HIVDiagnostik und Verlaufskontrolle

Referat

KlassifizierungFamilie der RetrovirenHIV-1 (Gruppe M,N,O; Subtypen A-K)HIV-2 (Subtypen A-F)in Europa/ USA: v. a. HIV-1 M:B

Herkunfthnliche Viren bei Affen sehr verbreitet (SIV)Vor 70-80 Jahren bergang auf den Menschen:In Zentralafrika: HIV-1In Westafrika: HIV-2Durch Globalisierung weltweite Ausbreitung v. a. des HIV-1

Allgemeinesbertragung durch Sexualkontakte, BlutCharakteristisch: lange Inkubationszeit von 10-15 JahrenDoppelinfektionen mit 2 verschiedenen Typen mglichIm Verlauf evtl. VirusmutationAnonymisierte Meldepflicht

Das VirusKapsid mit 2 linearen RNA-GenomenSpike-tragende Auenhlle

WirkungsweiseHauptzielzelle: CD4-LymphozytAuch: Makrophagen, Mikroglia HIV-Oberflchenprotein gp120 interagiert mit Rezeptor und Co- Rezeptor, um in Zelle zu gelangenRNA zur DNA revers transkribiert, ins Zellgenom eingebautVermehrung in Zelle Zerstrung Absinken der CD4-Zellen

TestverfahrenEinverstndniserklrung des Patienten ntigOberste Regel: Ausschluss von Irrtmern im gesamten ArbeitsablaufBei reaktiver Probe: IMMER 2. Blutprobe abnehmen und erneut kontrollieren

Test auf HIV-AntikrperELISA: gentechnologisch hergestelltes Antigen aus VirusstrukturkomponentenTests sollten alle HIV-1/-2-Subtypen erfassen3- 4 Wochen nach Infektion (lebenslang) nachweisbare Antikrperbildungpositives Ergebnis wird mit alternativen Methoden berprft (v. a. Western-Blot), da evtl. Kreuzreaktion anderer Antikrper

Alternative MethodenWestern-Blot: Elektrophorese der HIV-Strukturproteine, dann wie ELISA mit definierten AntigenenMindestzahl von Immunkomplexen schliet unspezifische Kreuzreaktion aus

Alternative MethodenRadioimmunprzipitationsassay :hnlich wie Western-BlotRadioaktiv markierte HIV-Strukturkomponenten werden mit Antikrpern inkubiertPrzipitation, Dissoziation, Elektrophorese, autoradiographische Darstellung

Alternative MethodenIndirekte Immunfluoreszenz:charakteristische Fluoreszenzmuster von an infizierte Zellen gebundenen Antikrpern

Alternative MethodenLiquorprobe:Antigen-Antikrper-Reaktion im Vergleich zum PlasmaWenn reaktive Banden sichtbar: intrathekale AntikrperproduktionFolge einer zustzlichen ZNS-Infektion mit HIV

Test auf HIV-AntigeneSeparater Test auf alle Strukturproteine des HIVPositiv: wenn Reaktion mit gp120 oder gp41 und min. einem weiteren StrukturproteinKontrolle mit 2. BlutprobeBesttigt seropositiv: HIV-Trger3-6 Wochen nach Infektion Antigene im Serum nachweisbar

Test auf HIV-AntigeneMessung des p24-Antigens (Hauptkomponente der inneren Viruskapsel)Bis zu 10 Tage frher positiv als AntikrpertestNur im Einzelfall durchgefhrt (Kosten-Nutzen-Analyse)

Virusisolierungaus EDTA-Blut, Plasma, isolierten Lymphozyten, mononukleren Zellen Dauer: ca. 6 WochenNicht fr RoutinemessungBestimmung des Infektionstiters ber freigesetztes p24-AntigenHinweis zur Prognose

Molekularbiologische VerfahrenBestimmung der Virmie mittels HIV-RNA im PlasmaDer quantitativen HIV-Antigen-Messung berlegenAuerordentlich hohe Sensitivitt und SpezifittPCR hat sich durchgesetztNachteil: relativ teuer

Molekularbiologische VerfahrenPCR:Untere Nachweisgrenze: 200 Virusquivalente/ lHIV-RNA bereits 1-2 Wochen nach Infektion im Plasma nachweisbarPrognostisch ungnstig: > 10000 Genomkopien

Molekularbiologische VerfahrenGenotypisierung:cDNA-Sequenzierung des HIV-Stammes, wenn Verdacht auf therapieresistente Variation des Virus Virmieanstieg unter Therapie Therapiewechsel

Virmie (Viruslast)Klassifizierung nach der HIV-RNA-Plasmakonzentration: Risiko einer Progression bei >100000 Kopien/ml ist 12x so hoch wie bei

Virmie (Viruslast)Therapie-/Verlaufskontrolle: Absinken der HIV-Replikation unter Nachweisgrenze ist TherapiezielMenge der HIV-RNA im Plasma korreliert mit Krankheitsprogression & berlebenszeitVirmie ist entscheidender Prognosefaktor

CD4-ZellzahlWichtig fr Prognose, der Virmie jedoch deutlich unterlegenGibt Auskunft ber Ausma des Immundefekts: >400/l: AIDS-definierende Erkrankungen selten

VerlaufskontrollenBlutbildHIV-Serologie (anti-p24-Antikrper, p24-Antigen)Lymphozytentypisierung (CD4/ CD8)Quotient CD4-/ CD8-Zellzahl 2-MikroglobulinEvtl.Serumspiegel der antiretroviralen Medikamente

VerlaufskontrollenHIV-RNA-Bestimmung alle 3-4 Monate fr Prognose/ TherapiekontrolleWenn Therapieentschluss: auch unmittelbar vor Beginn, nach 4 Wochen, alle 3 Monate Therapieeffekt an Zunahme der CD4-Zellen und Rckgang der Viruslast feststellbar

Ungnstige PrognoseErhhte Viruslast (>10000 Kopien/ml) bei 1. UntersuchungAnstieg der Viruslast, Persistenz bei >10000 Kopien/mlAbfall der CD4-ZellzahlAnstieg des 2-MikroglobulinProgression des klinischen StagingsSpter Therapiebeginn

FragenWelche Testverfahren werden beimHIV-Screening angewendet?DNA-SequenzierungTest auf HIV-AntikrperVirusisolierungTest auf HIV-AntigenUrinsediment

FragenAlternativ durchfhrbare Methoden der HIV-Diagnostik sind?RadioimmunprzipitationsassayIndirekte ImmunfluoreszenzLiquordiagnostikTest auf occultes Blut im StuhlELISA auf HIV-Antikrper

FragenWichtige Marker zur Prognose derHIV-Infektion sind?CD4-ZellzahlThrombozytenzahlHmoglobinGlucose im UrinVirmie

QuellenThomas, Lothar: Labor und Diagnose, 7. Auflage, TH-BooksHusstedt, I. W. (Hrsg.): HIV & AIDS, SpringerHirschel, Bernhard: AIDS- Diagnose, Betreuung, Behandlung, 2. Auflage, Hans HuberRenz, Harald: Praktische Labordiagnostik, de GruyterHerold, Gerd: Innere Medizin 2011

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