Arzneistoffanalytik unter besonderer ... · 3 1111 VorwortVorwort Im Praktikum...

Arzneistoffanalytik unter besondererArzneistoffanalytik unter besondererArzneistoffanalytik unter besondererArzneistoffanalytik unter besonderer

BeBeBeBerücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücher

(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)(Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung)

Arzneistoffchemie und ArzneibuchmethodenArzneistoffchemie und ArzneibuchmethodenArzneistoffchemie und ArzneibuchmethodenArzneistoffchemie und Arzneibuchmethoden

MSc-Studiengang Arzneimittelwissenschaften

Institut für Pharmazeutische und Medizinische ChemieHittorfstr. 5848149 Münster

LLLLeitfadeneitfadeneitfadeneitfaden

zum Praktikumzum Praktikumzum Praktikumzum Praktikum


rücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücher


5. Semester Pharmazie

und zuund zuund zuund zu

Modul 3:Modul 3:Modul 3:Modul 3:


Studiengang Arzneimittelwissenschaften

Institut für Pharmazeutische und Medizinische Chemie Hittorfstr. 58-62 48149 Münster


rücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücherrücksichtigung der Arzneibücher



Studiengang Arzneimittelwissenschaften

2

InhaltInhaltInhaltInhalt

1 Vorwort .........................................................................................................................3 2 Semesterablauf ............................................................................................................4

2.1 Termine ........................................................................................................................4 2.2 Vorbesprechung ...........................................................................................................4 2.3 Seminare ......................................................................................................................4 2.4 Zeitplan des Praktikums ...............................................................................................5 2.5 Kolloquium (mündliche Zwischenprüfung) ...................................................................6 2.6 Klausur .........................................................................................................................6 2.7 Modulabschlussprüfung ...............................................................................................6

3 PharMSchool ..................................................................................................................7 3.1 Arzneistoffdossier ........................................................................................................7 3.2 Praktische Aufgabe .......................................................................................................7

4 Theoretische Aufgaben - Arzneistoffdossier ..................................................................8 4.1 Vorschläge für das Vorgehen bei der Literatursuche .....................................................9 4.1.1 Daten der Präparate ..................................................................................................9 4.1.2 Pharmakologie und Toxikologie ................................................................................9 4.1.3 Chemische Daten ......................................................................................................9 4.1.4 Nachweis/Analysenmethoden ..................................................................................9 4.1.5 Literatur-Anhang .................................................................................................... 10

5 Analysen und Bewertungsschema ............................................................................. 11 6 Praktikumsstoff und Arzneistoffliste .......................................................................... 15

6.1 Identität ..................................................................................................................... 15 6.2 Reinheit ..................................................................................................................... 17 6.3 Fett- und Wachskennzahlen ...................................................................................... 17 6.4 Gehalt ........................................................................................................................ 17 6.4.1 Säure-Base-Titrationen .......................................................................................... 17 6.4.2 Redoxtitrationen .................................................................................................... 18 6.4.3 Fällungstitrationen ................................................................................................. 18 6.4.4 UV-Vis-Spektroskopie ............................................................................................ 19 6.4.5 Chromatographische Methoden ............................................................................ 19 6.5 Gesamtmonographie ................................................................................................. 19

7 Sondervorschriften und Terminanalysen ................................................................... 20 7.1 Validierung ................................................................................................................ 20 7.1.1 Ibuprofen-HPLC (modifiziert nach USP) .................................................................. 20 7.1.2 Acidimetrie – Ibuprofen (EuAB) .............................................................................. 21 7.1.3 Protokoll ................................................................................................................ 21 7.1.4 Statistische Auswertung ........................................................................................ 21 7.2 Fettkennzahlen .......................................................................................................... 22 7.3 Instrumentelle Methoden/elektrometrische Endpunktsbestimmung ......................... 22 7.4 Wasserfreie Titrationen .............................................................................................. 24 7.5 Dünnschichtchromatographie ................................................................................... 24 7.6 Identitätsreaktionen auf funktionelle Gruppen .......................................................... 25 7.7 Monographien ........................................................................................................... 26 7.7.1 Substanzliste und Aufgaben .................................................................................. 26 7.7.2 Monographie-Analytik ........................................................................................... 28

8 Anhang ...................................................................................................................... 29 8.1 Entsorgungsrichtlinien............................................................................................... 29 8.2 Versuchsauswertung Methodenvergleich Ibuprofen-Gehalt ...................................... 30

3

1111 VorwortVorwortVorwortVorwort

Im Praktikum „Arzneistoffanalytik unter besonderer Berücksichtigung der Arzneibücher“

werden wichtige analytische Methoden des Arzneibuchs hinsichtlich der Bestimmung von

Identität, Reinheit und Gehalt vorgestellt und durchgeführt. Dabei kommen sowohl klassische

nasschemische Verfahren als auch instrumentelle Methoden (u.a. IR, HPLC) zum Einsatz.

Nachdem die einzelnen analytischen Verfahren bereits im Grundstudium erlernt wurden,

werden diese Methoden nun konkret in Bezug auf die Anforderungen des Arzneibuchs

angewendet. So werden im Praktikum z.B. exemplarisch komplette Monographien einzelner

Arzneistoffe bearbeitet.

Begleitend zum Praktikum beschäftigen sich Seminare mit dem Europäischen Arzneibuch und

dessen Methoden. Dabei wird die Theorie zu einzelnen Aspekten, wie den Methoden zur

Bestimmung des Gehalts oder dem Nachweis von funktionellen Gruppen, vertieft. Zusätzlich

werden auch Methoden anderer Arzneibücher vorgestellt.

Weitere Seminare beschäftigen sich mit der Beschaffung von Informationen zu

pharmazeutischen Themen, vor allem der pharmazeutisch-chemischen Qualität von

Arzneistoffen sowie der Qualitätskontrolle und der Qualitätssicherung. Außerdem werden die

Prinzipien der Validierung von Prüfverfahren erlernt.

Ein Teil des Praktikums besteht aus theoretischen Aufgaben. In Kleingruppen werden von den

Studierenden Informationen zu einem Arzneistoff beschafft, mit Hilfe derer sie ein

Arzneistoffdossier erarbeiten. Die gesammelten Informationen werden in Form eines Vortrags

von den Studierenden dem Semester vorgestellt.

Im Rahmen der PharMSchool haben die Studierenden des Studiengangs Pharmazie während

des Praktikums die Gelegenheit, die analytisch-chemischen Gesichtspunkte ihres

interdisziplinären Projektthemas eigenständig zu bearbeiten.

Das Praktikum umfasst 112 Stunden einschließlich Seminaren. Weiter vertieft werden die hier

erworbenen Kenntnisse im Praktikum des achten Semesters.

4

2222 SemesterablaufSemesterablaufSemesterablaufSemesterablauf

2.12.12.12.1 TermineTermineTermineTermine

Bitte beachten SieBitte beachten SieBitte beachten SieBitte beachten Sie die aktuellen Aushänge am die aktuellen Aushänge am die aktuellen Aushänge am die aktuellen Aushänge am Schwarzen BrettSchwarzen BrettSchwarzen BrettSchwarzen Brett sowie die sowie die sowie die sowie die

Terminübersicht auf der Internetseite des PraktikumsTerminübersicht auf der Internetseite des PraktikumsTerminübersicht auf der Internetseite des PraktikumsTerminübersicht auf der Internetseite des Praktikums!!!!

2.22.22.22.2 VorbesprechungVorbesprechungVorbesprechungVorbesprechung

Zu Beginn des Semesters findet eine anwesenheitspflichtige Vorbesprechung zum Praktikum

statt. Dabei erfolgt die verbindliche schriftliche Anmeldung zum Praktikum.

Bitte beachten Sie dabei besonders die aktuelle Studienordnung Ihres Studiengangs!

Für Studierende des Studiengangs Pharmazie ist für die Anmeldung zum Praktikum die

Zulassung zum Ersten Abschnitt der Pharmazeutischen Prüfung erforderlich. Nach Ihrer

Anmeldung zum Praktikum legen Sie bitte unverzüglich Ihr Zeugnis über den Ersten Abschnitt

der Pharmazeutischen Prüfung bzw. Ihre Ladung dazu beim Praktikumsleiter bzw. den

Assistenten vor.

Bitte beachten Sie in diesem Zusammenhang auch §15 Abs. 5 AappO:

§ 15 Bestehen und Wiederholung von Prüfungen

(5) Nachweise, die für die Zulassung zum Zweiten Abschnitt der Pharmazeutischen Prüfung

erforderlich sind, können vor Bestehen des Ersten Abschnittes der Pharmazeutischen Prüfung

nur in dem auf die erstmalige Zulassung zum Ersten Prüfungsabschnitt folgenden Semester

erworben werden.

