’alternance de périodes de 12 h d’obscurité et proche-UV (NUV) pendant l’incubation est recom-mandée. Lampe recommandée : fluorescente lumière noire (360 nm) mais les tubes fluorescents classiques sont satisfaisants.

Préparation de l’échantillonL’essai est effectué sur un échantillon de travail de 1000 semences pures comme décrit dans la section 7.4.1 des Règles ISTA.

Méthode1. Buvard1.1 Placer trois morceaux de papier filtre (Whatman no 1 ou

équivalent) dans chaque boîte de Pétri et ajouter 5 mL d’une solution 0,2 % d’acide dichlorophenoxyacétique (2,4-D) pour empêcher la germination des semences. Oter l’excès de 2,4-D, rincer les semences à l’eau stérile et placer 50 semences dans chaque boîte.

1.2 Contrôle positif (matériel de référence) : Placer les se-mences de manière aseptique et répéter avec un nombre approprié de boîtes pour obtenir la culture de référence, ou déposer une culture de référence sur milieu. Le nombre de boîtes requis dépend du niveau de contami-nation du lot de semences servant de contrôle positif.

2. Prétraitement : Aucun.

3. Incubation : Incuber pendant 11 jours à 20 °C avec des alternances de 12 h lumière et de 12 h d’obscurité.

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Chapter 7: Validated Seed Health Testing MethodsInternational Rules for Seed Testing

Effective 1 January 2017

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7‑004: Detection of Phoma lingam in Brassica spp. seed

Host: BrassicaceaePathogen(s): Phoma lingam (Tode ex Fr.) Desm., syn.

Plenodomus lingam (Tode ex Fr.) Hohn (Perfect state Leptosphaeria maculans (Tode ex Fr.) Ces. & de Not.). Imperfect state Phoma lingam

Prepared by: ISTA-PDC Method Validation Sub-committee

Authors: ISTA-PDC Method Validation Sub-committee

Revision history

Version 1.0, 2001-11-01Revised 2001-11-19: J. Sheppard, V. CockerellReprinted 2003Version 1.1, 2008-01-01: Treated seed revised; Reporting

results revisedVersion 1.2, 2014-01-01: Addition of positive controlVersion 1.3, 2016-01-01: New colour figuresVersion 1.4, 2017-01-01: Reporting results revised

Background

This method was originally published in the ISTA Hand-book of Seed Health Testing in November 1964 as S.3. No. 31. The method was incorporated into the newly revised Annexe to Chapter 7 in 2002 from the 1999 edition of the ISTA Rules. The method was reviewed by the ISTA-Seed Health Committee in 2006 (Cockerell & Koenraadt, 2007) with the recommendation to accept for a further five years.

Treated seed

This method has not been validated for the determination of Phoma lingam on treated seed. Seed treatments may affect the performance of the method.

(Definition of treatment: any process, physical, biolog-ical or chemical, to which a seed lot is subjected, includ-ing seed coatings. See 7.2.3)

Materials

Reference material: reference cultures or other appro-priate material

Media: blotters (filter paper), e.g. Whatman No. 1 or equivalent

2,4-Dichlorophenoxyacetate (2,4D): sodium salt 0.2 % solution

Petri dishes: when sowing density is given by a num-ber of seeds per Petri dish, a diameter of 90 mm is assumed.

Incubator: capable of operating in the range 20 ±2 °C. To stimulate sporulation, alternating 12 h periods of darkness and near-ultraviolet light (NUV) during incu-bation are recommended. The recommended source is the black light fluorescent lamp (peak at 360 nm) but daylight fluorescent tubes are satisfactory.

Sample preparation

The test is carried out on a working sample of 1000 pure seeds as described in Section 7.4.1 of the ISTA Rules.

Method

1. Blotter: 1.1 Place three pieces of filter paper (Whatman No. 1 or

equivalent) in each Petri dish and add 5 mL of a 0.2 % solution of the sodium salt of 2,4 dichlorophenoxy-acetic acid (2,4-D) to inhibit seed germination. Pour off the excess 2,4-D solution, rinse the seeds in sterile water and place 50 in each dish.

1.2 Positive control (reference material): Aseptically place seeds in an appropriate number of plates to obtain the reference culture, or plate a reference culture on me-dia. The number of plates required will depend on the level of contamination of the positive control seed lot.

