Folie 1

Doping im Sport Wilhelm Schnzer Institut fr Biochemie DSHS Kln

Folie 2

Doping-Definition der WADA ab 1.1.2004 Artikel 1 Definition von Doping Doping ist definiert als ein ein- oder mehrmaliger Versto gegen die Anti-Doping- Regeln wie sie in Artikel 2.1 bis 2.8 ausgewiesen sind. Artikel 2 Verste gegen die Anti-Doping-Regeln Die folgenden Artikel stellen Verste gegen die Anti-Doping-Regeln dar: 2.1 Die Anwesenheit einer verbotenen Substanz, deren Metaboliten oder eines Markers in einer dem Athleten entnommenen Probe (z.B.Urinprobe des Athleten) 2.2 Die Anwendung bzw. der Versuch der Anwendung einer verbotenen Substanz oder einer verbotenen Methode 2.3 Verweigerung oder Nichterfllung (ohne ausreichende Begrndung) der Abgabe einer Probe nach Aufforderung zur Dopingkontrolle entsprechend der Authorisierung durch die Anti-Doping-Regeln 2.4 Verhinderung der Verfgbarkeit bei Kontrollen auerhalb des Wettkampfes einschlielich des Unterlassens der Aufenthaltsmeldepflicht 2.5 Betrug oder der Versuch eines Betruges bei der Dopingkontrolle 2.6 Besitz von verbotenen Substanzen oder verbotenen Methoden 2.7 Weitergabe jeglicher verbotenen Substanz oder verbotenen Methode 2.8 Anstiftung, Mitbeteiligung, Untersttzung oder Ermutigung zur Anwendung oder zum Versuch einer Anwendung einer verbotenen Substanz oder verbotenen Methode oder jegliche Art der Beteiligung an einem Versto gegen die Anti-Doping Regeln

Folie 3

WADA-Liste ab 1.1.2005 Verbotene Substanzen whrend des Wettkampf S6. Stimulanzien S7. Narkotika S8. Cannabinoide S9. Glucocorticosteroids Verbotene Substanzen in bestimmten Sportarten Alkohol Beta-Blocker Spezifizierte Substanzen Substanzen, die aufgrund der leichten Verfgbarkeit zu verminderten Strafen fhren z.B. Ephedrine, Cannabinoide, Glucocorticoide, Beta-Blocker, Alkohol Verbotene Substanzen und Methoden whrend u. auerhalb des Wettkampfes S1. Anabole Wirkstoffe Anabol Androgene Steroide (AAS) a) exogene AAS b) endogene AAS Andere anabole Wirkstoffe S2. Peptidhormone S3. 2-Agonisten S4. Substanzen mit anti-estrogener Wirkung S5. Diuretika u.a. Maskierende Substanzen M1. Verbesserung des Sauerstofftransports M2. Manipulationen M3. Gendoping WADA- Reglement

Folie 4

Verbotene Wirkstoffgruppe: Stimulanzien

Folie 5

Verbotene Wirkstoffgruppen A. Stimulantien B. Narkotika (opioide Analgetika) C. Anabole Wirkstoffe D. Diuretika E. Peptidhormone und Analoge Anabole Wirkstoffe Anabole Steroide Andere anabole Wirkstoffe 1. Exogene Anabolika z.B.Clenbuterol 2. Endogene Steroide z.B. Testosteron

Folie 6

Anabol Androgene Steroidhormone (Beispiele) 1) Exogene Steroide (Anabolika) BoldenonMethyltestosteron ClostebolNandrolon Chlordehydro- Norandrostendion, -diol methyltestosteron Oxymetholon MestanolonStanozolol MetandienonTrenbolon und verwandte Verbindungen 2) Endogene Steroide AndrostendionDihydrotestosteron AndrostendiolTestosteron Dehydroepiandrosteron (DHEA) und verwandte Verbindungen

Folie 7

Folie 8

Folie 9

Verfahren bei der Dopingkontrolle

Folie 10

Grenzwerte (WADA-Regel 1.1.2005) SUMMARY OF URINARY CONCENTRATIONS ABOVE WHICH IOC ACCREDITED LABORATORIES MUST REPORT FINDINGS FOR SPECIFIC SUBSTANCES Carboxy-THC> 15 ng / ml Cathin> 5 g / ml Ephedrin> 10 g / ml Epitestosteron > 200 ng / ml Methylephedrin> 10 g / ml Morphin> 1 g / ml 19-Norandrosteron> 2 ng / ml in males > 2 ng / ml in females Salbutamol as anabolic agent> 1000 ng / ml TestosteronT/E ratio > 4 (6) Stimulanzien Narkotika Anabole Wirkstoffe Cannabis

Folie 11

Adrenalin und Stimulanzien vom Amphetamintyp

Folie 12

aus Lllmann, Mohr, Ziegler: Taschenatlas der Pharmakologie, Thieme-Verlag, Suttgart-New York 1994

