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MEDICAL

EDITORIAL

Geschätzte Leserinnen und Leser

Im Juli 2011 habe ich von Roland Bühlmann die operative Leitung von BÜHLMANN als CEO übernommen und freue mich, die VOX für Sie zeichnen zu dürfen.

Die Konstanz unserer Leistungen bei Ihnen, unseren Kunden, die hohe Produkt- und Servicequalität und ein überdurchschnittlicher After-Sales Service bleiben konstant. Aber auch mit innovativen Produkten und Lösungen wollen wir für Sie da sein. Neu bieten wir beispielsweise alle notwendigen Instrumente für Ihr molekulardiagnosti-sches Labor zu sehr attraktiven Konditionen an: TapeStation®, SeePrep12™ und den SeeAmp™ Thermocycler; z.B. für den „best in class“ Seeplex® RV15 oder den Seeplex® Diarrhea Test. Beide Assays sind in Schweizer Labors bereits erfolgreich eingeführt.

Mit dem Flow CAST® highsens lancieren wir eine Weltneuheit mit der einmaligen Kombination von CD63 / CD203c in einem CE-markierten Basophilen Aktivierungs-test. Damit schliessen wir eine Lücke für die Diagnostik von Medikamentenaller-gien.

INHALT DIESER AUSGABE

BÜHLMANN rüstet Ihr molekulardia-gnostisches Labor aus

Vergleich Seeplex® RV15 Test

Veranstaltungen

Publikation Seeplex® Diarrhea Test

Erfolgreiche Seeplex® Diarrhea-V Evaluation bei Bioanalytica

Neu: Flow CAST® highsens

Neu: Vitamin B6 enzymatischer Test

Neue Evaluation Quantum Blue® Calprotectin Schnelltest

ACE Aktivität in Liquor Proben

Neuer BRAF (V600E/K/D) Test

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Nr. 4, November 2011

Ebenfalls neu und einzigartig ist der ACE high sensitive für die Diagnose von Neurosarkoidose. Für die Quan-tum Blue® Linie schliesslich erschei-nen jetzt die ersten klinischen Eva-luationsstudien mit hervorragenden Leistungsdaten für dieses System.

Mit besten Grüssen

Thomas Hafen CEO

BÜHLMANN RÜSTET IHR MOLE-KULARDIAGNOSTISCHES LABOR AUS UND DIES ZU ÄUSSERST ATTRAKTIVEN PREISEN

Von der Probenvorbereitung (DNA/RNA Extraktion) mit dem SeePrep12™ über die Multiplex PCR mit dem SeeAmp™ Thermocycler bieten wir Ihnen nebst den Kits auch alle benötigten Instrumente zu äusserst attraktiven Preisen an.

Für die Anyplex™ und Magicplex™ real-time PCR Tests stehen zwei hochwertige real-time PCR Systeme zur Auswahl: das CE-IVD markierte BIO-RAD CFX96 System und das ABI7500 System von Life Techno-logies.

Der SeePrep12™ ist für die automatisierte Extraktion von 1 bis 12 Proben geeignet und kann mit den entsprechenden Kits für Blut, Serum, Sputum, Stuhl, Abstriche, Gewebe und für Urin-Proben verwendet werden. Als Besonderheit sind Seegene und Molzym dieses Jahr eine Partnerschaft eingegangen, was uns erlaubt, Ihnen eine optimale Lösung für die automati-sierte molekulardiagnostische Sepsis-Dia-gnose zu bieten. So können wir Ihnen den weltweit ersten automatisierten Multiplex Real-Time PCR Test anbieten, der simultan auf Bakterien, Pilze und Antibiotikaresis-tenzen screent und dies in 3 Stunden. Der Magicplex™ Sepsis Test detektiert gleich-zeitig mehr als 90 Sepsis-verursachende Pathogene und kann so 73 grampositive Bakterien, 12 gramnegative Bakterien, 6 Pilze und 3 Antibiotikaresistenzgene un-terscheiden. Die Anreicherung der mikro-biellen DNA basiert auf der MolYsis Tech-nologie von Molzym und ermöglicht eine bis zu 40‘000-fache DNA Anreicherung im Vergleich zu herkömmlichen Technolo-gien. Dies verleiht dem Magicplex™ Sepsis Test zusammen mit der READ™-Technolo-gie eine einzigartige Sensitivität.