2. Pretreatment: none

3. Incubation: Incubate for 11 days at 20 °C with alter-nating cycles of 12 h light and 12 h darkness.

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Internationale Vorschriften für die Prüfung von SaatgutValidierte Methoden zur Gesundheitsprüfung von Saatgut

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4. Auswertung: Nach 6 Tagen die Körner bei 25-fa-cher Vergrößerung auf das Vorhandensein eines sil-brig-weißen, locker wachsenden Myzels bzw. auf Pyk-nidien-Anlagen von Phoma lingam auf den Samen oder dem Substrat untersuchen (Abb. 1). Nach 11 Tagen eine zweite Untersuchung auf Pyknidien an den Kör-nern oder am Filterpapier unmittelbar an den infizierten Samen durchführen. Samen mit Pyknidien von Phoma lingam werden als infiziert gewertet. Mit Positivkont-rolle vergleichen.

Die Pyknidien sind relativ groß (etwa 250 µm) und besitzen eine Papille, die bisweilen halsförmig sein kann (Abb. 2 u. 3). Der ubiquitäre Saprophyt Phoma herbarum Westend. kommt ebenfalls an Brassica-Saat-gut vor (Abb. 4), hat aber kleinere Pyknidien ohne Papille und bildet gelbe oder pink-farbene Exudate aber nie purpur-farben (Amethyst-farben).

Allgemeine MethodenÜberprüfung der Toleranz: Toleranzen erlauben eine

Abschätzung, ob die Variation der Ergebnisse eines Testes oder zwischen verschiedenen Tests ausreichend groß ist oder nicht, um an der Genauigkeit der Ergeb-nisse zu zweifeln. Eine Toleranztabelle, die für die meisten direkten Saatgut-Gesundheitsprüfungen ange-wendet werden kann, findet sich in Tabelle 5B Teil 1 des Kapitels 5 der ISTA-Vorschriften, oder in Tabelle G1 in Miles (1963).

Berichterstattung der Ergebnisse: Der Ergebnisbericht einer Gesundheitsprüfung von Saatgut sollte den wis-senschaftlichen Name des Krankheitserregers und die verwendete Methode enthalten. Bei Berichterstattung auf einem ISTA-Bericht sind die Ergebnisse unter ‚Wei-tere Untersuchungsergebnisse‘ einzutragen. Der Prüfbericht muss die Anzahl untersuchter Samen angeben. Im Falle eines negativen Ergebnisses (Krankheitser-reger nicht nachgewiesen), müssen die Ergebnisse als „nicht nachgewiesen“ berichtet werden. Im Falle eines positiven Ergebnisses sollte der Prüfbe-richt den Prozentsatz infizierter Samen angeben.

QualitätssicherungKritische Kontrollpunkte (KKP)

Keine.

LiteraturquellenDie folgenden Quellenangaben stammen aus dem ISTA Hand book on Seed Health Testing, Working Sheet No. 31, 1964.

Boerema, G. H. (1964). Phoma herbarum Westend., the type species of the form genus Phoma Sacc. Persoonia, 3, 9–16.

Boerema, G. H. & Van Kesteren, H. A. (1964). The no men-clature of two fungi parasitizing brassica. Persoonia, 3, 17–28.

Miles, S. R. (1963). Hand book of tolerances and of mea-sures of precision for seed testing. Proceedings of the International Seed Testing Association, 28 (3), 525–686.

Validierungsstudien

Internationale Vergleichstests in den Jahren 1959, 1978, 1981, 1983

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4. Lecture : Après 6 jours observer à la loupe grossis-sement ×25, un mycélium lâche, ras, blanc argenté (Fig. 1) et les pycnides en formation du Phoma lingam sur la semence et le substrat. Seconde notation après 11 jours d’incubation et observation des pycnides sur semences infectées et sur buvard près des semences infectées. Les semences à partir desquelles les pycnides de Phoma lingam se sont développés sont notées infec-tées. Comparer avec le témoin positif.

Les pycnides sont relativement grandes, environ 250 µm, avec une ostiole, avec parfois un col allongé (Fig. 2, 3). Un saprophyte ubiquiste Phoma herbarum Westend. se développe également sur semences de Brassica (Fig. 4), mais possède des pycnides plus petits formés en surface du tégument sans ostiole, avec exsu-dat jaune, blanc ou rose mais non pourpre (améthyste).

Méthodes généralesVérification des tolérances : Les tolérances fournissent

des moyens d’évaluer si la variation du résultat dans ou entre les essais est suffisante pour s’assurer de l’exac-titude des résultats. Des tolérances appropriées, qui peuvent être appliquées à la plupart des essais d’analyse sanitaire directs, peuvent être trouvées dans le Tableau 5B Partie 1 du Chapitre 5 des Règles ISTA, ou dans la Tableau G1 du Miles (1963).