2.32.32.32.3 SeminareSeminareSeminareSeminare

Die Seminare sind ein anwesenheitspflichtiger Teil des Praktikums!

Es werden Seminare zu folgenden Themen abgehalten:

• Das Arzneibuch

• Gehaltsbestimmungsmethoden

• Nachweis funktioneller Gruppen/Identitätsreaktionen des Arzneibuchs

• ausgewählte Arzneibuchmonographien

• Qualitätssicherung und Qualitätskontrolle

• Informationsbeschaffung über Arzneimittel, Patentdatenbanken und

Arzneimittelzulassung

5

2.42.42.42.4 Zeitplan des PraktikumsZeitplan des PraktikumsZeitplan des PraktikumsZeitplan des Praktikums

(Änderungen sind vorbehalten)

PraktikumstagPraktikumstagPraktikumstagPraktikumstag AbschnittAbschnittAbschnittAbschnitt AnalysenAnalysenAnalysenAnalysen TageTageTageTage

1111 13 Uhr s.t.

Sicherheitsbelehrung, anschl. Saalführung und Platzübergabe

1

2222 ---- 7777

• Validierung Ibuprofen (Acidimetrie, HPLC) • Bromometrie (Isoniazid) • Periodatometrie (Glycerol) • Fettkennzahlen (Iodzahl) • elektrometrische Endpunktsbestimmung (Promethazin ∙ HCl, Benzocain, Coffein)

• instrumentelle Methoden (Chloramphenicol, Karl-Fischer)

• Substanzidentifizierung mittels IR

1 1 1 1 1 1 1

6

6 und 76 und 76 und 76 und 7 Reagenzienherstellung (Identitätsreaktionen)

8 und 98 und 98 und 98 und 9 DC-Analgetika Identität funktioneller Gruppen Reagenzienherstellung (Monographien)

1 3

2

10101010 Kolloquium

PharmaziePharmaziePharmaziePharmazie ArzneimittelArzneimittelArzneimittelArzneimittel----

wissenschaftenwissenschaftenwissenschaftenwissenschaften

11 11 11 11 und 12und 12und 12und 12 Monographie 1 3 2

13 und 1413 und 1413 und 1413 und 14 Monographie 2 3 2

15151515 Nachkochtag Monographie 3 3 2

16161616

PharMSchool

17171717 Monographie 4 3 2

18181818

19191919 Nachkochtage 2

20202020

21212121 Nachkochtag 1

22222222 13 Uhr s.t.

Reinigung des Laboratoriums, Platzabgabe1 und Entsorgung der Abfälle

1

PraktikumszeitPraktikumszeitPraktikumszeitPraktikumszeit

Montag – Freitag von 13:00 – 18:30 Uhr

1 Am Semesterende muss privates Eigentum aus dem Praktikumsplatz und auch aus dem institutseigenen Spind entfernt werden. Nicht geleerte Spinde werden in den Semesterferien geöffnet und der Inhalt wird entfernt. Die Lagerung von Chemikalien in den Spinden ist nicht zulässig.Die Lagerung von Chemikalien in den Spinden ist nicht zulässig.Die Lagerung von Chemikalien in den Spinden ist nicht zulässig.Die Lagerung von Chemikalien in den Spinden ist nicht zulässig.

6

2.52.52.52.5 Kolloquium (mündliche Zwischenprüfung)Kolloquium (mündliche Zwischenprüfung)Kolloquium (mündliche Zwischenprüfung)Kolloquium (mündliche Zwischenprüfung)

Das Kolloquium findet als Einzelprüfung über ca. 15 – 20 min bei den Praktikumsbetreuern

statt.

Prüfungsstoff:

• alle Themen, die vor dem Kolloquium im Praktikum bearbeitet wurden

• Inhalt des Seminars „Gehaltsbestimmungsmethoden“

Neben den Strukturformeln und der Quantifizierung der darin besprochenen

Arzneistoffe ist auch deren Verwendung Inhalt des Kolloquiums.

• „Identitätsreaktionen des Arzneibuchs“ (Alkaloide, prim. arom. Amine, Barbiturate,

Benzoat, Citrat, Salicylat, Tartrat, Xanthine, reduz. Substanzen)

• Fettkennzahlen (SZ, EZ, OHZ, IZ, POZ, VZ, Unv, Prüfung auf Verdorbenheit)

Bei Nichtbestehen erfolgt das erste Wiederholungskolloquium nach ca. drei Tagen beim

Praktikumsleiter. Wird auch das erste Wiederholungskolloquium nicht bestanden, erfolgt das

zweite Wiederholungskolloquium bei Prof. Dr. K. Müller (ebenfalls etwa nach 2 - 3 Tagen). Bei

endgültigem Nichtbestehen muss das Praktikum inkl. dazugehöriger Seminare und Referate

wiederholt werden.

2.62.62.62.6 KlausurKlausurKlausurKlausur

Voraussetzung für die Teilnahme an der Abschlussklausur ist das erfolgreich beendete

Praktikum.

Bestehensgrenze der Klausur: mind. 50% der mögl. Punkte

Prüfungsrelevanter Stoff:

• Inhalt der Seminare und des Praktikums

• Inhalt der Vorlesung Pharmazeutische/Medizinische Chemie III – VI

(aktuelles Semester)

• Generell werden grundlegende theoretische Hintergründe zu bereits bekannten

analytischen und chemischen Inhalten vorausgesetzt (Grundstudium).

2.72.72.72.7 ModulabschlussprüfungModulabschlussprüfungModulabschlussprüfungModulabschlussprüfung

Für Studierende des Masterstudiengangs Arzneimittelwissenschaften findet eine 20 –

30-minütige mündliche Abschlussprüfung bei Prof. Dr. K. Müller statt.

7

3333 PharPharPharPharMSMSMSMSchoolchoolchoolchool

Das Projekt PharMSchool wurde von den fünf Teildisziplinen der Pharmazie mit dem Ziel ins

Leben gerufen, eigenständiges Arbeiten zu fördern und so forschendes Lernen zu ermöglichen.

Zu Beginn des Hauptstudiums werden gruppenweise Themen vergeben, die die Studierenden

des Studiengangs Pharmazie durch die folgenden vier Semester begleiten. Während jeder

praktischen Übung innerhalb des Hauptstudiums wird den Projektgruppen Zeit für

themenbezogene Laborversuche zur Verfügung gestellt, um Fragestellungen eigenständig in

den vielseitigen Teildisziplinen aufzuarbeiten. Diese Herangehensweise, das Thema unter

verschiedenen Aspekten aufzugreifen, soll dazu führen, dass erworbene Erkenntnisse zur

jeweiligen Thematik aktiver in andere Teilbereiche der Pharmazie übertragen werden und

hierdurch interdisziplinäre Zusammenhänge intensiver wahrgenommen werden.

Im Praktikum „Arzneistoffanalytik unter besonderer Berücksichtigung der Arzneibücher“ soll

das Thema der PharMSchool-Gruppen unter chemisch-analytischen Gesichtspunkten beleuchtet

werden.

3.13.13.13.1 ArzneistoffdossierArzneistoffdossierArzneistoffdossierArzneistoffdossier

In den PharMSchool-Gruppen werden Arzneistoffdossiers erstellt (siehe Abschnitt 4). Die zu

bearbeitenden Stoffe werden auf das jeweilige PharMSchool-Projekt abgestimmt.

3.23.23.23.2 Praktische AufgabePraktische AufgabePraktische AufgabePraktische Aufgabe

In der für eigenständiges Arbeiten zur Verfügung gestellten Praktikumszeit (Praktikumstage 16

- 20) können Versuche entwickelt werden, um eigenen Fragen nachzugehen und Ideen zu

verfolgen. Bei dieser praktischen Aufgabe soll auf die Erkenntnissee, die während der

praktischen Übungen und in den Seminaren gewonnen wurden, zurückgegriffen werden. So

kann zum Beispiel für bisher nicht monographierte Arzneistoffe eine Monographie erarbeitet

werden, eine Alternative zu einer bestehenden Monographie aufgezeigt oder Monographien

verschiedenen Arzneibücher verglichen werden. Seien Sie kreativ!

Bitte planen Sie die Versuche rechtzeitig in Absprache mit den Assistenten und Koordinatoren,

damit geprüft werden kann, ob die erforderlichen Materialien rechtzeitig organisiert werden

können und eine Umsetzung praktikabel ist. Denken Sie auch daran, von Beginn an Ihre Ideen,

Fragestellungen, die Herangehensweise und die Versuchsdurchführung zu dokumentieren.

