T- und B-Zell Crossmatch (FCXM) - Rotes Kreuz: Home · monoklonalen Antikörpern (CD3+...

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Indikation Patienten vor Organtransplantationen können Al- loantikörper entwickeln, die häufig gegen HLA- Antigene gerichtet sind. Diese Alloimmunisierung kann durch Bluttransfusionen, vorherige Trans- plantationen oder Schwangerschaften erfolgen. Zum Nachweis von HLA-spezifischen Antikörpern wird eine Kreuzproben-Testung mittels Durchfluß- zytometrie im Rahmen der Lebend-Nieren- Transplantation sowie zur weiteren Absicherung des im lymphozytotoxischen Crossmatch ermittel- ten Ergebnisses durchgeführt, da mit dem durch- flußzytometrischen Crossmatch auch nicht- komplementaktivierende Antikörper erfaßt wer- den. Testprinzip Der durchflußzytometrische Crossmatch (FCXM) ist ein indirekter Immunfluoreszenz Test. Zum Nachweis der IgG Antikörper werden im ers- ten Schritt die Lymphozyten des Organspenders mit dem Serum des Empfängers inkubiert. Im zweiten Schritt inkubiert man mit linienspezifischen monoklonalen Antikörpern (CD3+ T-Lymphozyten, CD19+ B-Lymphozyten). Die Zugabe eines fluores- zierenden IgG (Fab‘-Fragmentes) Antikörpers zeigt eventuell vorhandene gebundene IgG- Antikörper an. Ergebnisse Nachweis von spenderzell-spezifischen IgG- Antikörpern Positiver T-Zell Crossmatch => Verdacht auf HLA-Klasse I-Antikörper Antikörperbindung auf B-Zellen => Verdacht auf HLA-Klasse II-Antikörper Vorteile und Nutzen Höhere analytische und diagnostische Sensitivi- tät gegenüber Lymphozytotoxizitäts-Crossmatch Aussage zur Targetspezifität (T- und B- Lymphozyten) möglicher Antikörper Erfassung auch nicht –komplementaktivierender Antikörper (IgG2 und IgG4) Probenmaterial und Versand 2 x 9 ml Heparin-Vollblut (vom Spender), 2 ml Serum (vom Empfänger), ungekühlter Probenver- sand Ergebnisse und Befund Fertigstellung des Befundes innerhalb von 48 Stunden Die Übermittlung des Befundes erfolgt nach Ver- einbarung per Post oder Fax. T- und B-Zell Crossmatch (FCXM) Österreichisches Rotes Kreuz, Landesverband OÖ, Blutzentrale Linz, Krankenhausstraße 7, 4010 Linz, Tel. 0732 / 777 000 www.roteskreuz.at/ooe, [email protected] ZVR-Nr. 534696372 KONTAKT: Team Speziallabor +43 (0) 732 777000 350 [email protected]

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Indikation

Patienten vor Organtransplantationen können Al-

loantikörper entwickeln, die häufig gegen HLA-

Antigene gerichtet sind. Diese Alloimmunisierung

kann durch Bluttransfusionen, vorherige Trans-

plantationen oder Schwangerschaften erfolgen.

Zum Nachweis von HLA-spezifischen Antikörpern

wird eine Kreuzproben-Testung mittels Durchfluß-

zytometrie im Rahmen der Lebend-Nieren-

Transplantation sowie zur weiteren Absicherung

des im lymphozytotoxischen Crossmatch ermittel-

ten Ergebnisses durchgeführt, da mit dem durch-

flußzytometrischen Crossmatch auch nicht-

komplementaktivierende Antikörper erfaßt wer-

den.

Testprinzip

Der durchflußzytometrische Crossmatch (FCXM)

ist ein indirekter Immunfluoreszenz Test.

Zum Nachweis der IgG Antikörper werden im ers-

ten Schritt die Lymphozyten des Organspenders

mit dem Serum des Empfängers inkubiert. Im

zweiten Schritt inkubiert man mit linienspezifischen

monoklonalen Antikörpern (CD3+ T-Lymphozyten,

CD19+ B-Lymphozyten). Die Zugabe eines fluores-

zierenden IgG (Fab‘-Fragmentes) Antikörpers

zeigt eventuell vorhandene gebundene IgG-

Antikörper an.

Ergebnisse

• Nachweis von spenderzell-spezifischen IgG-

Antikörpern

• Positiver T-Zell Crossmatch => Verdacht auf

HLA-Klasse I-Antikörper

• Antikörperbindung auf B-Zellen => Verdacht

auf HLA-Klasse II-Antikörper

Vorteile und Nutzen

• Höhere analytische und diagnostische Sensitivi-

tät gegenüber Lymphozytotoxizitäts-Crossmatch

• Aussage zur Targetspezifität (T- und B-

Lymphozyten) möglicher Antikörper

• Erfassung auch nicht –komplementaktivierender

Antikörper (IgG2 und IgG4)

Probenmaterial und Versand

2 x 9 ml Heparin-Vollblut (vom Spender), 2 ml

Serum (vom Empfänger), ungekühlter Probenver-

sand

Ergebnisse und Befund Fertigstellung des Befundes innerhalb von 48

Stunden

Die Übermittlung des Befundes erfolgt nach Ver-

einbarung per Post oder Fax.

T- und B-Zell Crossmatch (FCXM)

Österreichisches Rotes Kreuz, Landesverband OÖ, Blutzentrale Linz, Krankenhausstraße 7, 4010 Linz, Tel. 0732 / 777 000

www.roteskreuz.at/ooe, [email protected]

ZVR-Nr. 534696372

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Team Speziallabor

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