Indication des résultats : Le résultat d’un essai de qua-lité sanitaire des semences devrait indiquer le nom scientifique du pathogène détecté et la méthode d’essai employée. Les résultats sont écrits dans « Autres déter-minations » dans le Bulletin ISTA. Le rapport doit indiquer le nombre de semences testées. Dans le cas d’un résultat négatif (pathogène non détec-té), les résultats doivent être rapportés comme « non détecté ». Dans le cas d’un résultat positif, le rapport doit indiquer le pourcentage de semences infectées.

Assurance qualitéPoints critiques de contrôle (CCP)

Aucun.

RéférencesLes références suivantes sont extraites du ISTA Handbook on Seed Health Testing, Working Sheet No. 31, 1964.

Boerema, G. H. (1964). Phoma herbarum Westend., the type species of the form genus Phoma Sacc. Persoonia, 3, 9–16.

Boerema, G. H. & Van Kesteren, H. A. (1964). The no men-clature of two fungi parasitizing brassica. Persoonia, 3, 17–28.

Miles, S. R. (1963). Hand book of tolerances and of mea-sures of precision for seed testing. Proceedings of the International Seed Testing Association, 28 (3), 525–686.

Études de validation

Étudié dans des essais internationaux de comparaison : 1959, 1978, 1981, 1983

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4. Examination: After 6 days examine at ×25 mag-nification for loose growing silver white mycelium (Fig. 1) and pycnidial primordia of Phoma lingam on the seed and substrate. After 11 days make a second examination for pycnidia on infected seeds and on the filter paper near infected seeds. Seeds from which pyc-nidia of Phoma lingam have developed are recorded as infected. Compare with positive control.

Pycnidia are relatively large, about 250 µm, with pa-pilla, sometimes developed as a neck (Figs. 2, 3). The ubiquitous saprophyte Phoma herbarum Westend. occurs also on brassica seed (Fig. 4), but has smaller pycnidia formed superficially on the seed coat, not papillate, with white yellow or pink but not purple (amethyst) exudate.

General methods

Checking tolerances: Tolerances provide a means of as-sessing whether or not the variation in results within or between tests are sufficiently wide as to raise doubts about the accuracy of the results. Suitable tolerances, which can be applied to most direct seed health tests, can be found in Table 5B Part 1 of Chapter 5 of the ISTA Rules, or Table G1 in Miles (1963).

Reporting results: The result of a seed health test should indicate the scientific name of the pathogen detected and the test method used. When reported on an ISTA Certificate, results are entered under ‘Other Determinations’. The report must indicate the number of seeds tested. In the case of a negative result (pathogen not detected), the results must be reported as “not detected”. In the case of a positive result, the report should indi-cate the percentage of infected seeds.

Quality assurance

Critical control points (CCP)

None listed.

References

The following references are extracted from the ISTA Handbook on Seed Health Testing, Working Sheet No. 31, 1964.

Boerema, G. H. (1964). Phoma herbarum Westend., the type species of the form genus Phoma Sacc. Persoonia, 3, 9–16.

Boerema, G. H. & Van Kesteren, H. A. (1964). The no men-clature of two fungi parasitizing brassica. Persoonia, 3, 17–28.

Miles, S. R. (1963). Hand book of tolerances and of mea-sures of precision for seed testing. Proceedings of the International Seed Testing Association, 28 (3), 525–686.

Validation reports

Studied in International Comparative Testing 1959, 1978, 1981, 1983

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Abb. 1. Samen im Filterpapiertest: weißes Myzel und Pyknidien mit Amethyst-farbenen Sporenexudat.

Abb. 2. Infizierte Sämlinge in einem Filterpa-pier-Test zeigen Pyknidien mit amethyst-far-benen Sporen-Exudat.

Abb. 3a, b. Pyknidien auf Saatgut.

Abb. 4. Phoma herbarum auf Saatgut.

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Règles Internationales pour les Essais de Semences Méthodes validées pour analyse sanitaire des semences

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Figure 1. Semence sur buvard montrant le mycélium blanc et les pycnides avec un exsu-dat de couleur pourpre (améthyste).

Figure 2. Plantules infectées sur test buvard montrant des pycnides présentant un exsudat de couleur améthyste.

Figure 3a, b. Pycnides sur semences.

Figure 4. Phoma herbarum sur semences.

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Chapter 7: Validated Seed Health Testing MethodsInternational Rules for Seed Testing

Effective 1 January 2017

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Figure 1. Seed in blotter test showing white mycelium and pycnidia with amethyst col-oured spore exudate.

Figure 2. Infected seedling in a blotter test showing pycnidia with amethyst-coloured spore exudate.

Figure 3a, b. Pycnidia on seed

Figure 4. Phoma herbarum on seed.

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