Wenn ein Versuch nicht vollständig durchgeführt werden konnte oder nicht die gewünschten

Ergebnisse erzielt wurden, gilt die Aufgabe für die Gruppe als bestanden, wenn eine

8

dokumentierte Recherche mit Quellenangabe, Versuchsplanung, Durchführung, Fehleranalyse

etc. als Protokoll vorliegt.

Sollte Interesse daran bestehen, den Aspekt der Arzneistoffanalytik bezüglich des

PharMSchool-Themas zu vertiefen, bietet sich hierzu auch während der Zeit des

Wahlpflichtfachs Gelegenheit.

4444 Theoretische AufgabenTheoretische AufgabenTheoretische AufgabenTheoretische Aufgaben ---- ArzneistoffdossierArzneistoffdossierArzneistoffdossierArzneistoffdossier

In Kleingruppen werden Informationen über einen Arzneistoff gesammelt, ausgewertet und in

Form eines Protokolls abgegeben. Für das Protokoll liegt auf der Internetseite des 5.Semesters

eine Datei bereit. Die gesammelten Informationen sind mittels Word in das bereitliegende

Formular einzutragen und als Ausdruck abzugeben.

Nutzen Sie als Literaturquellen möglichst verschiedene Medien und belegen Sie Quellen mit

Zitaten, Ausdrucken und Kopien.

Eine Liste der zu bearbeitenden Stoffe wird am Schwarzen Brett ausgehängt. Die

Auswertungsbögen und das Quellenmaterial müssen bis zum Tag, an dem der Vortrag

gehalten wird, abgegeben werden. Die Protokolle werden korrigiert und müssen

gegebenenfalls berichtigt werden. Erst dann wird diese Aufgabe testiert.

Die für das Arzneistoffdossier gesammelten Informationen werden in Form eines

15 – 20 minütigen Vortrags dem Semester vorgestellt. Neben der Synthese, der Pharmakologie

und der Verwendung des Stoffes soll auch auf die Analytik des Arzneistoffs eingegangen

werden. Es ist für den Vortrag eine Präsentation zu erstellen, die möglichst frühzeitig mit dem

betreuenden Assistenten besprochen wird. Die angefertigten Folien werden den Assistenten

zum Vortrag ausgedruckt sowie in elektronischer Form abgegeben.

9

4.14.14.14.1 Vorschläge für das Vorgehen bei der LiteratursucheVorschläge für das Vorgehen bei der LiteratursucheVorschläge für das Vorgehen bei der LiteratursucheVorschläge für das Vorgehen bei der Literatursuche

4.1.14.1.14.1.14.1.1 Daten der Präparate:Daten der Präparate:Daten der Präparate:Daten der Präparate:

a) Hersteller und Handelsnamen: aus Roter Liste oder über eine Internet-Suchmaschine (z.B.

www.google.com – beim Eingeben der Substanznamen daran denken, dass man oft nicht

wissen kann, ob im Englischen mit oder ohne "e" am Ende, daher trunkieren, Bsp.

Linezolid → linezoli*).

b) Patentangaben: über Merck Index (der Fa. Merck & Co., USA – nicht verwechseln mit

Katalog der Fa. Merck, Darmstadt) oder über Kleemann/Engel, 'Pharmaceutical

Substances' oder über Chem. Abstr. (über Summenformel) oder Patentdatenbanken

(de.espacenet.com; uspto.gov)

4.1.24.1.24.1.24.1.2 PharmakologPharmakologPharmakologPharmakologie und Toxikologie:ie und Toxikologie:ie und Toxikologie:ie und Toxikologie:

a) Therapeutische Klassifizierung:

Der Stoff soll in die Gruppe einsortiert werden, in der er in der Roten Liste erschienen ist

oder erscheinen wird.

Bsp.: Celecoxib – Antiphlogistika.

b) Pharmakologische Charakterisierung:

Hier soll der Wirkungsmechanismus angegeben werden.

Bsp.: Celecoxib – Cyclooxygenase-2-Inhibitor.

4.1.34.1.34.1.34.1.3 Chemische Daten:Chemische Daten:Chemische Daten:Chemische Daten:

a) IUPAC-Name, Strukturformel etc.:

Es gibt viele Möglichkeiten, diese zu finden – bitte Quelle angeben!

b) CAS-Nummer = Chemical Abstracts Service Registry Nummer:

Eine Nummer, die Chem. Abstr. jeder Substanz gibt und die für die Suche in

elektronischen Datenbanken nützlich ist, da viele Datenbanken diese Nummer

übernehmen.

c) ATC-Code = Anatomic Therapeutic Chemical:

Eingruppierung und Vergabe einer Nummer (Code) für Wirkstoffe; Erläuterung des Systems

siehe im Vorspann des Kleemann/Engel, 'Pharmaceutical Substances'.

4.1.44.1.44.1.44.1.4 Nachweis/Analysenmethoden:Nachweis/Analysenmethoden:Nachweis/Analysenmethoden:Nachweis/Analysenmethoden:

aus Arzneibüchern (Ph.Eur., DAB, USP, JP, BP) oder dem Florey, 'Analytical Profiles of Drug

Substances' oder über Chem. Abstr. oder Medline (www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed oder über

ULB Münster) – Eingabe des Substanznamens AND determin* oder HPLC oder chromatogr*

o.ä.

10

4.1.54.1.54.1.54.1.5 LiteraturLiteraturLiteraturLiteratur----Anhang:Anhang:Anhang:Anhang:

Die verwendete Literatur soll ausgedruckt bzw. kopiert und angehängt werden!

a) Monographien: Wurde der Arzneistoff (schon) in die Ph.Eur., USP, BP, JP bzw.

Arzneistoffprofilen (ASP; siehe Bibliothek – orange Ringordner), Florey, Hager, Merck

Index aufgenommen?

b) Es sollen in die Liste aufgenommen werden:

1. ein Review (oder Originalartikel), der sich mit der Synthese oder mit der

Analytik der Substanz beschäftigt;

2. einer zu ihrer Pharmakologie oder 1-3 wichtige Artikel über die in vitro

oder im Tierversuch bestimmte Wirkungsweise/Wirkungsstärke;

3. einer zu ihrer Anwendung (Klinik).

c) Wie zitiert man Literatur richtig? Es gibt mehrere Möglichkeiten. Für die Dossiers bitte wie

folgt (Beispiele):

Merck Index (13.), Nr. 1234 [13. = 13. Auflage; Nr. der Monographie, nicht Seitenzahl]

Hager (5.) 5, 123-128 [5. Aufl., Band 5, Seiten 123-128]

Zeitschriftenartikel:

S. M. Grant, R. C. Heel, Vigabatrin. Drugs 41, 889-926 (1991).

"Drugs" = Name der Zeitschrift, "41" = Band/Jahrgang, "889-926" = Seiten von-bis,

"(1991)" = Erscheinungsjahr. ("Drugs" ist übrigens eine Zeitschrift mit sehr guten Reviews

zur Pharmakologie und Verwendung von Arzneistoffen und in der Institutsbibliothek

pharm. Chemie Münster vorhanden.)

E. K. Rowinsky, L. B. Grochow, C. B. Hendriks, Phase I and pharmacological study of

topotecan: a novel topoisomerase I inhibitor. J. Clin. Oncol. 10, 647-656 (1992).

Wichtig:Wichtig:Wichtig:Wichtig: Einfach nur "Chem. Abstr." oder "Medline" (oder gar "Internet") sind keine

Literaturangaben; wesentliche Literaturstellen – meist Zeitschriftenartikel – auswählen.

11

5555 Analysen und Analysen und Analysen und Analysen und BewertungsschemaBewertungsschemaBewertungsschemaBewertungsschema

Allgemeine HinweiseAllgemeine HinweiseAllgemeine HinweiseAllgemeine Hinweise

Die Praktikumsversuche sind theoretisch vorzubereiten. Die Kenntnis über die Versuche, die

durchgeführt werden, wird überprüft („Platzkolloq“). Nicht vorbereitete Versuche dürfen nicht

durchgeführt werden und sind ggf. an den Nachkochtagen zu wiederholen. Beachten Sie auch

die Sicherheits- und Entsorgungsvorschriften.

Aus der Stoffliste des 5. Semesters werden einige Arzneistoffe praktisch bearbeitet (siehe

Analysenplan). Wenn in diesem Skript (Abschnitt 7) keine besonderen Angaben zu finden

sind, gilt das Europäische Arzneibuch in der aktuellen Ausgabe, welches im Assistentenraum

und in der Bibliothek einzusehen ist.

AnalysenanforderungAnalysenanforderungAnalysenanforderungAnalysenanforderung

• Fordern Sie ausschließlich die Analyse(n) an, für die Sie am folgenden Praktikumstag

eingeteilt sind! Länger im Voraus angeforderte Analysen werden nicht ausgegeben.