Eine weitere Besonderheit ist die auto-matisierte Stuhl-Extraktion mit dem See-Prep12™ System unter Verwendung des SeePrep12™ Stool DNA Kits. Lesen Sie dazu bitte auch den Artikel Neue Publikation über den Seeplex® Diarrhea Test in dieser VOX BÜHLMANN. Möchten auch Sie Ihr mo-lekulardiagnostisches Labor weiter aus-rüsten? Dann melden Sie sich bitte bei uns. Wir beraten Sie gerne.

2. – 4. Nov. 2011 SGKC/SSCC 2011, Zürich, Stand 10

8. - 10. Nov. 2011 JIB 2011, Paris, Stand D93

10. - 11. Nov. 2011 SGPath/SSPath 2011, Luzern

16. – 19. Nov. 2011 MEDICA 2011, Düsseldorf, Stand 1F29

15. Dezember 2011 BÜHLMANN MDx Kundenseminar, Bern

VERGLEICH DES SEEPLEX® RV15 TESTS MIT ANDEREN KOMMER-ZIELL ERHÄLTLICHEN MULTIPLEX RT-PCR PRODUKTEN

Das Journal of Clinical Microbiology and Infection publizierte im März eine Studie von Farhad Gharabaghi et al. (Depart-ment of Paediatric Laboratory Medicine, Hospital for Sick Children, Toronto), wel-che 4 kommerziell erhältliche Multiplex RT-PCR Produkte von Seegene (Seeplex® RV15 ACE Detection Kit), Qiagen (Resplex II v2.0) und Luminex Molecular Dia-gnostics (xTAG® RVP und xTAG® RVP Fast) für den Nachweis von Virenstämmen und Subtypen aus 750 klinischen Proben von

Kindern und Jugendlichen bis 17 Jahren vergleicht:

Der Einsatz von Multiplex RT-PCR Pro-dukten steigert die Sensitivität für den Nachweis von respiratorischen Viren um 74% gegenüber dem Antikörperfluores-zenztest (DFA), unter Beibehaltung einer exzellenten Spezifität. Die Positivrate konn-te von 38% auf 67% erhöht werden.

Das Seeplex® RV15 ACE Detection Kit zeigte mit 96% mit Abstand die höchste mitt-lere Sensitivität, gefolgt von Resplex II v2.0 und xTAG® RVP mit 87% sowie xTAG®

RVP Fast mit 79% (Tabelle). Die Spezifität war mit 98-100% für alle Tests sehr gut. Koinfektionen konnten bei 11% der Ge-samtproben bzw. bei 16% der positiven Proben nachgewiesen werden.

Respiratorischer Virus Seeplex® RV15 Resplex II v2.0 xTAG® RVP xTAG® RVP Fast

INFA 97% 97% 98% 94%

INFB 100% 100% 100% 65%

PIV 98% 83% 85% 66%

PIV1 93% 87% 71% 47%

PIV2 100% 89% 100% 78%

PIV3 86% 100% 71% 43%

PIV4 100% 60% 100% 100%

hMPV 97% 82% 97% 92%

RSV 100% 84% 88% 92%

RSVA 100% 90% 86% 93%

RSVB 100% 79% 98% 95%

ADV 100% 71% 86% 52%

BoV 100% 75% - 100%

CoV OC43/HKU1 100% 93% 48% 59%

CoV 229E/NL63 100% 100% 88% 88%

Enterovirus/Rhinovirus 72% 97% 94% 98%

Mittelwert 96% 87% 87% 79%

VERANSTALTUNGEN

Wir laden Sie herzlich ein, uns während der folgenden Events an unserem Stand zu besuchen (weitere Informationen finden Sie auf www.buhlmannlabs.ch):

NEUE PUBLIKATION ÜBER DEN SEEPLEX® DIARRHEA TEST

Die häufigste Ursache einer Gastroente-ritis ist eine Infektion durch Viren (wie Rota-, Adeno-, Noroviren) oder Bakterien (wie Salmonellen, Campylobacter, Shi-gellen, Yersinien, Clostridium difficile, Vibrio cholerae). Der Seeplex® Diarrhea Test von Seegene erlaubt den Viren- und Bakteriennachweis aus Stuhlproben.