Folie 13

Folie 14

1949F.A. Italien Radfahrer Amphetamin 1959B. Italien Radfahrer Amphetamin, Coffein, Hitzeschlag 1960Kurt E.Jensen OS Rom Amphetamin, Ronicol, Dnemark Radfahrer Hitze, Dehydrierung 1967Simpson, Tom Tour der FranceAmphetamin, Hitze, England Mount Ventous Dehydrierung 1968Mottin, Yves Radfahrer Amphetamin 1968Quadri, Louis Fauballer Amphetamin 1968Elze, Jupp BoxerMethamphetamin, Deutschland Gehirnblutumg 1983Weier BodybuilderAnabole Steroide USA Leberkarzinom Todesflle im Zusammenhang mit Doping

Folie 15

2 Amphetamin 11 Interner Standard 12 Coffein Referenz Standard Negative Urinprobe Positive Urinprobe GC-FID-Analyse Gaschromato- graphie Flammen- ionisations- detektion

Folie 16

EI Massenspektrum von Amphetamin M + 135

Folie 17

Anabolika: Anabol Androgene Steroide (AAS)

Folie 18

Am meisten missbrauchte Anabolika

Folie 19

Gestrinon Tetrahydrogestrinon Disigner-Steroid O OH CCH H 2 C 2 Gestrinon O OH CH 2 CH 3 H 2 C 2 THG H 2 /Pd Doping-Skandal in den USA, Oktober 2003

Folie 20

Metabolismus Metandienon

Folie 21

Massenspektrum eines Metandienonmetaboliten

Folie 22

Unterscheidung zwischen Steroidhormonen

Folie 23

Testosteron IOC-Regel: Testosteron Verbot T/E >6 Konzentration cT / cEpi = ca. 1 Epitestosteron

Folie 24

IOC-Regel: Testosteron Verbot Konzentration Testosteron Epitestosteron Testosteron cT / cEpi > 6 positiv

Folie 25

GC/MS-Bestimmung von Testosteron, Derivatisierung und Massenspektrum EI-Massenspektrum

Folie 26

GC/MS- Bestimmung Testosteron Testosteron/ Epitestosteron aus Urin (T/E-Quotient) T/E > 6

Folie 27

Individuelle Schwankungen des T/E-Quotienten

Folie 28

13 C/ 12 C-Isotopenverhltnisse in der Natur Abweichung in Referenzgas CO 2

Folie 29

13 C/ 12 C-Isotopenverhltnisse Synthetische anabol androgene Steroidhormone wie Testosteron und Nandrolon sowie deren Vorhormone -28 bis -32 Urinr ausgeschiedene Steroidhormonmetaboliten Europer Amerikaner und (Ernhrung auf Maisbasis) -24 bis -26 -18 bis -22

Folie 30

13 C/ 12 C-Bestimmung von Testosteron nach oraler Gabe von 40 mg Andriol R Abweichung in

Folie 31

nderung der Isotopenwerte nach Testosteron oder Androstendion Anwendung

Folie 32

Isotopenverhltnisse von Pregnandiol und Etiocholanolon + Androsteron

Folie 33

Testosteron und Prohormone

Folie 34

Hormone als Nahrungsergnzungsmittel Vermarktung in Amerika, frei verkuflich Umfangreiche Werbung im Internet In Europa nicht erlaubt (Arzneimittelgesetz) Folgende Steroidhormone (sogenannte Vorlufer) Dehydroepiandrosteron (DHEA) 4-Androstendion 5-Androstendion 4-Androstendiol 5-Androstendiol 19-Nor-4-androstendion 19-Nor-5-androstendion 19-Nor-4-androstendiol 19-Nor-5-androstendiol Nach der Dopingregel: Verboten (anabole Steroidhormone)

Folie 35

z.B. Verschleppung von Substanzen in einem Produktionsprozess aufgrund ungengender Reinigung der Produktionsmaschinen, charakteisiert durch eine nicht homogene Verteilung der Substanzen in den Endprodukten z.B. 1 Tablette Norandrostenedion 100 mg 100.000 g Norandrostendion 1 g als Verunreinigung kann in einem anderen Prparat zu einem positiven Befund fhren !!! Crosskontamination

Folie 36

Kontaminiertes Creatinprodukt in Deutschland Deklarierter Inhalt : Creatin + Dextrose Nicht deklarierte Prohormone: 4-Norandrostendion 4,4 g/Tablette 4-Norandrostendiol 10,9 g/Tablette 2 Stunden nach Anwendung von 2 Tabletten: im Urin Norandrosteron: 19,8 ng/ml

Folie 37

5-Norandrostendiol 4-Norandro- stendiol DHEA 4-Norandrostendion 4-Androstendiol 5-Androstendiol 4-Androstendion Testosteron GC/MS-Analyse von Nahrungsergnzungsmitteln z.B. Kontaminationen in einem Kreatinprodukt Das hier untersuchte Produkt, Kreatintabletten einer amerikanischen Firma, ist verunreinigt mit verbotenen Prohormonen und mit Testosteron (insgesamt 8 Steroide). Diese Steroide sind auf dem Prparat nicht ausgewiesen und knnen zu positiven Dopingbefunden fhren. m/z 330 m/z 416 m/z 430 m/z 432 m/z 434