• Wiederholungsanalysen können (und sollten) zusätzlich zu den eingeteilten Analysen

angefordert und bearbeitet werden.

• Achten Sie auf die ordnungsgemäße Beschriftung (selbstklebende Etiketten) und die

richtige Auswahl der Analysengefäße (s.u.).

Merke: Abweichend beschriftete Anforderungen werden von der Analysenausgabe nicht

ausgegeben. Es steht dann also für den Praktikumstag keine Analyse zur Verfügung!

• Es wird keine Nachsubstanz mit identischem Gehalt ausgegeben, teilen Sie sich die

Analysensubstanz gut ein!

• Propyphenazon, Tolbutamid und Phenytoin werden ausschließlich als

Nachkochanalysen zum Erreichen der Mindestpunktzahl angefordert.

KorrekturKorrekturKorrekturKorrektur

Die Analysenhefte werden in den dafür vorgesehenen Fächern im Praktikumssaal abgegeben.

Es wird von 14:30 bis 15:30 Uhr und von 17:00 bis 18:00 Uhr korrigiert. Dazwischen wird nicht

korrigiert. Nach 18:00 Uhr abgegebene Hefte werden am folgenden Praktikumstag ab 14:30

Uhr nachgesehen. Pro Abgabetermin kann jeweils nur einmal abgegeben werden, d.h. Abgabe

maximal zweimal pro Tag.

12

Beachten Sie bitte folgende Tabelle, insbesondere die mittlere Spalte.

AnalysenplanAnalysenplanAnalysenplanAnalysenplan

Analyse Gefäß Beschriftung der Gefäße Angabe in Schlüssel

Validierung Ibuprofen B Name Student 1 Name Student 2

Ibuprofen-Validierung

% (acid. Best.) + Protokoll2

X3 r/f

Isoniazid B

Name, Vorname

Analysensubstanz

% X

Glycerol WE % XX

Iodzahl WE IZ XXX3

Promethazin B % XX

Benzocain B % X3

Coffein B % X3

Chloramphenicol B % X

Halbmikrobestimmung von Wasser

B Name, Vorname Karl-Fischer

% XX3

IR WG Name, Vorname

IR Protokoll4 r/f3

DC der Analgetika WG Name, Vorname DC der Analgetika

gefundene Analgetika

r/f3

Identitätsreaktionen fkt. Gruppen

WG Name, Vorname

Identität 1, 2 bzw. 3 fkt. Grp. r/f3

Monographien: Identität

WG Name, Vorname

Monographiesubstanz Monographie – Identität

Formblatt nach ApBetrO

r/f3

Monographien: Reinheit

WG Name, Vorname

Monographiesubstanz Monographie – Reinheit

Formblatt nach ApBetrO

r/f3

Monographien: Gehalt

B Name, Vorname

Monographiesubstanz Monographie – Gehalt

% X - XXX (s.u.)3

Propyphenazon B Name, Vorname Analysensubstanz Nachkochanalyse

% X3

Tolbutamid B % X

Phenytoin B % X3

WG: Wägegefäß, B: Becherglas, WE: Weithalserlenmeyerkolben

2 Es ist ein vollständiges, handschriftliches Protokoll gemeint, wobei die Durchführung stichpunktartig erfolgen kann. Zusätzlich ist der Datenbogen (s.u.) auszufüllen. Abgabe bis spätestens zum Tag des Kolloquiums.

3 Bitte beachten Sie die Hinweise zur Durchführung und Auswertung der Analysen in Abschnitt 7! 4 Zuordnung der Banden funktioneller Gruppen auf dem Ausdruck mit Angabe des gefundenen AS

13

BewertungBewertungBewertungBewertung

Die Korrektur der Analysenwerte erfolgt anhand einer Bewertungstabelle (s.u.). Bei

Falschansage einer quantitativen Analyse muss eine neue Analyse bearbeitet werden. Die

quantitativen Analysen müssen gegebenenfalls so oft wiederholt werden, bis der gefundene

Analysenwert innerhalb der äußersten Fehlergrenze (mind. 1 Punkt) liegt und die

Mindestpunktzahl erreicht ist. Deshalb sollten immer Standards bestimmt werden, die im

Praktikum vorhanden sind. Sollte keine Standardsubstanz mehr vorhanden sein, stellen Sie

das Gefäß in die Analysenkisten, damit die Analysenausgabe die Substanz nachliefern kann.

Es ist nicht möglich während der Praktikumszeit Standardsubstanzen zu besorgen, da die

Analysenausgabe nachmittags geschlossen ist. Daneben sollte ein Blindversuch durchgeführt

werden.

Wird mit Abschluss des regulären Praktikumspensums die

erforderliche Mindestpunktzahl von erforderliche Mindestpunktzahl von erforderliche Mindestpunktzahl von erforderliche Mindestpunktzahl von 17171717 PunktenPunktenPunktenPunkten

nicht erreicht, müssen weitere quantitative Analysen durchgeführt werden (sog.

Nachkochanalysen), bis 17 Punkte erreicht sind. Hier gilt ebenfalls, dass pro Analyse nur eine

Ansage möglich ist. Die Analysenanforderung ist zusätzlich mit „Nachkochanalyse“ zu

beschriften.

BewertungstabelleBewertungstabelleBewertungstabelleBewertungstabelle der quantitativen Analysender quantitativen Analysender quantitativen Analysender quantitativen Analysen

X XX XXX I II III

Fehler bis 1 % 2 % 3 % 4 2 1

Fehler bis 2 % 3 % 5 % 3 2 1

Fehler bis 3 % 5 % 7 % 2 1 1

Fehler bis 5 % 7 % 10 % 1 1 1

I: erste Analyse, zweite (Nachkoch-) Analyse;

II: dritte (Nachkoch-) Analyse; III: weitere (Nachkoch-) Analysen

14

r/fr/fr/fr/f----AnalysenAnalysenAnalysenAnalysen

Einige Bestimmungen (gekennzeichnet mit r/f im Analysenplan) werden mit „richtig“ oder

„falsch“ bewertet. In diesen Fällen ist eine Analyse erst dann abgeschlossen, wenn sie mit

„richtig“ bewertet wird.

• Bei der Aufgabe „DC der Analgetika“„DC der Analgetika“„DC der Analgetika“„DC der Analgetika“ darf pro Analyse zweimal angesagt werden.

• Bei den IdentitätsreaktionenIdentitätsreaktionenIdentitätsreaktionenIdentitätsreaktionen auf funktionelle Gruppen darf nur einmal angesagt

werden.

• Die Bewertung der einzelnen Prüfungen auf IdentitätIdentitätIdentitätIdentität und ReinheitReinheitReinheitReinheit bei den

MonographienMonographienMonographienMonographien erfolgt mit ,,richtig“ oder ,,falsch“. Ist eine Prüfung mit „falsch“

bewertet, werden alle Identitäts- bzw. Reinheitsprüfungen mit neuer Analysensubstanz

wiederholt.

Wiederholung derselben Analyse?Wiederholung derselben Analyse?Wiederholung derselben Analyse?Wiederholung derselben Analyse?

Wenn eine Analyse mit falsch oder 0 Punkten bewertet wurde, muss eine neue Analyse

angefordert werden. Die Analysenanforderung ist zusätzlich mit „Wiederholungsanalyse“ zu

beschriften.

Es ist nicht möglich, dieselbe Analyse zweimal anzusagen. Ausnahme ist die DC der

Analgetika, hierbei sind zwei Ansagen pro Analyse möglich.

Wiederholungsanalysen können parallel zu Ihren normalen Analysen angefordert und

bearbeitet werden. Teilen Sie Ihre Aufgaben im Praktikum so ein, dass Sie Ihre

Wiederholungsanalysen möglichst zeitnah bearbeiten können. Warten Sie damit nicht bis zu

den Nachkochtagen!

15

6666 Praktikumsstoff und ArzneistofflistePraktikumsstoff und ArzneistofflistePraktikumsstoff und ArzneistofflistePraktikumsstoff und Arzneistoffliste

PraktikumsstoffPraktikumsstoffPraktikumsstoffPraktikumsstoff

• Generell werden grundlegende theoretische Hintergründe zu bereits bekannten

analytischen und chemischen Inhalten vorausgesetzt (Grundstudium).

• Inhalt der Seminare und Vorlesungen

ArzneistofflisteArzneistofflisteArzneistofflisteArzneistoffliste

Mit * gekennzeichnete AS werden im Praktikum bearbeitet.