Im Journal of Clinical Microbiology wurde diesen September von Dr. Rachel R. Hig-gins (Ontario Agency for Health Protection and Promotion) und Kollegen in einer Pu-blikation eine retrospektive Studie veröf-fentlicht, welche den Virennachweis aus 200 klinischen Proben - davon 177 Stuhl-proben - mit dem Seeplex® Diarrhea ACE Detection Kit untersucht und mit Elektro-nenmikroskopie- bzw. Real-Time RT-PCR Resultaten vergleicht.

Das Seeplex® Diarrhea ACE Detection Kit (Seegene Inc.) ist ein kommerziell er-hältliches, CE-markiertes Multiplex RT-PCR Produkt, welches gleichzeitig 5 virale Targets inklusive Adenoviren (Gruppe F Serotyp 40 und 41), Rotaviren, Noroviren (GI und GII) und Astroviren nachweist. Zusätzlich ist beim Seeplex® Diarrhea Test eine interne Kontrolle integriert, welche den Nachweis von PCR Inhibitoren ver-einfacht und falsch-negative Resultate reduziert.

Resultate: Die Sensitivität / Spezifität er-gab für Adenoviren 97% / 99.4%, für Rotaviren 100% / 100% und für Norovi-ren GI und GII je 100% / 100%. Koinfek- tionen konnten bei 12 Stuhlproben (6.8%) nachgewiesen werden. Die Analysenzeit beträgt pro Target für 96 Proben 1.8 Stun-den.

Für Rachel R. Higgins ist der Seeplex® Diarrhea Test ein schneller, sensitiver, spezifischer und zuverlässiger Test zum Virennachweis. Er kann effizient im kli-nisch mikrobiologischen Umfeld eines Referenzlabors und jedes anderen Labors zur Verbesserung der Nachweismethoden implementiert werden. Higgins et al. seh-en aber auch ökonomische Vorteile ge-genüber Elektronenmikroskopie und/oder „home-brew“ Real-Time RT-PCR Tests.

Zusätzlich zu den oben erwähnten Viren kann das Seeplex® Diarrhea ACE Detection Kit auch die folgenden Bakterien nach-weisen: Salmonella spp. (S. bongori und S. enterica), Shigella spp. (S. flexneri, S. boydii, S. sonnei und S. dysenteriae), Vi-brio spp. (V. cholerae, V.parahamolyticus und V. vulnificus), Campylobacter spp. (C. jejuni und C. coli), Clostridium difficile

Toxin B, Clostridium perfringens, Yersinia enterocolitica, Aeromonas spp. (A. sal-monicida, A. sobria, A. bivalvium und A. hydrophila), E. coli O157:H7 und Verocy-totoxin-produzierende E. coli (VTEC).

ERFOLGREICHE SEEPLEX®

DIARRHEA-V EVALUATION BEI BIOANALYTICA, LUZERN

Das Labor Bioanalytica in Luzern hat diesen Sommer eine umfangreiche Eva-luation des Seeplex® Diarrhea-V Assays durchgeführt mit dem Ziel, die Qualität des Assays für den Einsatz in der täg-lichen Routine zu überprüfen und das Assay-Protoll signifikant zu verkürzen.

Der Fokus lag auf der Detektion von Noro-virus GI und GII, wobei der Seeplex® Di-arrhea-V Assay zusätzlich Rotavirus, Ade-novirus und Astrovirus detektiert. Zudem sind auch zwei Bakterien-Panels verfüg-bar, welche 9 verschiedene Bakterien und 1 bakterielles Toxin beinhalten.

