Testprinzip: einstufiger Sandwich-Assay

ElecsysT LHTestbeschreibungElektrochemilumineszenz-Immunoassay (ECLIA) zur quantitativen In-vitro-Bestimmung des luteinisierenden Hormons in Humanserum und -plasma

IndikationZusammen mit FSH (Follikel-stimulierendes Hormon) regelt und stimuliert LH (luteinisierendes Hormon) synergistisch das Wachstum und die Funktion der Gonaden (Ovarien und Hoden).1 LH gehört zur Familie der Gonadotropine, die innerhalb des Kontrollsystems zwischen Hypothalamus, Hypophysenvorderlappen und Ovar zur Steuerung des Menstruationszyklus dienen.2,3 Bei Frauen sind die LH-Konzentrationen in der Zyklusmitte stark erhöht, was den Eisprung und die Bildung des Corpus luteum auslöst. Bei Männern stimuliert LH die Testosteron-Produktion. Die Bestimmung der LH-Konzentration dient der Aufklärung von Funktionsstörungen innerhalb der Achse Hypothalamus-Hypophyse-Gonaden. In Verbindung mit FSH wird LH auch zur Untersuchung kongenitaler Erkrankungen mit chromosomalen Aberrationen, polyzystischer Ovarien, zur Ursachenabklärung der Amenorrhoe und dem klimakterischen Syndrom, eingesetzt.1,3,5 Bei Männern wird LH bei Verdacht auf Insuffizienz der Leydig-Zellen bestimmt.

Schritt 1 (9 Minuten):20 µL der Patientenprobe werden mit biotiny-lierten, monoklonalen LH-spezifischen Anti-körpern und mit ruthenylierten monoklonalen LH-spezifischen Antikörpern gegen verschiede-ne LH-Epitope inkubiert. Es bilden sich Sand-wich-Komplexe aus LH mit jeweils einem bio-tinylierten und einem ruthenylierten Antikörper.

Schritt 2 (9 Minuten):Nach Zugabe der Streptavidin-beschichteten Mikropartikel wird der Sandwich-Komplex über die Wechselwirkung von Biotin mit Streptavidin an die Festphase gebunden.

Schritt 3 (Messung):Das Reaktionsgemisch wird in die Messzelle überführt, wo die Mikropartikel auf der Ober-fläche der Elektrode magnetisch fixiert werden. Anschließend werden die ungebundenen Sub-stanzen entfernt. Durch Anlegen einer Span-nung wird die Lumineszenzreaktion erzeugt. Dabei wird Licht emittiert und über einen Photomultiplier gemessen. Die Signalstärke verhält sich proportional zur Analytkonzentra-tion in der Probe.

Biotinylierter monoklonaler Antikörper gegen humanes LH

Ruthenylierter monoklonaler Antikörper gegen humanes LH

LH in der Probe

Streptavidin-beschichteter Mikropartikel

9 Min. 9 Min. 9 minRu

Ru

RuMessung

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ElecsysT LH Test-CharakteristikaTestdauer 18 MinutenTestprinzip einstufiger Sandwich-AssayKalibration 2-PunktProbenmaterial Serum

Li-, Na-, NH4+-Heparin, K3-EDTA- und

Natriumfluorid/Kaliumoxalat-PlasmaProbenvolumen 20 μLNachweisgrenze < 0,100 mIU/mLMessbereich 0,100–200 mIU/mLRückführbarkeit Diese Methode wurde am 2. International Standard des

“National Institute for Biological Standards and Control (NIBSC)” Code 80/552 standardisiert

Zwischenpräzision (CLSI)(Reproduzierbarkeit)

Elecsys® 2010 Analyzer, cobas e 411 Analyzer: 1,9 – 5,2 % (0,54 – 50,7 mIU/mL)

MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 Modul, cobas e 602 Modul: 1,6 – 2,2 % (5,81 – 159 mIU/mL)

Referenzbereich N 50. Perzentile mIU/mL

5. – 95. Perzentile mIU/mL

Männer 322 4,0 1,7 – 8,6FrauenFollikelphase 316 5,9 2,4 – 12,6Ovulationsphase 56 30,8 14,0 – 95,6Lutealphase 280 4,3 1,0 – 11,4Postmenopause 132 29,1 7,7 – 58,5

BestellinformationenProdukt Inhalt BestellnummerElecsys® LH 100 Tests 11 732 234 122LH CalSet II 4 × 1 mL 03 561 097 190PreciControl Universal (2 Level) je 2 × 3 mL 11 731 416 190

Literaturverweise1 Johnson, M.R., Carter, G., Grint, C., Lightman, S.L. (1983). Relationship between ovarian steroids, gonadotropin and relaxin during the menstrual cycle.

Acta Endocrinol 129, 121 – 125.2 Beastall, G.H., Ferguson, K.M., O’Reilly, D.S.J., Seth, J., Sheridan, B. (1987). Assays for follicle stimulating hormone and luteinizing hormone: guidelines for the provision

of a clinical biochemistry service. Ann Clin Biochem, 24, 246 – 262.3 Broekmans, F.J., Soules, M.R., Fauser, B.C. (2009). Ovarian aging: mechanisms and clinical consequences. Endocr Rev 30, 465 – 4934 Ciccone, N.A., Kaiser, U.B. (2009). The biology of gonadotroph regulation. Curr Opin Endocrinol Diabetes Obes 16, 321 – 327.5 Scott, M.G., Ladenson, J.H., Green, E.D., Gast, M.J. (1989). Hormonal evaluation of female infertility and reproductive disorders. Clin Chem 35, 620 – 630.