6.16.16.16.1 IdentitätIdentitätIdentitätIdentität

*Analgetika per DCAnalgetika per DCAnalgetika per DCAnalgetika per DC: Acetylsalicylsäure, Coffein, Diclofenac-Natrium, Metamizol,

Paracetamol, Phenazon, Phenylbutazon, Propyphenazon (s. Abschnitt 7.5)

*Ausgewählte funktionelle GruppenAusgewählte funktionelle GruppenAusgewählte funktionelle GruppenAusgewählte funktionelle Gruppen:

Alkaloide, prim. arom. Amine, Barbiturate, Benzoat, Citrat, Ester, Salicylat, Tartrat,

Xanthine, reduz. Substanzen (s. Abschnitt 7.6)

Ungesättigte KohlenwasserstoffeUngesättigte KohlenwasserstoffeUngesättigte KohlenwasserstoffeUngesättigte Kohlenwasserstoffe

Ethinylestradiol

Sorbinsäure

Undecylensäure

Halogenierte Halogenierte Halogenierte Halogenierte KohlenwasserstoffeKohlenwasserstoffeKohlenwasserstoffeKohlenwasserstoffe

Beclomethasondipropionat

Cyclophosphamid

Haloperidol

Hydroxylierte KohlenwasserstoffeHydroxylierte KohlenwasserstoffeHydroxylierte KohlenwasserstoffeHydroxylierte Kohlenwasserstoffe

Codein

Ephedrin

Ethanol

Methanol

Morphin

Phenol

Pyridoxinhydrochlorid

Serin

Tyrosin

Thiole Thiole Thiole Thiole

Acetylcystein

16

AmineAmineAmineAmine

Alanin

Amantadinhydrochlorid

Amfetaminsulfat

Benzocain

Ethylendiamin

Lidocain

Nitrazepam

Nortriptylinhydrochlorid

Piperazin-Hexahydrat

Sulfanilamid

Nitroverbindungen Nitroverbindungen Nitroverbindungen Nitroverbindungen

Chloramphenicol Nifedipin

GuanidinGuanidinGuanidinGuanidin----DerivateDerivateDerivateDerivate

Sulfaguanidin

Aldehyde und KetoneAldehyde und KetoneAldehyde und KetoneAldehyde und Ketone

Aceton

Formaldehyd

Haloperidol

Hydrochlorothiazid

Carbonsäuren und DerivateCarbonsäuren und DerivateCarbonsäuren und DerivateCarbonsäuren und Derivate

Atropin

Benzocain

Essigsäure

Ibuprofen

Indometacin

Levodopa

Nicotinamid

Paracetamol

Undecylensäure

PyridinPyridinPyridinPyridin----DerivateDerivateDerivateDerivate

Nicotinamid

IndolIndolIndolIndol----DerivateDerivateDerivateDerivate

Indometacin Tryptophan

BarbitursäureBarbitursäureBarbitursäureBarbitursäure----DerivateDerivateDerivateDerivate

Phenobarbital Thiopental-Natrium

XanthinXanthinXanthinXanthin----DerivateDerivateDerivateDerivate

Coffein

Harnsäure

Theobromin

Theophyllin

17

MorphinMorphinMorphinMorphin----DerivateDerivateDerivateDerivate

Morphin

6.26.26.26.2 ReinheitReinheitReinheitReinheit

Freier Formaldehyd

Gesamtprotein

Lösungsmittelrückstände

Phenol in Sera und Impfstoffen

*Promethazinhydrochlorid per DC

*Schwermetalle

*Wasserbestimmung nach Karl-Fischer

6.36.36.36.3 FettFettFettFett---- und Wachskennzahlenund Wachskennzahlenund Wachskennzahlenund Wachskennzahlen

Säurezahl (SZ)

Esterzahl (EZ)

Hydroxylzahl (OHZ)

*Iodzahl (IZ)

Peroxidzahl (POZ)

Verseifungszahl (VZ)

Unverseifbare Anteile (Unv)

6.46.46.46.4 GehaltGehaltGehaltGehalt

6.4.16.4.16.4.16.4.1 SäureSäureSäureSäure----BaseBaseBaseBase----TitrationenTitrationenTitrationenTitrationen

Acidimetrie mit wässrigen TitrationslösungenAcidimetrie mit wässrigen TitrationslösungenAcidimetrie mit wässrigen TitrationslösungenAcidimetrie mit wässrigen Titrationslösungen

Acetylsalicylsäure

Amantadinhydrochlorid

Amitriptylinhydrochlorid

Busulfan

Ciclopirox

Ethinylestradiol

Furosemid

Glibenclamid

Hydromorphonhydrochlorid

*Ibuprofen

Indometacin

Levocabastinhydrochlorid

Levonorgestrel

Morphinhydrochlorid

Phenylbutazon

*Promethazinhydrochlorid

Theophyllin

*Tolbutamid (Nachkochanalyse)

18

Acidimetrie im wasserfreien MilieuAcidimetrie im wasserfreien MilieuAcidimetrie im wasserfreien MilieuAcidimetrie im wasserfreien Milieu

Albendazol

Chininsulfat

Chloroquinphosphat

Clotrimazol

*Coffein

Fluorouracil

Hydrochlorothiazid

Metronidazol

Morphinhydrochlorid

Nitrazepam

Phenobarbital

*Phenytoin (Nachkochanalyse)

*Propyphenazon (Nachkochanalyse)

Salbutamolsulfat

Thiaminnitrat

6.4.26.4.26.4.26.4.2 RedoxtitrationenRedoxtitrationenRedoxtitrationenRedoxtitrationen

Beachten Sie die Hinweise zur Stärkelösung im Abschnitt 7 (Fettkennzahlen)

CerimetrieCerimetrieCerimetrieCerimetrie

Menadion

Nifedipin

Paracetamol

IodometrieIodometrieIodometrieIodometrie

Acetylcystein

Ascorbinsäure

Benzoylperoxid, wasserhaltiges

Captopril

Metamizol-Natrium

IodatometrieIodatometrieIodatometrieIodatometrie

Cetrimid

PeriodatometriePeriodatometriePeriodatometriePeriodatometrie

*Glycerol

BromometrieBromometrieBromometrieBromometrie

*Isoniazid Phenol

NitritometrieNitritometrieNitritometrieNitritometrie

*Benzocain (s. Sondervorschrift)

Sulfadiazin

Sulfamethoxazol

6.4.36.4.36.4.36.4.3 FällungstitrationenFällungstitrationenFällungstitrationenFällungstitrationen

Cyclophosphamid

19

6.4.46.4.46.4.46.4.4 UVUVUVUV----VisVisVisVis----SpektroskopieSpektroskopieSpektroskopieSpektroskopie

*Chloramphenicol

Paracetamol (USP)

Riboflavin

6.4.56.4.56.4.56.4.5 Chromatographische MethodenChromatographische MethodenChromatographische MethodenChromatographische Methoden

GaschromatographieGaschromatographieGaschromatographieGaschromatographie

Lincomycinhydrochlorid α-Tocopherol

HPLCHPLCHPLCHPLC

Allopurinol

Colecalciferol

Folsäure

*Ibuprofen (USP)

Methotrexat

6.56.56.56.5 GesamtmonographieGesamtmonographieGesamtmonographieGesamtmonographie

zwei bzw. vier Monographien pro Student

(zu bearbeitende Aufgaben siehe Abschnitt 7.7.1)

*Acetylsalicylsäure

*Ascorbinsäure

*Citronensäure-Monohydrat

*Coffein

*Ibuprofen

*Isoniazid

*Lidocainhydrochlorid

*Metamizol-Natrium

*Paracetamol

*Promethazinhydrochlorid

*Sulfadiazin

*Thiaminnitrat

*Tryptophan

20

7777 Sondervorschriften und Sondervorschriften und Sondervorschriften und Sondervorschriften und TerminanalysenTerminanalysenTerminanalysenTerminanalysen

7.17.17.17.1 ValidierungValidierungValidierungValidierung

Es wird im Praktikum ein Methodenvergleich für die Gehaltsbestimmung von Ibuprofen nach

USP (HPLC) und EuAB (Acidimetrie) durchgeführt. Der Versuch wird in Zweiergruppen

durchgeführt.

7.1.17.1.17.1.17.1.1 IbuprofenIbuprofenIbuprofenIbuprofen----HPLC (modifiziert nach USP)HPLC (modifiziert nach USP)HPLC (modifiziert nach USP)HPLC (modifiziert nach USP)

MobileMobileMobileMobile Phase:Phase:Phase:Phase:

Acetonitril/Aqua bidest 60 / 40 (V/V) + 0,1 % Ameisensäure

HPLCHPLCHPLCHPLC----System:System:System:System:

Flussrate: 1,0 ml/min, Detektion: UV (233 nm)

Kalibrierung: Kalibrierung: Kalibrierung: Kalibrierung:

An jedem Praktikumstag, an dem die HPLC-Analyse durchgeführt wird, führt eine Gruppe die

Kalibration durch und erstellt eine Kalibriergerade, die von den anderen Gruppen für die

Auswertung benutzt wird.