Da die Analysendauer bei Verdacht auf Norovirus möglichst kurz sein sollte, wur-de auch die Möglichkeit einer Verkürzung des PCR-Protokolls untersucht.

Durch die schrittweise Reduktion der An-nealing-Time von ursprünglich 1.5 Min. pro Zyklus auf schliesslich 0.5 Min. pro Zyklus resp. der Elongation-Time von 1.5 Min. auf 1 Min. pro Zyklus, konnte die Ge-samtanalysendauer von rund 6 Stunden auf etwa 4 Stunden reduziert werden. Diese kürzere Analysendauer beinhaltet auch eine Reduktion der reversen Transk-ription (siehe Poster in der Beilage). In Kürze wird es eine one-step Version dieses Assays geben.

Das Labor Bioanalytica setzt nun seit Au-

NEU: FLOW CAST® HIGHSENS

Ein einzigartiger, routinefreundlicher, zellulärer Allergietest, der eine spezi-fische Diagnostik für die allergischen Reaktionen des Soforttyps bietet.

Allergien können lebensbedrohend sein, vor allem für Patienten mit Medikamen-ten-, Insekten- und Lebensmittelaller-gien. Der neue Basophilen Aktivierungs-test von BÜHLMANN Laboratories AG bietet eine einzigartige Lösung: Flow CAST® high-sens. Dieser auf zwei Farben basierende flowzytometrische Test selektioniert die Basophilen mittels CCR3-PE und misst die Basophilenaktivierung nicht nur anhand eines, sondern zwei Aktivierungsmarker: CD63-CD203c-PE-DY647. Dadurch wird eine bessere Sensibilität bei Medikamen-tenallergenen erreicht. Dies unterstützt die Diagnose, wo spezifische IgE einfach nicht genug sind.

Durch die Wahl der Flow CAST® Tests wird den Patienten die einzige in vivo ähnliche Allergiediagnostik geboten, ohne jegliches Risiko einer erneuten Sensibilisierung oder eines anaphylaktischen Schocks. Die Flow CAST® Tests werden in Kombination mit über 150 BÜHLMANN Allergenen an-geboten.

gust 2011 den Seeplex® Diarrhea Assay zur vollen Zufriedenheit in der täglichen Routine ein. Des Weiteren haben Prof. M. Altwegg und Frau M. Hug den RV5 Assay von Seeplex® erfolgreich evaluiert und werden diesen in Kürze ebenfalls in der Routine einsetzen. Für eine erweiterte Diagnostik respiratorischer Erreger stehen zudem der Seeplex® RV15 OneStep (Viren) und der Pneumobacter Assay (Bakterien) zur Verfügung.

Vitamin B6 enzymatischer Test

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HPLC (nM)

enzy

mat

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M)

Der direkte enzymatische Test ermöglicht die quantitative Bestimmung von Vitamin B6 in humanem Plasma ohne aufwendige Probenaufbereitung in weniger als einer Stunde.

Neu

BÜHLMANN Laboratories AG Phone +41 61 487 12 12Baselstrasse 55 Fax +41 61 487 12 34CH–4124 Schönenbuch/Basel info@buhlmannlabs.chSwitzerland www.buhlmannlabs.ch

LATEST NEWS

BRAF (V600E/K/D) neuer Test von EntroGen auf Ih-rem real-time PCR Gerät:

EntroGen hat ei-nen neuen BRAF Test auf den Markt gebracht, der ne-ben der V600E-Mutation auch die beiden Mutationen V600K und V600D detektiert, welche wichtig sind im Zusammenhang mit schwarzem Hautkrebs.

Nebst BRAF kön-nen wir Ihnen von EntroGen auch einen KRAS-Test anbieten, der 11 Mutationen de-tektiert sowie einen EGFR-Test, der 29 Mutatio-nen detektiert.

ACE AKTIVITÄT IN LIQUOR PROBEN

Die quantitative Aktivitätsbestimmung des Angiotensin konvertierenden Enzyms (ACE) in Liquor Proben verlangt eine be-sondere Sensitivität des Messsystems.