Folie 38

Positiver Urintest mit Norandrosteron 10 ng/ml Nandrolonester Depotform Prohormon 19-Norsteroid Kontaminiertes Product German Sports University Cologne Urinre Norandrosteron-Ausscheidung nach verschiedender Applikation von 19-Norsteroiden

Folie 39

Wachstumshormon (Somatotropin, HGH human growth hormone) *Peptidhormon aus 191 Aminosuren Molekulargewicht 21.500 *Wirkung im gesamten Organismus *Seit Ende der 80er Jahre als gentechnisches Produkt auf dem Markt * Therapeutische Anwendung: Zwergwuchs bei Kindern Wachstumshormonmangel bei Erwachsenen * Mibrauch im Sport bisher keine Studie, die eine positive Wirkung bei Leistungssportlern zeigte *Schwarzmarkthandel * Nebenwirkungen: z.B. Vergrerung der inneren Organe wie Herz und Leber

Folie 40

Wachstumshormon (Physiologie)

Folie 41

Wachstumshormon (Somatotropin, HGH human growth hormone) Peptidhormone Wachstumshormonmangel beim Erwachsenen Ursache: Tumor in der Hirnanhangdrse, bzw. dessen Operation oder Bestrahlung Wachstumshormonmangel in der Kindheit bleibt oft auch im Erwachsenenalter bestehen. vermehrtes Schlafbedrfnis verminderte Vitalitt/Energie vermindertes Wohlbefinden trockene, leicht fettige Haut erhhtes Risiko fr Herzkreislauferkrankungen verminderte Muskelmasse erhhter Anteil an Krperfett reduzierte Knochendichte

Folie 42

Wachstumshormon mangel beim Erwachsenen Fettstoffwechsel STH normalisiert den Fettgehalt des Krpers, STH verbessert das Verhltnis von gutem (HDL) zu schlechtem (LDL) Cholesterin Fettstoffwechsel STH normalisiert den Fettgehalt des Krpers, STH verbessert das Verhltnis von gutem (HDL) zu schlechtem (LDL) Cholesterin Fettstoffwechsel Eiweihaushalt STH schleust mehr Eiweibausteine in die Zelle ein. STD normalisiert die Muskelbildung Eiweihaushalt STH schleust mehr Eiweibausteine in die Zelle ein. STD normalisiert die Muskelbildung Eiweihaushalt Psyche STH steigert den Antrieb STD normalisiert das psychische Wohlbefinden Psyche STH steigert den Antrieb STD normalisiert das psychische Wohlbefinden Psyche

Folie 43

Wachstumshormon mangel beim Erwachsenen Psyche STH normalisiert die Herzmuskelmasse und Wanddicke und verbessert dadurch die Pumpleistung des Herzens Psyche STH normalisiert die Herzmuskelmasse und Wanddicke und verbessert dadurch die Pumpleistung des Herzens Herzfunktion Knochenstoffwechsel STH steigert die Knochendichte Knochenstoffwechsel STH steigert die Knochendichte Knochenstoffwechsel STH normalisiert den Wasserhaushalt Wasserhaushalt

Folie 44

HGH im Serum nach krperlicher Belastung nach Kabouris M., Diplomarbeit Institut fr Biochemie DSHS, 1994

Folie 45

Wachstumshormon - Nachweis Wachstumshormon- Nachweis nach Strasburger et al. Ref.: Wu Z, Bidlingmaier M, Dall R, Strasburger CJ: Detection of doping with human growth hormone. Lancet, 353 (1999) 895.

Folie 46

Folie 47

Wirkung von Epo (Erythropoietin ) Ekblom and Berglund (J.Intern.Med. 229, 1991, p125) maximal exercise Work time, sec 500 to 583 VO 2 max, l/min 4,52 to 4,88

Folie 48

Blutbestimmung Hmatokritmessung UCI UCI - Grenzwerte fr Hmatokrit keine Dopingkontrollmanahme Mnner 50% Frauen 47% (Messunsicherheit 1%) Hmatokrit Referenzwerte Hmatokrit bei Normalpersonen Mnner 47 % (0.40 - 0.54) Frauen 42 % (0.37 - 0.47 ) Methode ist wissenschaftich nicht haltbar zum Dopingnachweis

Folie 49

Folie 50

Peptidhormone Erythropoietin (EPO) Nachweis IEF PATTERN 5.21 4.42 3.77 pH _ + P N N P E EPO Urintest Lasne F, de Ceaurriz J

Folie 51

Olympische Winterspiele 2002 Salt Lake City 3 Athleten werden der Anwendung eines neuen EPO-Prparates - Darbepoetin (NESP) berfhrt Produktinformation der Firma Ambgen zu Darbepoetin (Aranesp) www.ambgen.com Peptidhormone Erythropoietin (EPO) Nachweis

Folie 52

IEF PATTERN 5.21 4.42 3.77 pH _ + P N N P E EPO Urintest Lasne F, de Ceaurriz J Darbepoetin NESP E ca.160 pg