Etwa 300 mg der Ibuprofen-Standardsubstanz (genau gewogen) werden in einen 25 mL

Messkolben gegeben und in Methanol (p.A.) gelöst. Es wird dann mit Methanol (p.A.) auf 25

mL aufgefüllt (12 g/L). Von dieser Stammlösung werden jeweils 100, 250, 500, 750, 1000 und

1250 µL in einen 20-mL-Messkolben pipettiert. (Bitte benutzen dafür Sie die bereitliegende

Eppendorf-Pipette.) Dazu werden jeweils 1000 µL (Eppendorf-Pipette) der Lösung des internen

Standards (Valerophenon 2 g/L in Methanol) gegeben und mit Fließmittel auf 20 mL aufgefüllt.

Von dieser ersten Verdünnung wird jeweils 1,0 mL in einen 10-mL-Messkolben einpipettiert

und es wird wieder mit Fließmittel auf 10 mL aufgefüllt.

Die sechs Kalibrierlösungen werden je sechsmal ins HPLC-System injiziert. Es erfolgt dann eine

Auswertung mit der Auftragung der Flächenquotienten Ibuprofen/interner Standard gegen die

Konzentration (in µg/mL, dabei die tatsächliche Einwaage berücksichtigen). Dazu verwendet

man am besten eine Tabellenkalkulationsvorlage.

HPLCHPLCHPLCHPLC----Analyse Ibuprofen (modifiziert nach USP)Analyse Ibuprofen (modifiziert nach USP)Analyse Ibuprofen (modifiziert nach USP)Analyse Ibuprofen (modifiziert nach USP)

450 mg der Ibuprofen-Analyse werden abgewogen und in einem 50-mL-Messkolben in

Methanol (p.A.) gelöst. Heben Sie den Rest der Analyse für die acidimetrische Bestimmung

auf! Es wird dann mit Methanol auf 50 mL aufgefüllt. Von dieser Lösung werden 1000 µL

(Eppendorf-Pipette) in einen 20-mL-Meßkolben pipettiert, dazu werden 1000 µL (Eppendorf-

21

Pipette) der Lösung des internen Standards gegeben (Valerophenon 2 g/L), und es wird mit

Fließmittel auf 20 mL aufgefüllt. Von der 1. Verdünnung wird 1,0 mL in einen 10-mL-

Meßkolben pipettiert, und es wird wieder mit Fließmittel auf 10 mL aufgefüllt. Diese Lösung

wird sechsmal chromatographiert. Die Auswertung erfolgt über eine Kalibriergerade (Quotient

Peakfläche Ibuprofen / Peakfläche interner Standard vs. Konzentration Ibuprofen).

7.1.27.1.27.1.27.1.2 Acidimetrie Acidimetrie Acidimetrie Acidimetrie –––– Ibuprofen (EuAB)Ibuprofen (EuAB)Ibuprofen (EuAB)Ibuprofen (EuAB)

Zur acidimetrischen Bestimmung nach EuAB werden pro Zweiergruppe jeweils sechs

Einwaagen entnommen (aus dem Gefäß, aus dem auch die Probe für die HPLC-Bestimmung

stammte). Der acidimetrisch ermittelte Gehalt wird ins Analysenheft eingetragen und mit

Punkten bewertet. Mit dem Ergebnis erhalten Sie den wahren Wert der Analyse, den Sie für die

statistische Auswertung benötigen.

7.1.37.1.37.1.37.1.3 ProtokollProtokollProtokollProtokoll

Füllen Sie das Formblatt (letzte Seite im Skript) vollständig aus. In einem abschließenden

Protokoll sollen die beiden Methoden miteinander verglichen werden. Legen Sie die in das

Formblatt eingetragenen statistischen Größen zu Grunde und vergleichen und bewerten Sie

die beiden Methoden hinsichtlich ihrer Präzision und Richtigkeit. Definieren Sie eingangs die

entscheidenden statistischen Größen und Testverfahren und erklären Sie deren Bedeutung in

Bezug auf die durchgeführten Versuche sowie ihre Aussagekraft. Beurteilen Sie abschließend,

welche Methode geeigneter ist. Nennen Sie mögliche Fehlerquellen bei der Durchführung der

beiden Methoden.

Beachten Sie bei der Erstellung des Protokolls auch die Unterlagen zum Seminar

„Qualitätskontrolle und Qualitätssicherung“.

Geben Sie das Protokoll spätestens am Tag des Kolloquiums ab!

7.1.47.1.47.1.47.1.4 Statistische AuswertungStatistische AuswertungStatistische AuswertungStatistische Auswertung

FFFF----TestTestTestTest

Führen Sie den F-Test zum Vergleich der Varianzen der beiden Gehaltsbestimmungsmethoden

durch.

2

2

2

1

s

sF = ,

21ss >

Fber sollte kleiner sein als FTabelle (siehe Tabelle z.B. Rücker, Neugebauer, Willems;

Instrumentelle Pharmazeutische Analytik, 4. Auflage 2008, S.24).

22

tttt----Test (Test (Test (Test (systematischer Fehler bzw.systematischer Fehler bzw.systematischer Fehler bzw.systematischer Fehler bzw. Vergleich der Mittelwerte)Vergleich der Mittelwerte)Vergleich der Mittelwerte)Vergleich der Mittelwerte)

Führen Sie je nach Ergebnis des F-Tests den geeigneten t-Test durch und berücksichtigen Sie

dafür die Formeln und Tabellen in Rücker, Neugebauer, Willems; Instrumentelle

Pharmazeutische Analytik, 4. Auflage 2008, S.25-28.

7.27.27.27.2 FettkennzahlenFettkennzahlenFettkennzahlenFettkennzahlen

Iodzahl Iodzahl Iodzahl Iodzahl –––– Sondervorschrift Sondervorschrift Sondervorschrift Sondervorschrift

Einwaage: 0,25 g für Iodzahl. Die Bestimmung wird nach EuAB durchgeführt, aber es wird bei

der Bestimmung der Iodzahl das vorgeschriebene Chloroform durch Toluol ersetzt.

♦ Hinweis: Als Stärkelösung wird statt der vorgeschriebenen Lösung die Stärkelösung,

iodidfreie R des EuAB verwendet (d.h. ohne Zusatz von Quecksilberiodid).

Gleiches gilt für den Abschnitt Redoxtitrationen.

7.37.37.37.3 Instrumentelle Methoden/elektrometrische EndpunktsbestimmungInstrumentelle Methoden/elektrometrische EndpunktsbestimmungInstrumentelle Methoden/elektrometrische EndpunktsbestimmungInstrumentelle Methoden/elektrometrische Endpunktsbestimmung

Zu Praktikumsbeginn melden Sie sich bitte bei den diensthabenden Assistenten!

Die zur Durchführung der Versuche „Promethazinhydrochlorid“, „Benzocain“, „Coffein“,

„Chloramphenicol“, „Halbmikrobestimmung von Wasser“ und „Substanzidentifizierung

mittels IR“ benötigten Geräte stehen Ihnen nur über einen begrenzten Zeitraum zur Verfügung.

Die Termineinteilungen können gesonderten Aushängen entnommen werden. Falls Sie Ihre

Analysen nicht im angegebenen Zeitraum beenden können bzw. Sie Ihre Analyse wiederholen

müssen, wenden Sie sich an die diensthabenden Assistenten und versuchen Sie, die Analyse

möglichst zeitnah nachzuholen.

Es werden von jedem Studierenden nicht alle Analysen praktisch durchgeführt. Machen Sie

sich auch mit dem praktischen Ablauf der jeweils anderen Analysen vertraut.

23

Benzocain Benzocain Benzocain Benzocain –––– SondervorschriftSondervorschriftSondervorschriftSondervorschrift

Zu Beginn der Aufgabe erfolgt ein kurzes Gruppenkolloquium.

Für die nitritometrische Bestimmung muss die Natriumnitrit-Maßlösung (0,1 mol/L) nach EuAB

hergestellt und gegen Benzocain-Reinsubstanz (und nicht gegen Sulfanilamid) eingestellt

werden. Dies übernehmen die Studierenden selbst, indem ein Standard mittitriert wird. Dies

ist nötig, damit individuelle Fehler ausgeglichen werden können. Geben Sie Ihre

Titrationskurven und Berechnungen mit dem Analysenheft ab.

Bitte Vorsicht beim Umgang mit der nicht ganz billigen Bürettenapparatur und dem giftigen

NaNO2!