Die Werte von gesunden Probanden lie-gen zumeist unterhalb zwei Units pro Liter. Die Nachweisgrenze von herkömm-lichen Systemen für die Bestimmung im Serum ist aber bei ca. 10 U/L und reicht somit nicht aus.

BÜHLMANN bietet seit Anfang 2011 einen eigenständigen, CE markierten IVD Test an, welcher es erlaubt, ACE Aktivitäten im Liquor wie auch in Serum bis zu einer Nachweisgrenze von 1.5 U/L reproduzier-bar zu quantifizieren. Der Test wird in Mi-krotiterplatten durchgeführt und benö- tigt einen Reader mit kinetischer Funkti-on. Alternativ kann der Test auch auf klin. chem. Analysegeräten appliziert werden, welche eine ausreichende Flexibilität aufweisen.

Der Test erlaubt es, zwischen der Akti-vität von gesunden Probanden und der erhöhten Aktivität von Neurosarcoidose Patienten zu unterscheiden. Durch die quantitative Bestimmung ist es ausser-dem möglich, ein Therapiemonitoring bei betroffenen Patienten durchzuführen.

Sarcoidose ist eine granulomatöse Multi-systemerkrankung mit unbekannter Ur-sache. Zumeist ist die Lunge betroffen, aber auch Augen und Integument (Haut) können betroffen sein. In ca. 5% aller Sarcoidosefälle kann auch das Nervenge-webe befallen sein. Eine eindeutige Dia-gnose ist schwierig, da die klinische Prä-sentation und der Krankheitsverlauf der Neurosarcoidose äusserst vielfältig sind. Um eine gesicherte Diagnose der Neuro-sarcoidose zu erhalten, braucht es eine abschliessende histologische Bestätigung aus dem betroffenen Nervengewebe. Da-bei erleichtert der Labortest die Entschei-dung, ob eine Biopsie durchgeführt wer-den soll.

Der ACE high sensitive (Art. Nr.: KK-ACF) von BÜHLMANN enthält die benötigten Reagenzien für 130 Tests, wie auch den entsprechenden Kalibrator (10 U/L) und Kontrollen (Normal und High).

NEUE EVALUATION BESTÄTIGT NÜTZLICHKEIT DES QUANTUM BLUE® CALPROTECTIN SCHNELL-TESTS

Eine brandneue Evaluation aus Grossbri-tannien bestätigt die Performance und Nützlichkeit des Quantum Blue® Schnell-tests zur Bestimmung des faecalen Cal-protectins (Wassell et al. 2011 *)).

In einer Versuchsreihe mit 47 Patienten-proben wurde im Vergleich mit dem Cal-protectin ELISA festgestellt, dass der BÜHL-MANN Schnelltest vergleichbare klinische Aussagen machen kann wie der ELISA und dass dadurch die IBD (chronisch entzünd-liche Darmerkrankung) Patienten sehr gut von denen mit Reizdarm (IBS) unterschie-den werden können. Dies alles gelingt mit einem sehr einfach zu handhabenden As-say, der in etwa 20 Minuten das Resultat liefern kann. Die technische Performance des Quantum Blue® entspricht den An-gaben von BÜHLMANN und der Test ist im angegebenen Messbereich linear.

Die Schlussfolgerung von Wassell et al. legt nahe, dass eine ideale Anwendungs-form des Quantum Blue® Calprotectin Schnelltests im Bereich der Erstabklä-rungen von Patienten mit Darmbeschwer-den zu finden ist. Man kann so Patienten mit funktionellen (IBS) Beschwerden sehr rasch und sicher, zum Teil noch während einer Visite, erkennen und somit unnöti-ge Kosten einer invasiven Diagnostik für diese Patienten verhindern.

*) Wassell J., Wallage M., Brewer E.; Evaluation of the

Quantum Blue® rapid tests for faecal calprotectin. Ann

Clin Biochem. 2011 Sep 19.