Halbmikrobestimmung von Wasser Halbmikrobestimmung von Wasser Halbmikrobestimmung von Wasser Halbmikrobestimmung von Wasser –––– KarlKarlKarlKarl----FischerFischerFischerFischer----MMMMethodeethodeethodeethode

Zu Beginn der Aufgabe erfolgt ein kurzes Gruppenkolloquium.

Natriummonohydrogenphosphat-Dodecahydrat:

• Vorbereitung der Probe:

Verreiben Sie Ihre Analyse in einem trockenen (!) Mörser.

Einwaage: 20 – 30 mg (durch Rückwägung genau bestimmt)

Lösungsmittel: wasserfreies Methanol / Formamid = 10 / 40

• Auswertung:

Berechnen Sie mithilfe des am Gerät angegebenen Faktors der Maßlösung den Gehalt

an Natriummonohydrogenphosphat-Dodecahydrat in der Analyse. Als Verschnitt wurde

wasserfreies Natriummonohydrogenphosphat verwendet. Geben Sie Ihre Berechnungen

(in übersichtlicher und nachvollziehbarer Form!) zusammen mit Ihrem Analysenheft zur

Korrektur ab.

Bitte beachten Sie den Aushang am Gerät!

IRIRIRIR----AnalyseAnalyseAnalyseAnalyse

Eine Reinsubstanz soll mittels IR identifiziert werden. Es handelt sich dabei um eine der

Substanzen, die auch als Monographieanalyse ausgegeben werden. Es soll ein IR-Spektrum

aufgenommen werden (Gerät im 3. OG). Anhand eines Vergleichsspektrums / des EuAB-

Kommentars (im Praktikum vorhanden) ist die Substanz zu identifizieren, die wesentlichen IR-

Absorptionsbanden sind zu benennen. Das aufgenommene Spektrum wird mit dem

Analysenheft abgegeben.

24

7.47.47.47.4 Wasserfreie TitrationenWasserfreie TitrationenWasserfreie TitrationenWasserfreie Titrationen

Alle wasserfreien Titrationen mit Perchlorsäure müssen unter den Abzügen durchgeführt

werden!

Titrieren Sie nur mit geeignetem Spritzschutz!

Für die Entsorgung stehen Spezialtonnen zur Verfügung.

Im Assistentenraum stehen einige Elektroden für die wasserfreie Titration zur Verfügung. Diese

können bei der Gehaltsbestimmung von Coffein bzw. Thiaminnitrat (siehe jeweilige

Arzneibuchvorschrift) alternativ zu den unter 6.7.2 angegebenen Farbindikatoren verwendet

werden.

PropyphenazonPropyphenazonPropyphenazonPropyphenazon –––– SondervorschriftSondervorschriftSondervorschriftSondervorschrift

Etwa 0,500 g Substanz, genau gewogen, werden in einer Mischung von 10 mL wasserfreier

Essigsäure R (EuAB) und 10 mL Acetanhydrid R (EuAB) gelöst. Nach Zusatz von 2 mL Dioxan R

(EuAB) und 0,15 mL Naphtholbenzein-Lösung R (EuAB) wird die Bestimmung mit Perchlorsäure

(0,1 mol/L) durchgeführt. 1 mL Perchlorsäure entspricht 23,03 mg Propyphenazon.

PhenytoinPhenytoinPhenytoinPhenytoin

0.500 g Substanz werden in 40 mL Dimethylformamid gelöst. Nach Zusatz von 0.2 mL

Thymolphthalein RN 2 (DAB 9) wird mit NaOH (0,1 mol/L) bis zum Farbumschlag nach hellblau

titriert. 1 mL NaOH entspricht 25,23 mg Phenytoin,

7.57.57.57.5 DünnschichtchromatographieDünnschichtchromatographieDünnschichtchromatographieDünnschichtchromatographie

DC der AnalgetikaDC der AnalgetikaDC der AnalgetikaDC der Analgetika

Arbeitsvorschrift:

Identifizierung von Analgetika, s. Pharmazeutische Zeitung, 137 (1992), 4188

Die Vergleichssubstanzen sind jeweils zu Praktikumsbeginn bei den diensthabenden

Assistenten abzuholen und spätestens am Ende des Praktikumstages wieder abzugeben. In In In In

den Schraubdeckelgläsern werden keine Vergleichslösungen angesetzt. den Schraubdeckelgläsern werden keine Vergleichslösungen angesetzt. den Schraubdeckelgläsern werden keine Vergleichslösungen angesetzt. den Schraubdeckelgläsern werden keine Vergleichslösungen angesetzt. Die Herstellung der

Fließmittelgemische erfolgt unter dem Abzug. Für eine große DC-Kammer benötigt man 20 –

30 mL Fließmittel, für die kleinen Kammern nicht mehr als 10 mL.

Es sind eine bis drei der folgenden Substanzen enthalten: Acetylsalicylsäure, Coffein,

Diclofenac, Metamizol, Paracetamol, Phenazon, Phenylbutazon, Propyphenazon.

Bitte geben Sie bei der Ansage des Ergebnisses die DC-Platte mit ab!

25

7.67.67.67.6 Identitätsreaktionen auf funktionelle GruppenIdentitätsreaktionen auf funktionelle GruppenIdentitätsreaktionen auf funktionelle GruppenIdentitätsreaktionen auf funktionelle Gruppen

Folgende Identitätsreaktionen werden durchgeführt:

Alkaloide, prim. arom. Amine, Barbiturate, Benzoat, Citrat, Salicylat, Tartrat, Xanthine, reduz.

Substanzen (nach Glucose EuAB, Prüfung C)

Die benötigten Lösungen und Reagenzien werden gruppenweise für das ganze Semester

hergestellt (Einteilung hängt im Praktikum aus). Rechnen Sie mit einer Versuchszahl von etwa

viermal der Studentenzahl im Semester für die Ansatzmenge. Benötigte Substanzen stehen im

Reagenzienregal bereit. Die Reagenzien werden ordnungsgemäß (Gefahrensymbole etc.)

beschriftet. Eventuell müssen noch zusätzlich PET-Flaschen / Deckel etc. in der Glasausgabe

gekauft werden. Es ist jeweils eine Substanz in der Analyse enthalten, die aber ggfs. mehrere

positive Nachweise ergeben kann (z. B. p-Aminosalicylsäure-Na, Coffein-Natriumbenzoat,

Coffein-Natriumsalicylat).

• Geben Sie nur die Stoffgruppe(n) / Funktionelle(n) Gruppe(n) im Analysenheft an,

nicht die Substanz, die Sie vermuten.

• Falsch positive Nachweise:

Xanthine und Sulfathiazol können auch einen positiven Alkaloidnachweis ergeben,

die Lösung ist nur etwas schwächer gefärbt.

Reduzierende Zucker ergeben auch einen (schwach) positiven Barbituratnachweis.

Xanthine und Sulfathiazol reagieren ebenfalls positiv auf Barbiturate.

Auch bei den Farbreaktionen sollten Sie immer Vergleiche mit den

Vergleichssubstanzen durchführen!

26

7.77.77.77.7 MonMonMonMonographienographienographienographien

In diesem Arbeitsabschnitt sollen vier Monographien des EuAB aus der folgenden Auswahl

exemplarisch bearbeitet werden. Der jeweilige Arzneistoff bzw. Hilfsstoff wird in drei

getrennten Analysengefäßen angefordert (Beschriftung s. Abschnitt 4).

Es müssen jeweils Identität, Reinheit und Gehalt geprüft werden. Welche der Identitäts- bzw.

Reinheitsprüfungen durchgeführt werden, ist im Folgenden angegeben. Die Herstellung der

benötigten Reagenzien erfolgt gruppenweise während des Abschnitts „Identität funktioneller

Gruppen“ (Einteilung wird ausgehängt). Die Ergebnisse der Prüfungen sind als Protokoll auf

einem Formblatt nach ApBetrO festzuhalten (Kopierexemplare werden ausgegeben). Im

Analysenheft wird lediglich das Gesamturteil der Identitäts- und Reinheitsprüfungen bzw. der

Gehalt angegeben.

Die Bewertung der einzelnen Prüfungen erfolgt mit ,,richtig“ oder ,,falsch“. Ist eine der Prüfung

mit „falsch“ bewertet, werden alle Identitäts- bzw. Reinheitsprüfungen mit neuer

Analysensubstanz wiederholt. Die Gehaltsbestimmungen müssen gegebenenfalls so oft

wiederholt werden, bis der gefundene Analysenwert innerhalb der äußersten Fehlergrenze liegt

(Punkteschema s. Abschnitt 4).

7.7.17.7.17.7.17.7.1 Substanzliste und AufgabenSubstanzliste und AufgabenSubstanzliste und AufgabenSubstanzliste und Aufgaben

Acetylsalicylsäure Identität: A, B, C, D (s. Anmerkungen) Reinheit: Salicylsäure (nach EuAB 1997), Schwermetalle Gehalt: X

Ascorbinsäure Identität: A ( %1

1cmA (243 nm) = 545 – 585), C, D

Rh.: Oxalsäure (Verunreinigung E), Schwermetalle, spezifische Drehung Gehalt: X

Citronensäure-Monohydrat Identität: A, B, C (Abzug!), D Reinheit: Oxalsäure, Sulfat, Wasser Gehalt: X

Coffein Identität: A, C, D, F Reinheit: sauer reagierende Substanzen, verwandte Substanzen (DC nach Ph. Eur. 6.0), Schwermetalle Gehalt: Indikator Kristallviolett, X

27

Ibuprofen Identität: A, B, C, D Reinheit: opt. Drehung, verwandte Substanzen (nach Ph. Eur. 6.0, es wird dieselbe HPLC-Methode wie zur Gehaltsbestimmung verwendet, Verunreinigung: Propyphenazon) Gehalt: X

Isoniazid Identität: A, B, C (Smp. ohne Umkristallisation) Reinheit: pH-Wert, Hydrazin und verwandte Substanzen, Schwermetalle Gehalt: X

Lidocain-Hydrochlorid (Monographie nach Ph. Eur. 5.0) Identität: A, B, D, E, F Reinheit: Aussehen der Lösung, pH-Wert, 2,6-Dimethylanilin (im Messzylinder), Schwermetalle Gehalt: X

Metamizol-Natrium Identität: A, B, C Reinheit: sauer oder alkalisch reagierende Substanzen, fremde Substanzen (per DC nach DAB 9 – Ethylacetat statt Butylacetat verwenden), Sulfat, Schwermetalle Gehalt: XX

Paracetamol Identität: A, B, C, D, E Reinheit: Schwermetalle, Trocknungsverlust, 4-Aminophenol (nach Ph. Eur. 4.0) Gehalt: nach USP 31, XX

Promethazin-Hydrochlorid Identität: A, C, D Reinheit: verwandte Substanzen (nach Ph. Eur. 5.0), pH-Wert, Schwermetalle: Prüfung B Gehalt: XX

Sulfadiazin Identität: A, D Reinheit: sauer reagierende Substanzen, verwandte Substanzen, Schwermetalle Gehalt: X

Thiaminnitrat Identität: A, B, C Reinheit: pH-Wert, Schwermetalle, Trocknungsverlust Gehalt: Indikator: Kristallviolett, X

Tryptophan Identität: B, D Reinheit: spezifische Drehung, DC mit Ninhydrin nachweisbare Substanzen, Schwermetalle, Sulfat Gehalt: XX

28

7.7.27.7.27.7.27.7.2 MonographMonographMonographMonographieieieie----AnalytikAnalytikAnalytikAnalytik

Beachten Sie folgende Hinweise

• Es ist auf dem Formblatt kurz zu beschreiben, welche Prüfungen wie durchgeführt

wurden, was das Ergebnis der einzelnen Prüfungen auf Identität, Reinheit und Gehalt

ist und ob die einzelnen Prüfungen jeweils dem Arzneibuch entsprechen oder nicht. Es

ist mit einem Gesamturteil am Ende zu vermerken, ob die Substanz den Anforderungen

des Arzneibuches entspricht oder nicht.

• DC-Platten sowie aufgenommene UV- und IR-Spektren werden mit dem Formblatt

abgegeben, wobei die die spez. IR-Absorptionsbanden gekennzeichnet den

entsprechenden funktionellen Gruppen zugeordnet werden sollen.

• Schwermetalle: Bei Angabe Methode C, D oder E im EuAB muss Methode A verwendet

werden. Achten Sie jedoch darauf, die Konzentration Ihrer Blei-Lösung anzupassen.

Stellen Sie sich selber positive Analysen her, damit sie NS/Färbung sicher beurteilen

können. Der Nachweis erfordert viel Fingerspitzengefühl.

• Acetylsalicylsäure: Bei der Indigo-Reaktion tritt der Farbumschlag nach Blau bei

Ansäuern mit HCl u. U. nicht ein.

• Ascorbinsäure: Prüfung D: Der Niederschlag kann eher beige als grau sein.

• Metamizol-Natrium: Prüfung B: Die Färbung kann auch gelbrot statt rot sein. Prüfung C:

Nehmen Sie evtl. etwas mehr Analysensubstanz.

29

8888 AnhangAnhangAnhangAnhang

8.18.18.18.1 EntsorgungsrichtlinienEntsorgungsrichtlinienEntsorgungsrichtlinienEntsorgungsrichtlinien

• halogenierte und nicht-halogenierte organische Lösungsmittel

� 10-L-Kunststoffkanister, kein Wasser (Scheidetrichter)

• Schwermetalle, v. a. Ce, Pb

� 30-L-Kunststoffkanister

„Wäßrige Waschflüssigkeiten und Mutterlaugen – pH 1“

• Lösemittel/Wassergemische

� 30-L-Kunststoffkanister

„Wäßrige pharmazeutische Abfälle“ z.B. DMF/Wasser Abfälle

• Abfälle der HPLC-Aufgabe

� 30-L-Kunststoffkanister „Acetonitril/Wassergemische 6:4“

• Perchlorsäure

� 30-L-Kunststoffkanister „Perchlorsäurehaltige Abfälle“

• Feststoffe

� Feststofftonne „Organische Feststoffe“

� Feststofftonne „Filterpapiere“ (Feststoffrückstände vorsichtig abklopfen und

geeignet entsorgen (s.o.))

30

8.28.28.28.2 Versuchsauswertung Methodenvergleich IbuprofenVersuchsauswertung Methodenvergleich IbuprofenVersuchsauswertung Methodenvergleich IbuprofenVersuchsauswertung Methodenvergleich Ibuprofen----Gehalt: HPLC (USP) mit Acidimetrie (EuAB)Gehalt: HPLC (USP) mit Acidimetrie (EuAB)Gehalt: HPLC (USP) mit Acidimetrie (EuAB)Gehalt: HPLC (USP) mit Acidimetrie (EuAB)

Gleichung:Gleichung:Gleichung:Gleichung: Wahrer Wert [%]:Wahrer Wert [%]:Wahrer Wert [%]:Wahrer Wert [%]:

Einwaage [mg]Einwaage [mg]Einwaage [mg]Einwaage [mg] FlächeFlächeFlächeFläche FlächeFlächeFlächeFläche I.S.I.S.I.S.I.S. Fl./Fl.Fl./Fl.Fl./Fl.Fl./Fl. I.S.I.S.I.S.I.S. Konz. [µg/mLKonz. [µg/mLKonz. [µg/mLKonz. [µg/mL]]]] Gehalt [%]Gehalt [%]Gehalt [%]Gehalt [%] MittelwertMittelwertMittelwertMittelwert Gehalt [%]Gehalt [%]Gehalt [%]Gehalt [%]

VarianzVarianzVarianzVarianz Richtigkeit Richtigkeit Richtigkeit Richtigkeit (WFR) [%](WFR) [%](WFR) [%](WFR) [%]

SDSDSDSDGehaltGehaltGehaltGehalt SSSSrel rel rel rel [%][%][%][%]

Einwaage [mg]Einwaage [mg]Einwaage [mg]Einwaage [mg] Titrationsvol. Titrationsvol. Titrationsvol. Titrationsvol. [mL[mL[mL[mL]]]]

Gehalt Gehalt Gehalt Gehalt [%][%][%][%]

MittelwertMittelwertMittelwertMittelwert Gehalt [%]Gehalt [%]Gehalt [%]Gehalt [%]

VarianzVarianzVarianzVarianz RichtigkeitRichtigkeitRichtigkeitRichtigkeit (WFR) [%](WFR) [%](WFR) [%](WFR) [%]

FFFF----TestTestTestTest tttt----TestTestTestTest

SDSDSDSD GehaltGehaltGehaltGehalt SSSSrelrelrelrel [%][%][%][%]

Faktor der Faktor der Faktor der Faktor der MaßlösungMaßlösungMaßlösungMaßlösung

Verbrauch Verbrauch Verbrauch Verbrauch BlindtitrationBlindtitrationBlindtitrationBlindtitration

1. Ermittelte Werte eintragen, Einzelgehalte, Mittelwert, Srel und die übrigen Werte berechnen. Geben Sie ausführliche und nachvollziehbare Rechenwege aller Werte im Protokoll an.

2. Protokoll, Diskussion und ggf. Fehlerdiskussion erfolgen handschriftlich und leserlich auf einem gesonderten Zettel. Der formale Aufbau eines Protokolls ist zu berücksichtigen. Erklären Sie insbesondere die Bedeutung der statistischen Begriffe in Bezug auf die durchgeführten Experimente.

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